不同劑量萬古霉素對慢性心力衰竭大鼠心功能、腎功能及神經內分泌因子的影響及其血藥濃度變化

丁小瓊 王清傳 王元標 張志敏

(新疆軍區總醫院1 派駐門診部,2 干部保健科,3 心內科,新疆烏魯木齊市 830000)

慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)是心臟疾病發展至終末期的臨床綜合征,發病機制與心肌長期缺血導致心臟結構改變,心臟血流灌溉不足而無法維持組織代謝導致靜脈系統淤血有關[1]。持續存在的心力衰竭狀態可導致心肌重構,增加患者猝死的風險。CHF發生后心臟結構及功能改變會導致心室射血能力受損,主要表現為心室收縮能力減弱而不能滿足機體代謝所需,因此提高心室收縮能力對于改善CHF患者的預后具有重要意義[2]。CHF的病理生理機制復雜,在對心臟功能產生影響的同時,還對腎臟、骨骼、內分泌及免疫系統產生影響[3]。CHF發生后,機體交感神經興奮性增加,可導致循環系統中的血管緊張素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,AngⅡ)等因子表達異常,使心率加快、心肌耗氧量增加,促使心肌細胞凋亡與心臟重塑[4]。因此,明確CHF患者神經內分泌相關因子表達水平的變化情況可為CHF的治療提供新方向。目前,CHF的發病人群以中老年人群為主,這類人群機體免疫力較低,更容易感染外界病原菌,進而出現病情加重,因此,給予抗感染藥物治療將有助于控制疾病進展[5]。有學者發現,采用萬古霉素進行抗感染治療可以改善CHF患者的臨床療效,但是長期使用不良反應較大,且隨著萬古霉素劑量的增加,其血藥濃度升高,對患者腎臟損傷較大[6]。因此,本研究探討不同劑量萬古霉素對CHF模型大鼠的心功能、腎功能和神經內分泌因子水平的影響及其血藥濃度變化,以期為臨床用藥選擇提供參考。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 72只無特定病原體Wistar大鼠由基爾頓生物科技(上海)有限公司提供[動物許可證號:SYXK(上)2020-0006],雌雄各半,體重200～250 g,將大鼠飼養于動物房內,每5只分籠飼養,12 h光暗循環,無菌飲食喂養2周,按照《實驗動物管理條例》規定進行實驗。所有涉及動物的操作嚴格遵循實驗動物倫理要求。

1.2 主要藥物、試劑與儀器 青霉素(天津華津制藥有限公司,批號:H12021257),鹽酸萬古霉素注射液[VIANEX S.A.(PLANTC)公司,批號:JX20130179],卡托普利(廣州邁特興華制藥廠有限公司,批號:H44023128)。二喹啉甲酸蛋白濃度測定試劑盒(北京百奧萊博科技有限公司,批號:Y12851),GAPDH抗體(Abcam公司,批號:ab263962),蘇木精-伊紅試劑盒(北京索萊寶科技有限公司,批號:G1120),脲酶比色法試劑盒(BioVision公司,批號:K378-100),苦味酸比色法試劑盒、AngⅡ ELISA試劑盒、醛固酮ELISA試劑盒、心鈉素ELISA試劑盒[齊一生物科技(上海)有限公司,批號:QYS-239313、QY-H5560、QY-H10272、QY-H10511],磺基水楊酸-硫酸鈉比濁法試劑盒(北京百奧萊博科技有限公司,批號:GL1854)。低溫高速離心機[河北慧采科技有限公司,型號:TGL-16A(B)]彩色多普勒超聲診斷儀[大為醫療(江蘇)有限公司,型號:S80],熒光顯微鏡(蘇州景通儀器有限公司,型號:DFM-50C),全自動生化分析儀(Beckman Coulter Life Science Inc.,型號:AU5400),普通顯微鏡(OLYMPUS公司,型號:CKX53),蛋白電泳儀(北京六一生物科技有限公司,型號:DYCZ-MINI4),小動物呼吸機(北京金洋萬達科技有限公司,型號:DW3000-B)。

