探究不同免疫檢驗法對乙肝病毒感染血清標志物檢驗的效果

郜燕，欒和偉，田園，曹霞

江蘇省句容市人民醫院檢驗科，江蘇句容 212400

乙型肝炎病毒是嗜肝脫氧核糖核酸（deoxyribo?nucleic acid, DNA）病毒組成員之一，簡稱乙肝病毒，主要傳播途為乙肝患者及乙肝病毒攜帶者的血液傳播，可導致肝炎、肝硬化甚至肝癌等嚴重肝病，威脅患者生命安全[1]。乙肝患者多表現出肝區疼痛、腹脹、厭食及乏力等癥狀，伴隨疾病進一步發展，可出現肝功能異常、脾大等癥狀[2-4]。既往研究發現，人體免疫系統可與乙肝病毒產生特異性免疫反應，由此，臨床可通過檢驗乙肝病毒感染患者血清標志物，為疾病早期診治提供參考依據[5]。血清標志物檢測常用免疫檢驗法，包括酶聯免疫吸附法、化學發光法等，相比較而言，酶聯免疫吸附法雖然可測定血清標志物水平，但無法評估病情，且極易受到客觀因素等影響導致檢測出現誤差，而化學發光法可開展定量分析，具有較高靈敏度[6]。本文選取江蘇省句容市人民醫院于2020年3月—2022年4月收治的207例乙肝病毒感染患者為研究對象，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院收治的207例乙肝病毒感染者為研究對象，入組患者有男113例、女94例，年齡20~80歲，平均（42.29±1.44）歲。本研究經醫院醫學倫理委員會批準，患者均知情同意。

1.2 納入與排除標準

納入標準：①符合《乙肝病毒攜帶者就診指南》中診斷標準，經實驗室診斷確診者；②年齡>18歲；③病歷等資料完整。

排除標準：①合并精神或血液系統疾病者；②合并惡性腫瘤或其他傳染病者；③其他類型肝炎或肝病者。

1.3 方法

207例感染者均采集5 mL空腹靜脈血，經離心處理（轉速3 000 r/min，時間10 min）后取血清保存于溫度為-20℃環境中待檢；對血清標志物檢驗采用酶聯免疫吸附測定法（enzyme-linked immunosor?bent assay, ELISA）、化學發光法。

化學發光法：儀器選用雅培化學發光分析儀，配備雅培公司原裝進口試劑測定血液樣本。酶聯免疫吸附法：儀器選用TECAN酶免儀，配備北京萬泰生物有限公司試劑對血液樣本進行檢驗。檢驗指標包括乙肝表面抗原（hepatitis B surface antigen,HBsAg）、乙肝表面抗體（hepatitis B surface antibody,HBsAb）、乙肝e抗原（hepatitis eantigen, HBeAg）、乙肝e抗體（hepatitis B eantibody, HBeAb）及乙肝核心抗體（hepatitis B core antibody,HBcAb）。

1.4 觀察指標

對比不同免疫檢驗法對血清標志物檢驗陽性率，分析不同免疫檢驗法對乙肝病毒感染診斷準確度、誤診率及漏診率，并對比不同免疫檢驗法的檢驗成本。

陽性標準。①化學發光法：定量測定HBsAg及HBsAb，若HBsAb水平>10 IU/mL即陽性，HBsAg水平>0.05 IU/mL即陽性；以標本吸光度值與臨界值的比值（S/CO）確定HBeAg、HBeAb及HBcAb的陰陽性，其中HBeAg及HBcAb比值>1.0即陽性，HBeAb比值<1.0即陽性。②酶聯免疫吸附法：測定各血清標志物的吸光度值，和cutoff值進行比較確定各項血清標志物的陰陽性，設定cutoff為0.105，吸光度值>0.105即為陽性，<0.105為陰性。

1.5 統計方法

采用SPSS 23.0統計學軟件分析數據，符合正態分布的計量資料以（±s）表示，差異比較進行t檢驗，計數資料以頻數及百分比表示，差異比較進行χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同免疫檢驗法對血清標志物檢驗陽性率對比

