冠心病合并2型糖尿病患者血清中miR-92a、HbA1c及內皮抑素水平評估預后的臨床意義

杜銀蘋，董國華，李菲，耿猛

徐州市第一人民醫院全科醫學科，江蘇徐州 221000

冠心病（coronary heart disease, CHD）在臨床具有較高的發病率，且近年該病的患病率不斷上漲[1-2]。糖尿病是一種發生率較高的代謝性疾病，以高血糖為主要特征，持續發展會引起血管內皮功能損傷，累及腎、心臟等多個器官[3-4]。2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus, T2DM）為糖尿病的常見類型，約占據90%以上，也是引發心血管疾病的高危因素，故CHD合并T2DM發生率較高[5-6]。CHD與T2DM兩種疾病相互影響，形成惡性循環，繼而加劇患者病情，對生命安全造成眾多威脅。因此，于早期及時診斷CHD合并T2DM，并指導臨床制定科學規范化的治療措施，對于保障患者身心健康意義重大。隨著臨床對分子生物標志物研究的不斷深入，發現CHD合并T2DM疾病的發生、發展與分子生物標志物聯系緊密。基于此，本研究以2020年5月—2021年5月徐州市第一人民醫院收治的84例CHD合并T2DM患者為研究對象，分析微小RNA-92a（Micro RNA-92a, miR-92a）、糖化血紅蛋白（gly?cated hemoglobin, HbA1c）與內皮抑素（endostatin,ES）在此類患者中的表達水平，探討三項指標與患者預后之間的聯系。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

將本院收治的84例CHD合并T2DM患者納入觀察組，本院同期收治的65例單純CHD患者納入單純CHD組，同期于本院行體檢的70名健康體檢者設為對照組。對照組中男39名，女31名；年齡43~76歲，平均（60.89±7.17）歲。單純CHD組中男33例，女32例；年齡39~78歲，平均（59.95±7.78）歲。觀察組中男44例，女40例；年齡43~77歲，平均（61.46±6.51）歲。3組一般資料對比，差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。研究經醫學倫理委員會批準。同時，隨訪1年，觀察起點為出院日，終點為心血管不良事件發生，主要為全因死亡、靶病變血運重建、復發心絞痛等，把出現上述事件的觀察組患者納入預后不良組，反之為預后良好組。

1.2 納入與排除標準

納入標準：CHD經冠脈造影檢查證實病情；T2DM臨床診斷符合《中國2型糖尿病防治指南（2020年版）》[7]中有關標準；所有研究對象納入均遵照自愿原則，依從性較高，簽署知情同意書；對照組均身體健康，無重大疾病。排除標準：存在精神疾病、認知、視聽或語言溝通障礙，難以配合研究者；合并嚴重肝腎功能不全者；為過敏體質者；合并血液系統疾病者；存在酒精、藥物依賴史者；合并免疫系統與凝血功能紊亂者。

1.3 方法

標本采集：所有研究對象于入組后第2天清晨，采集其5 mL靜脈血于無菌試管內，以3 000 r/min的速率離心10 min，獲取上層清液后，于-80℃環境下留存待檢。檢測方法：①miR-92a采用實時熒光定量逆轉錄聚合酶鏈反應（real-time fluorescence gnan?titative reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR）檢測，首先運用Trizol法提取血清樣品內總RNA，經反轉錄獲得cDNA；之后對miR-92a予以擴增，反應體系共20 μL，反應條件為95℃預變性90 s，95℃變性30 s，62℃退火延伸30 s，72℃延伸15 s，共進行40個循環，最后以2-ΔΔCt法計算血清miR-92a相對表達量。②HbA1c、ES：兩項指標均采用酶聯免疫吸附法檢測。

1.4 觀察指標

①3組miR-92a、HbA1c與ES表達對比。②預后良好組與預后不良組miR-92a、HbA1c、ES對比：隨訪1年，對比兩組miR-92a、HbA1c、ES表達水平。③miR-92a、HbA1c、ES單獨與聯合預測CHD合并T2DM預后的效能：繪制受試者工作曲線（receiver operating characteristic, ROC），分析3項指標單獨或聯合在預測患者預后中的臨床價值。

1.5 統計方法

采用SPSS 20.0統計學軟件處理數據，計量資料符合正態分布，以(±s)表示，組間差異比較采用t檢驗，多組間比較以F檢驗；繪制ROC，以曲線下面積（AUC）評價：AUC≤0.5表明無預測價值；0.50.9表明預測價值較高。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 3組人群miR-92a、HbA1c、ES表達對比

觀察組 miR-92a、HbA1c、ES高于單純 CHD 組與對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。見表1。

表1 3組人群miR-92a、HbA1c、ES表達對比(±s)

表1 3組人群miR-92a、HbA1c、ES表達對比(±s)

組別對照組（n=70）單純CHD組（n=65）觀察組（n=84）F值P值miR-92a 0.84±0.13 1.23±0.26 1.89±0.45 211.262<0.001 HbA1c（%）4.29±0.78 5.35±1.01 11.78±2.12 575.725<0.001 ES（ng/mL）25.48±2.25 30.36±3.37 44.59±4.35 626.294<0.001