1.3 CHF大鼠模型的建立 按隨機數字表法選取60只大鼠,參考文獻[7]建立CHF模型,建模前采用彩色多普勒超聲診斷儀對大鼠心臟進行檢查,確保心功能正常。通過腹腔注射1%戊巴比妥鈉(40 mg/kg)麻醉大鼠后將其仰臥位固定,連接小動物呼吸機,通氣量為10 mL/kg,呼吸頻率為80次/min,將大鼠四肢連接心電監護電極,于左前第4、5肋間開胸,皮膚切口長度為3 cm,鈍性分離各層組織直至暴露心臟,于距離主動脈根部2 mm處采用6-0無創縫合絲線結扎冠狀動脈左前降支,結扎后心室壁顏色變暗,心電圖提示ST段抬高伴R波高尖,視為結扎成功。逐層縫合皮膚,待大鼠恢復自主呼吸后撤掉呼吸機。術后連續3 d使用青霉素(40萬U)抗感染。4周后進行心臟彩超檢查,以左心室射血分數(left ventricular ejection fraction,LVEF)<45%為建模成功。60只大鼠中,因感染導致死亡5只,其余55只大鼠建模成功。

1.4 分組及干預方法 將造模成功的55只大鼠按隨機數字表法分為CHF組、低劑量萬古霉素組、中劑量萬古霉素組、高劑量萬古霉素組、藥物對照組,每組11只,剩余12只未造模的大鼠納入假手術組(假手術組大鼠僅開胸暴露心臟,不結扎)。建模成功12 h后,分別給予低劑量萬古霉素組、中劑量萬古霉素組、高劑量萬古霉素組大鼠尾部注射25 mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg鹽酸萬古霉素注射液,1次/d,連續干預14 d;藥物對照組大鼠灌胃10 g/mL卡托普利,2 mL/次,1次/d,連續干預14 d;假手術組和CHF組灌胃等體積生理鹽水,1次/d,連續干預14 d。

1.5 觀察指標

1.5.1 心功能指標:干預14 d后,各組大鼠禁食12 h,不禁水。通過腹腔注射1%戊巴比妥鈉(40 mg/kg)麻醉大鼠后將其仰臥位固定,采用彩色多普勒超聲診斷儀進行心功能檢測,探頭頻率為11.4 MHz,圖像深度為2.0～4.0 cm,探查深度為3.5 cm,檢測左心室舒張末期內徑(left ventricular end-diastolic dimension,LVEDD)、收縮末期內徑(left ventricular end-systolic dimension,LVESD),依照文獻[8]的方法計算LVEF和左室短軸縮短率(left ventricular fraction shortening,LVFS)。連續檢測3次,取平均值。

1.5.2 腎功能指標:心功能指標檢測結束后,采集大鼠眼眶靜脈血1.5 mL,以3 000 r/min離心10 min后取上清液,采用脲酶比色法檢查血清尿素氮水平,采用苦味酸比色法檢測血清肌酐水平。在采血前24 h將大鼠分籠飼養收集尿液,采用磺基水楊酸-硫酸鈉比濁法檢測24 h尿蛋白(24-hour urinary protein,UP24)水平。上述檢測方法均嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