化學發光法的 HBeAb、HBeAg、HBcAb、HBsAb陽性率高于酶聯免疫吸附法，差異有統計學意義（P<0.05），見表1。

表1 不同免疫檢驗法對血清標志物檢驗陽性率比較[n(%)]

2.2 不同免疫檢驗法的檢驗成本對比

化學發光法的檢驗成本更高于酶聯免疫吸附法，差異有統計學意義（P<0.05），見表2。

表2 不同免疫檢驗法的檢驗成本比較[(±s)，元]

表2 不同免疫檢驗法的檢驗成本比較[(±s)，元]

方法化學發光法（n=207）酶聯免疫吸附法（n=207）t值P值檢驗成本113.29±2.98 30.59±2.46 304.367<0.001

2.3 不同免疫檢驗法對乙肝病毒感染的診斷效能對比

化學發光法的誤診率、漏診率均低于酶聯免疫吸附法，差異有統計學意義（P<0.05）；化學發光法的診斷準確率高于酶聯免疫吸附法，差異有統計學意義（P<0.05），見表3。

表3 不同免疫檢驗法對乙肝病毒感染的診斷效能比較[n(%)]

3 討論

乙肝為一種乙肝病毒感染所致傳染病，臨床治療難度較大。乙肝病毒體積極小，不僅可耐低溫及紫外線，還具有耐熱特點，一旦感染經潛伏期后可發展為乙型肝炎[7]。既往研究證實，乙肝病毒感染者發病后隨著疾病進展可損傷機體肝臟，甚至導致肝硬化、肝癌等發生，病死率極高。血清標志物可準確反映機體免疫反應，而HBsAg、HB?sAb、HBeAg、HBeAb及 HBcAb作為乙肝病毒感染的血清標志物，不僅可反映機體感染情況，還可反映乙肝病毒水平[8]。在乙肝病毒中，HBsAg為其結構中的外殼蛋白成分，一旦感染乙肝病毒，可于1~2周內檢測出高水平的HBsAg，且隨著疾病進展該指標水平可進一步升高。HBeAb為機體受到HBeAg刺激后產生的一種抗體，可準確反映乙肝病毒復制情況，可用于評估疾病轉歸、治療效果等。化學發光法、酶聯免疫吸附法均為血清標志物常用免疫檢驗方法，其中化學發光法通過儀器對發光強度進行測定，以確定待測物含量，具有操作簡便、靈敏度高等優勢，而酶聯免疫吸附法是通過底物與酶產生一定反應開展半定量檢測，雖然檢測成本較低，但靈敏度不高，臨床應用具有一定局限性[9]。

本研究中入組者均采用化學發光法、酶聯免疫吸附法測定血清標志物，結果顯示，化學發光法的HBeAb、HBeAg、HBcAb、HBsAb檢驗陽性率高于酶聯免疫吸附法，化學發光法的誤診率、漏診率低于酶聯免疫吸附法，化學發光法的診斷準確率（97.58%）高于酶聯免疫吸附法（84.06%）（P<0.05）；提示化學發光法用于測定血清標志物，可降低漏診、誤診率，提高檢出陽性率。林麗[10]選取96例乙肝病毒感染患者開展研究，經化學發光法測定的診斷準確率為96.9%，高于酶聯免疫吸附法檢測88.50%（P<0.05），與本研究結果一致。分析原因，酶聯免疫吸附法用于血清標志物檢測，雖然檢測成本較低，但檢測步驟較多，且極易受到多種因素影響導致檢測結果誤差，影響其臨床應用價值[11-13]。化學發光法是一種自動化操作過程，原理在于電磁鐵對順磁性微粒的控制作用，無需人工操作，有利于減少或避免因人為操作而導致的失誤情況，此外，該種方法還可開展精確定量分析。化學發光法不僅操作簡便，且操作時間短，不易受到其他因素影響，可于短時間內獲得準確檢測結果[14-17]。本研究還發現，與酶聯免疫吸附法比較，化學發光法的檢驗成本更高（P<0.05），分析原因，可能是由于化學發光法的操作步驟多，在一定程度上增加成本[18]。

綜上所述，化學發光法用于乙肝病毒感染血清標志物檢驗，可促進診斷準確率提高，為臨床診治提供可靠依據。