流式細胞術聯合腦脊液檢測在原發性中樞神經系統淋巴瘤診斷中的價值

鄭勇浪 李相兵

1 四川省達州市中心醫院檢驗科 635000; 2 眉山心腦血管病醫院檢驗科

原發性中樞神經系統淋巴瘤(Primary central nervous system lymphoma,PCNSL)是指原發于顱內、眼睛、脊髓及軟腦膜等部位, 并排除中樞神經系統以外的其他淋巴結受累的非霍奇金淋巴瘤,其中大部分為彌漫大B細胞淋巴瘤。PCNSL起病較急,進展快,侵襲性大,對身體損傷較大,患者預后較差[1]。PCNSL的臨床診斷有一定的困難,誤診率較高,盡早診斷可以減少因疾病本身或者不必要的治療導致的其他損傷,能夠有效地改善患者的預后。腦脊液細胞形態學檢測是監測腦脊液中是否存在異常細胞的常規檢測方法,流式細胞術可提高腦脊液的檢測準確度。有研究表明[2],流式細胞術可以提高診斷效率和準確率,可以快速準確地鑒別與診斷良惡性淋巴瘤。腦脊液檢測在中樞神經系統相關疾病的診斷中有較好的應用,能提高中樞神經系統相關疾病診斷的準確性[3-4],而流式細胞術用于檢測腦脊液中的腫瘤細胞可以提高檢測結果的準確性。本文欲探討腦脊液流式細胞術檢測應用于PCNSL診斷中的價值。報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年2月—2019年10月達州市中心醫院收治的診斷為PCNSL的56例患者作為觀察組。2018年2月—2021年10月診斷為中樞神經系統感染性疾病的60例患者作為對照組。觀察組患者均經病理學檢查確診為原發性PCNSL,且既往無鞘注化學治療史。對照組患者納入標準為未合并淋巴結感染。兩組患者均排除累及其他部位淋巴瘤侵犯者及基礎狀況較差無法配合研究治療者。所有入組患者均對本研究知情同意并簽署知情同意書。本研究符合并通過醫院倫理委員會的批準。觀察組:男38例,女18例,年齡23～65歲,平均年齡(55.63±9.23)歲。對照組:男36例,女24例,年齡29～64歲,平均年齡(53.75±9.73)歲。兩組性別、年齡比較,差異無統計學意義(P>0.05)。

1.2 方法 (1)取腦脊液:入組患者側臥于硬板床上,盡量保持背部與床面垂直,將頭彎曲于胸前,抱住雙膝使腰部弓起,從第3、4腰椎間隙穿刺進去,垂直進針棘間隙與脊柱取腦脊液9ml。(2)流式細胞術:將3ml腦脊液離心1 500r/min,離心5min。涂片、干燥,進行瑞氏染色,放大1 000倍觀察細胞形態。調整細胞濃度,取離心后的腦脊液標本,加入表面標志抗體的流式管中,混勻后靜置15min,加入1ml磷酸鹽緩沖溶液(PBS)沖洗、混勻、然后繼續離心5min,轉速1 000r/min,棄上清液,使用PBS洗滌2 次。使用 Becton-Dickinson公司 FACSDiva Version 6.1軟件進行分析。(3)腦脊液常規檢查包括一般性狀檢查、蛋白定性、細胞計數和分類。將腦脊液標本低溫離心2 000r/min,離心10min,收集上清液保存,-80℃。腦脊液蛋白定性檢測使用苯酚,定量檢測用磺基水楊酸。使用生化分析儀直接定量測定腦脊液糖、蛋白、氯的水平,使用酶聯免疫吸附法檢測腦脊液中細胞因子趨化因子配體(CXCL-13)及白細胞介素(IL)-10濃度。

1.3 評價指標 (1)比較兩組患者的腦脊液細胞學、腦脊液有核細胞數以及腦脊液糖、蛋白、氯、CXCL-13、IL-10的水平。(2)IL-10診斷原發性PCNSL的價值分析。

2 結果

2.1 原發性PCNSL腦脊液流式細胞術檢測結果 56例原發性PCNSL患者中,腦脊液中淋巴瘤細胞占比為33.93%(19/56)。

2.2 兩組腦脊液生化檢測結果比較 觀察組腦脊液蛋白高于對照組,差異有統計學意義(P<0.05)。兩組腦脊液糖、氯比較,差異無統計學意義(P>0.05),見表1。

表1 兩組腦脊液生化檢測結果比較

2.3 兩組細胞因子檢測結果比較 觀察組腦脊液CXCL-13表達陽性率及腦脊液中IL-10含量均高于對照組,差異有統計學意義(P<0.05),見表2。

表2 兩組細胞因子檢測結果比較

2.4 腦脊液蛋白和IL-10聯合診斷原發性PCNSL的價值分析 腦脊液蛋白和IL-10聯合診斷原發性PCNSL的ROC曲線下面積為0.845,標準誤為0.001,95%置信區間0.672～0.853,靈敏度和特異度為84.32%和92.13%。

3 討論

原發性中樞神經系統淋巴瘤(PCNSL)進展迅速,病程兇險,而且預后很差。近年來,PCNSL發病率呈增長趨勢,而且其治療結果依賴于診斷,早期PCNSL治療結果及預后均較好[5-6]。由于PCNSL患者的主要臨床癥狀比較隱匿,進展到后期會表現為明顯的精神癥狀改變,顱內壓增高及局部的壓迫癥狀,但是早期癥狀不明顯,導致大部分PCNSL患者就診時已處于晚期[7-8]。顱腦影像學檢查也無法明確診斷早期PCNSL[9-10],其他藥物的使用也會降低活檢檢出率,活檢檢測會對患者的腦組織有一定程度的創傷,而且還有較高的誤診率[11-13]。因此,急需輔助診斷PCNSL的診斷方法。

本文結果顯示,觀察組患者腦脊液中淋巴瘤細胞占比為33.9%,因腦脊液中直接發現淋巴瘤細胞是診斷PCNSL的直接依據,顯示流式細胞術用于PCNSL診斷中有較好的診斷價值。本文結果還顯示,PCNSL患者腦脊液CXCL-13表達陽性率明顯高于對照組(P<0.05),且觀察組陽性率為100.00%。CXCL-13屬于趨化因子家族成員之一,能夠輔助促進輔助性T細胞、樹突狀細胞及巨噬細胞的成熟,在免疫應答中發揮重要作用,它能夠促進惡性腫瘤的發生、發展和轉移,因此在惡性腫瘤中含量較高。有研究顯示,PCNSL患者的腦脊液中CXCL-13含量為100%,與本文結果一致[14]。

本文結果顯示,觀察組腦脊液蛋白高于對照組(P<0.05)。原因為PCNSL會引起腦脊液蛋白循環通路梗阻,然后導致蛋白的含量增加。本文腦脊液生化檢測顯示,兩組腦脊液糖、氯含量比較,差異無統計學意義(P>0.05)。觀察組腦脊液中IL-10含量高于對照組(P<0.05)。IL-10主要參與免疫應答和炎癥介導,能夠從一定程度上促進腫瘤的生長,然后抑制腫瘤細胞凋亡。通過調節腫瘤細胞與其他細胞之間的相互作用,可以為腫瘤侵襲其他組織提供有利的環境。在淋巴瘤中,腫瘤細胞的自分泌導致IL-10含量高,使IL-10可作為診斷PCNSL的依據[15]。

綜上所述,在PCNSL的診斷中可以通過腦脊液流式細胞術聯合腦脊液測定盡早監測并輔助診斷,以期進行早期干預來降低疾病的病死率,改善預后。