1.5.3 血清AngⅡ、醛固酮和心鈉素水平:心功能指標檢測結束后,采集大鼠空腹眼眶靜脈血3 mL,以3 000 r/min離心10 min后取上清液,采用ELISA試劑盒檢測血清AngⅡ、醛固酮及心鈉素水平,操作方法嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.5.4 組織病理學變化:完成上述指標檢測后將大鼠麻醉處死,開胸取出心臟,分離心底大血管及右心室,生理鹽水沖洗后用濾紙吸干,然后摘除腎臟,心臟及腎臟組織摘取過程中盡量減少機械損傷。心臟和腎臟組織經10%甲醛固定過夜,石蠟包埋后制成5 μm厚的切片,37 ℃復溫15 min,二苯甲脫蠟后采用70%～100%乙醇梯度脫水,用蒸餾水沖洗5 min,切片先放入蘇木精染色10 min后再用小流量自來水沖洗,1%鹽酸乙醇褪色變紅后停止操作,再用1%伊紅復染30 s,蒸餾水沖洗30 s,85%-95%-95%乙醇脫水,二苯甲脫水透明,中性樹膠封固,在光學顯微鏡下觀察心肌組織及腎臟組織的形態及結構。

1.5.5 心肌組織AngⅡ、醛固酮和心鈉素蛋白表達水平:取適量心肌組織樣本,剪碎,加入預冷的PBS 1 mL,用組織勻漿器勻漿至無明顯肉眼可見固體(或用液氮研磨),冰上靜置5 min,4 000 r/min離心10 min后取上清液,采用二喹啉甲酸蛋白濃度測定試劑盒檢測蛋白含量。將50 μg蛋白加入SDS凝膠加樣緩沖液中,100 ℃加熱處理5 min使蛋白變性。完成SDS-PAGE后進行轉膜,結束后取下硝酸纖維素膜,在5%脫脂牛奶中4 ℃封閉1 h,然后分別加入10 μL AngⅡ抗體(深圳子科生物科技有限公司,貨號:ZIKER-0587R;稀釋比為1 ∶500)、10 μL醛固酮抗體(艾美捷科技有限公司,貨號5331235-1;稀釋比為1 ∶600)、10 μL心鈉素抗體(上海恒遠生化試劑有限公司,貨號:A-01109;稀釋比為1 ∶600),4 ℃孵育過夜,然后使用TBST洗膜3次,5 min/次,加入IgG辣根過氧化物酶標記二抗(北京博爾科技有限公司,貨號:BHR201;稀釋比為1 ∶1 000),溫室孵育1 h,TBST洗膜3次,5 min/次。以GAPDH(稀釋比為1 ∶2 000)為內參蛋白,用ECL工作液顯影后,采用ProtParam 軟件分析蛋白條帶灰度值。實驗重復3次。

1.6 吸波面積法檢測萬古霉素血藥濃度

1.6.1 對照品儲備液的配制:將5 mL鹽酸萬古霉素注射液置于25 mL容量瓶,加入適量甲醇,超聲30 min,超聲頻率為42 kHz,再加甲醇定容至25 mL刻度線,搖勻,獲得濃度為1.502 μg/mL的對照品儲備液。

1.6.2 專屬性試驗:取0.4 mL大鼠空白血漿,加入3.6 mL甲醇,渦旋2 min后以3 500 r/min離心15 min。以甲醇作為參考,采用紫外可見分光光度法(北京中西華大科技有限公司生產的ZWKJ-SP-755型紫外可見分光光度計)在200～500 nm波長處進行全波長掃描,獲得空白血漿的全波長掃描圖。將濃度為1.502 μg/mL的對照品儲備液1.2 mL加入空白血漿中,再次按上述方法進行全波長掃描,獲得含對照品儲備液的血漿樣品的全波長掃描圖。將兩個全波長掃描圖進行比較,得到空白血漿與含對照品儲備液的血漿樣品之間的吸光度值差值,以此去除空白血漿中內源性物質和其他成分的干擾。