2.2 預后良好組與預后不良組患者miR-92a、HbA1c、ES對比

預后不良組的miR-92a、HbA1c、ES高于預后良好組，差異有統計學意義（P<0.05）。見表2。

表2 預后良好組與預后不良組患者miR-92a、HbA1c、ES對比(±s)

表2 預后良好組與預后不良組患者miR-92a、HbA1c、ES對比(±s)

組別預后良好組（n=58）預后不良組（n=26）t值P值miR-92a 1.45±0.36 1.95±0.51 5.147<0.001 HbA1c（%）9.87±1.28 13.75±3.03 8.284<0.001 ES（ng/mL）40.26±4.62 45.63±5.17 4.746<0.001

2.3 miR-92a、HbA1c、ES單獨與聯合預測CHD合并T2DM預后的效能比較

ROC結果顯示miR-92a、HbA1c、ES聯合預測患者預后的AUC高于3項指標單獨檢測。見表3、圖1。

表3 miR-92a、HbA1c、ES單獨與聯合預測CHD合并T2DM預后的效能比較

圖1 miR-92a、HbA1c、ES單獨與聯合預測CHD合并T2DM預后的ROC曲線圖

3 討論

T2DM屬臨床常見的慢性代謝類病癥，是引發心血管疾病的重要危險因素之一，可通過脂肪毒性、炎癥介質等通路對機體的心血管功能構成損傷[8-9]。CHD為T2DM的常見并發癥之一，伴隨人們生活壓力的上漲及飲食習慣的轉變，使得我國CHD合并T2DM患者數量持續增加[10-11]。CHD合并T2DM患者病情更為復雜，兩種疾病相互影響，并增加病死率[12]。近些由于臨床醫學技術的持續發展，使得CHD合并T2DM的治療手段取得長足進步，而探尋與CHD合并T2DM患者有關的分子生物標志物，明晰患者的病情與預后，對于指導臨床采取針對性治療至關重要。

miRNA是一類進化保守的短序列小RNA，存在多種生物學功能[13]。miR-92a是一類可以參與血管生成、細胞增殖分化等生理過程的非編碼單鏈RNA分子，在促進血管生長與損傷組織功能恢復方面具有一定的調節作用，在冠心病等心血管病癥的發生發展中亦至關重要。HbA1c為葡萄糖與血紅蛋白游離氨基之間產生的非酶促-糖化反應的產物，其水平變化不受血糖濃度影響，且在血液內濃度較為穩定，可反映過去8~12周機體平均血糖值[14-15]。CHD合并T2DM患者心臟細胞的變化主要是患者代謝能力的反映，而T2DM患者葡萄糖攝取、氧化能力降低，繼而影響心肌收縮功能，造成心臟能量的利用效能下降[16]。同時，葡萄糖吸收水平的降低會加劇心肌缺血表現，對心肌缺血恢復進程造成一定影響，進一步加劇脂質代謝紊亂情況，可見HbA1c在CHD合并T2DM患者表達水平相對較高。ES為機體內部生成的一種強效血管生成抑制劑，為血管壁彈力纖維的重要組成，會阻礙內皮細胞的遷移，誘導內皮細胞凋亡，在內皮細胞的粘附中發揮重要作用。ES與CHD關系密切，且作用復雜，CHD合并T2DM患者的冠脈鈣化、狹窄程度較為嚴重，故血清ES表達水平亦較高[17]。本研究結果顯示，觀察組miR-92a（1.89±0.45）、HbA1c、ES高于單純 CHD 組（1.23±0.26）與對照組（0.84±0.13）（P<0.05），表明在 CHD 合并T2DM患者機體內miR-92a、HbA1c、ES呈高表達。張威等[18]研究顯示，CHD合并T2DM組患者的miR-92a（1.88±0.51）高于 CHD 組（1.25±0.31）與對照組（0.98±0.25）（P<0.05），與本研究結果類似。本研究結果顯示，預后不良組的miR-92a、HbA1c、ES高于預后良好組（P<0.05），表明預后不良患者miR-92a、HbA1c、ES表達水平更高。本研究 ROC 結果顯示：miR-92a、HbA1c、ES聯合預測患者預后的 AUC 0.909（95%CI：0.848~0.971）高于 3項指標的單獨檢測[0.776（95%CI：0.659~0.892）、0.860（95%CI：0.740~0.980）、0.795（95%CI：0.697~0.893）]，表明 miR-92a、HbA1c、ES聯合可有效預測CHD合并T2DM患者預后，從而指導臨床制定規范的治療方案，以增強病情控制效果，促使患者獲得良好預后。

綜上所述，miR-92a、HbA1c、ES在 CHD 合并T2DM患者血清內呈高表達，且表達越高，患者預后越差，3項指標聯合檢測可為明確患者病情與預后提供更為可靠的參考依據，臨床應用價值較高。