1.6.3 標準曲線的建立:取0.4 mL大鼠空白血漿,加入適量對照品儲備液,分別制成濃度為0.751 μg/mL、1.502 μg/mL、3.004 μg/mL的萬古霉素樣品溶液。采用紫外可見分光光度法在200～500 nm波長處進行全波長掃描,采用Origin 8.0軟件計算吸光度-波長曲線下面積(area under the absorbance-wavelength curve,AUAWC)1。將加入甲醇的空白血漿作為對照(0.5 mL血漿+1.0 μL甲醇),再次按上述方法進行全波長掃描,獲得AUAWC2,AUAWC1和AUAWC2的差值為△AUAWC。以藥物濃度為橫坐標,以AUAWC為縱坐標,繪制標準曲線,并計算得出藥物吸波面積與藥物濃度線性回歸方程:△AUAWC=0.648×藥物濃度+9.709(r=0.999),藥物濃度在6.0～20.0 mg/L范圍內則線性關系良好。

1.6.4 精密度檢測:取0.4 mL大鼠空白血漿,加入適量對照品儲備液,分別制成濃度為0.751 μg/mL、1.502 μg/mL、3.004 μg/mL的萬古霉素樣品溶液,在制成后的24 h內測定每個樣品溶液的AUAWC,計算精密度,精密度(%)=標準偏差/實驗值平均值×100%。0.751 μg/mL、1.502 μg/mL、3.004 μg/mL萬古霉素樣品溶液的精密度分別為5.5%、3.2%及1.2%,說明樣品溶液的精密度良好,符合生物樣品測定要求。

1.6.5 提取回收率的檢測:取0.4 mL大鼠空白血漿,加入適量對照品儲備液,分別制成濃度為0.751 μg/mL、1.502 μg/mL、3.004 μg/mL的萬古霉素樣品溶液,檢測各樣品溶液的AUAWC后,計算提取回收率,公式為K1=(A-B)/C×100%(A指加入標準物質的樣品測得量,B指樣品中該物質的測得量,C指加入的標準物質量)。0.751 μg/mL、1.502 μg/mL、3.004 μg/mL萬古霉素樣品溶液的提取回收率為99.52%、83.20%、79.86%,說明此方法的提取回收率良好,能滿足樣品溶液的測定要求。

1.6.6 不同劑量萬古霉素組大鼠血藥濃度的檢測:取完成心功能檢測后的低劑量萬古霉素組、中劑量萬古霉素組、高劑量萬古霉素組大鼠的血漿(3 000 r/min離心15 min分離血漿),按照1.6.2的方法獲取全波長掃描圖,以大鼠空白血漿為對照,通過Origin 8.0軟件計算萬古霉素不同給藥劑量不同時間段的AUAWC值,利用線性回歸方程得到各時間段的藥物濃度,以藥物濃度為縱坐標,時間為橫坐標,計繪制血藥濃度-時間曲線。

1.7 統計學分析 采用GraphPad Prism 8軟件進行統計學分析。計量資料以(x±s)表示,多組間比較采用單因素方差分析,進一步兩兩比較采用LSD-t檢驗。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 6組大鼠心功能指標的比較 與假手術組相比,CHF組大鼠LVEDD、LVESD升高,LVEF、LVFS降低(均P<0.05);與CHF組相比,低劑量萬古霉素組、中劑量萬古霉素組、高劑量萬古霉素組大鼠的LVEDD、LVESD均降低,LVEF、LVFS均升高(均P<0.05),且總體上呈劑量依賴性變化;高劑量萬古霉素組與藥物對照組的上述指標差異均無統計學意義(均P>0.05)。見表1。

表1 6組大鼠心功能指標的比較(x±s)

2.2 6組大鼠腎功能指標的比較 與假手術組相比,CHF組大鼠的血清肌酐、尿素氮水平和UP24水平均升高(均P<0.05);與CHF組相比,低劑量萬古霉素組、中劑量萬古霉素組、高劑量萬古霉素組大鼠的血清肌酐、尿素氮水平和UP24水平均降低(均P<0.05)。與低劑量萬古霉素組相比,中劑量萬古霉素組大鼠的血清尿素氮、肌酐水平和UP24水平均降低(均P<0.05)。與中劑量萬古霉素組相比,高劑量萬古霉素組大鼠的血清肌酐水平和UP24水平均升高(均P<0.05)。與高劑量萬古霉素組比較,藥物對照組大鼠血清肌酐、尿素氮水平和UP24水平均降低(均P<0.05)。見表2。

表2 6組大鼠血清肌酐、尿素氮水平和UP24水平的比較(x±s)

2.3 6組大鼠血清AngⅡ、醛固酮和心鈉素水平的比較 與假手術組相比,CHF組大鼠的血清AngⅡ、醛固酮和心鈉素水平均升高(均P<0.05);與CHF組相比,低劑量萬古霉素組、中劑量萬古霉素組、高劑量萬古霉素組大鼠的血清AngⅡ、醛固酮和心鈉素水平均降低(均P<0.05),且總體上呈劑量依賴性變化;高劑量萬古霉素組與藥物對照組大鼠上述指標差異均無統計學意義(均P>0.05)。見表3。

表3 6組大鼠血清AngⅡ、醛固酮和心鈉素水平的比較(x±s)

2.4 6組大鼠心肌組織及腎臟組織病理形態 HE染色結果顯示,假手術組大鼠心肌細胞輕微水腫,未見炎癥細胞浸潤和充血;CHF組大鼠心肌細胞水腫,細胞漿染色加深,細胞體積縮小,可見空泡;低劑量萬古霉素組、中劑量萬古霉素組大鼠心肌細胞結構較清晰,部分心肌細胞水腫,心肌細胞形態損傷較CHF組減輕,高劑量萬古霉素組及藥物對照組心肌細胞充血減少,心肌組織及細胞排列整齊,與假手術組相似。假手術組大鼠腎臟結構完好,腎小球形態規則,腎小管無水腫擴張;CHF組大鼠腎小球間質增加,腎小管上皮細胞排列紊亂、嚴重萎縮,腎間質增寬,炎癥浸潤嚴重;低劑量萬古霉素組、高劑量萬古霉素組大鼠腎間質寬度減小,炎癥浸潤降低,中劑量萬古霉素組及藥物對照組腎組織炎癥浸潤顯著減輕,腎小球硬度降低,腎間質寬度與假手術組相似。見圖1、圖2。

圖1 6組大鼠心肌組織HE染色結果(×200)

圖2 6組大鼠腎臟組織HE染色結果(×400)

2.5 6組大鼠心肌組織AngⅡ、醛固酮和心鈉素蛋白表達水平的比較 與假手術組相比,CHF組大鼠心肌組織AngⅡ、醛固酮和心鈉素的蛋白表達水平均升高(均P<0.05);與CHF組相比,低劑量萬古霉素組、中劑量萬古霉素組、高劑量萬古霉素組大鼠心肌組織AngⅡ、醛固酮和心鈉素的蛋白表達水平均降低(均P<0.05),且總體上呈劑量依賴性變化;高劑量萬古霉素組與藥物對照組大鼠上述指標差異均無統計學意義(均P>0.05)。見表4、圖3。

表4 6組大鼠心肌組織AngⅡ、醛固酮和心鈉素蛋白相對表達水平的比較(x±s)

圖3 蛋白電泳圖

2.6 大鼠萬古霉素血藥濃度分析結果 低劑量萬古霉素組血藥濃度-時間曲線顯示,血藥濃度在用藥后48 h時達到峰值為8.16 mg/L,此后血藥濃度隨著時間的延長而降低,在用藥后96 h時血藥濃度為0。中劑量萬古霉素組血藥濃度-時間曲線顯示,血藥濃度在用藥后52 h時達到峰值,為12.63 mg/L,此后血藥濃度隨著時間延長而降低,在用藥后144 h時血藥濃度為0。高劑量萬古霉素組血藥濃度-時間曲線顯示,血藥濃度在用藥后72 h時達到峰值,為16.30 mg/L,此后血藥濃度隨著時間延長而降低,在用藥后96 h、122 h及148 h時血藥濃度較穩定。見圖4。

圖4 不同濃度萬古霉素血藥濃度分析注:A為低劑量萬古霉素組,B為中劑量萬古霉素組,C為高劑量萬古霉素組。

3 討 論

CHF是多種病因誘發心臟功能或結構改變而導致機體循環瘀血等的病癥。CHF是心臟疾病的終末階段,病死率較高[8]。因此,了解其發病機制并進行針對性的干預治療對控制疾病發展具有重要意義。CHF患者普遍存在心輸出量減少、舒張末期容積增大、心室充盈壓力增加,上述情況誘發心臟壓力升高,導致LVEDD、LVESD升高,LVEF、LVFS降低[9]。CHF患者心肌組織存在不同程度的缺血,導致心室收縮不同步,LVEF及LVFS降低,從而影響心室收縮功能[10]。多數CHF患者合并肺部感染或肺水腫,壓迫心臟,長期發展可加重病原菌對心肌組織的損傷。萬古霉素為抗革蘭陽性菌的首選藥物,是臨床上用于治療發生感染的心臟疾病患者的主要抗菌藥物[11]。萬古霉素屬于肽類抗菌藥物,可破壞病原菌細胞壁結構,減少病原菌與細胞壁蛋白的合成,改變細胞膜通透性,阻礙細菌RNA的合成,從而發揮殺菌作用[12]。亓俊杰等[13]發現,萬古霉素可通過抑制機體炎癥因子水平,緩解CHF患者機體炎癥反應,且在人體中血藥濃度保持時間較長,可長時間發揮抗菌作用,從而緩解患者心臟負擔,改善心功能,提高LVEF及LVFS,具有心肌保護作用。本研究結果顯示,與假手術組相比,CHF組大鼠LVEDD、LVESD升高,LVEF、LVFS降低(均P<0.05),心肌組織病理損傷嚴重。此外,與CHF組相比,低劑量萬古霉素組、中劑量萬古霉素組、高劑量萬古霉素組大鼠的LVEDD、LVESD均降低,LVEF、LVFS均升高(均P<0.05),且總體上呈劑量依賴性變化;HE染色結果顯示低劑量萬古霉素組、中劑量萬古霉素組大鼠心肌細胞結構較清晰,部分心肌細胞水腫,心肌組織病理損傷減輕,高劑量萬古霉素組心肌細胞充血減輕,心肌組織及細胞排列整齊。以上結果說明萬古霉素可顯著改善CHF大鼠的心功能及心肌組織病理損傷,而高濃度的萬古霉素對心肌組織保護作用更顯著。

肌酐、尿素氮及UP24均為評估腎功能的常用指標。肌酐水平能夠較好反映腎小球功能損害情況;尿素氮主要反映腎小管重新吸收能力,其水平升高表示腎小管吸收能力減弱;UP24水平會隨著腎損傷加重而升高,能夠在一定程度上反映腎小球損傷情況。CHF患者心肌組織中的血管緊張素及醛固酮水平升高,可促進腎臟相關因子分泌,加重腎小球萎縮而降低腎功能[14]。萬古霉素可直接減少病原菌遺傳信息復制,進而有效抑制病原菌大量繁殖,從而減輕炎癥損傷,在改善心肌損傷的同時,能降低血管緊張素及醛固酮的表達水平,減少腎損傷因子分泌,改善腎臟萎縮,但萬古霉素主要經腎臟代謝,當萬古霉素劑量增加時,血藥濃度升高,可能會加重腎臟損傷[15]。李燕等[16]研究不同濃度萬古霉素對患者急性腎損傷的影響,發現與使用濃度為10 mg/L萬古霉素的患者相比,使用濃度為15 mg/L萬古霉素干預的患者發生急性腎損傷的概率顯著升高。本研究結果顯示,與假手術組相比,CHF組大鼠的血清肌酐、尿素氮水平和UP24水平均升高(均P<0.05),大鼠腎小球間質增加,腎小管上皮細胞萎縮,提示CHF大鼠合并腎臟功能損傷。采用萬古霉素干預后,各劑量萬古霉素組大鼠的血清肌酐、尿素氮水平和UP24水平均降低,且腎組織病理損傷得到改善,其中中劑量萬古霉素的效果優于高劑量萬古霉素組,這可能與萬古霉素經腎臟代謝,而高劑量的萬古霉素會對腎臟造成損傷有關。

病理性的神經激素水平升高可以引發CHF癥狀,神經內分泌因子水平升高可導致心肌細胞肥大,促進心肌組織纖維化,且已有研究證實神經內分泌因子的過度激活是心力衰竭發生的原因之一[17]。心鈉素、醛固酮及AngⅡ是與CHF關系密切的神經內分泌因子。心鈉素水平升高可增加心肌細胞肥厚及間質纖維化;醛固酮激活可促進體內多種生物活性因子和激素異常活化,使機體產生代償反應,進一步加重心力衰竭;AngⅡ水平升高可提高心肌組織膠原纖維的產生,從而促進心肌纖維化的發生與發展[18]。CHF發生后,機體循環系統功能障礙,萬古霉素可通過抑制炎癥細胞因子合成及炎癥反應,改善神經內分泌系統的紊亂,從而改善CHF。神經內分泌因子及炎癥因子存在雙向調節作用,萬古霉素可通過減少炎癥因子來減輕心肌負荷和抑制心臟重塑,在一定程度上降低心鈉素、醛固酮及AngⅡ的表達水平。本研究結果顯示,與假手術組相比,CHF組大鼠血清和心肌組織中的心鈉素、醛固酮及AngⅡ表達水平均升高(均P<0.05);與CHF組相比,低劑量萬古霉素組、中劑量萬古霉素組、高劑量萬古霉素組大鼠血清和心肌組織中的心鈉素、醛固酮及AngⅡ表達水平均降低(均P<0.05),且總體上呈劑量依賴性變化,說明萬古霉素可調節CHF大鼠模型的神經內分泌因子表達水平,且以高劑量萬古霉素的效果更顯著。

本研究的萬古霉素血藥濃度分析結果顯示,低劑量萬古霉素組的血藥濃度在用藥后48 h時達到峰值(8.16 mg/L),在用藥后96 h時血藥濃度為0;中劑量萬古霉素組的血藥濃度在用藥后52 h時達到峰值(12.63 mg/L),在用藥后144 h時血藥濃度為0;高劑量萬古霉素組的血藥濃度在用藥后72 h達到峰值(16.30 mg/L),在用藥后96 h、122 h及148 h時血藥濃度較穩定。萬古霉素屬于大分子物質,在組織內的分布取決于細胞膜的通透性,長時間、高水平的血藥濃度可有效增加藥物轉運,從而更好發揮藥效[19]。師亞玲等[20]發現,萬古霉素的藥動學特點為具有濃度及時間依賴性,且存在較長的抗生素后效應,藥物劑量越高,血藥濃度越高,抗生素后效果持續時間越長。研究表明,萬古霉素在大鼠體內均勻吸收、分布及排泄,不存在藥物蓄積的風險,但是隨著給藥濃度的增加,血藥濃度也不斷升高,高濃度(200 mg/kg)萬古霉素會加重腎毒性,因此需要針對性選擇藥物劑量,以減少不良反應[21]。

綜上所述,不同劑量萬古霉素干預均可改善CHF大鼠心功能與腎功能指標,其作用機制可能與萬古霉素抑制神經內分泌因子AngⅡ、醛固酮和心鈉素的表達水平有關;高劑量(100 mg/kg)萬古霉素對CHF大鼠的心功能和心肌組織損傷的改善作用最佳,且血藥濃度更為穩定,但會對腎臟造成一定損傷;中劑量(50 mg/kg)萬古霉素對CHF大鼠的腎功能的改善作用最佳。