牛人工授精技術要點探析

何榮奇

（柳州市融安縣長安鎮農業農村綜合服務中心，廣西 融安 545400）

為有效提高肉牛群體質量，擴大肉牛良種覆蓋率，各地區畜牧獸醫技術人員不斷學習牛人工授精技術操作規程，掌握牛人工授精技術要點，以此在品種改良、擴繁擴育方面充分發揮人工授精技術優勢。但是在基層地區牛人工授精技術操作過程中，仍然存在成功率低、母牛受胎率低等瓶頸問題，基于此，文章展開以下探究，分析牛人工授精工作成功率低的原因，之后總結人工授精技術規程與操作要點，為相關從業者提供可參考性建議。

1 肉牛養殖中使用人工授精技術的原因及優勢

牛人工授精技術主要指通過人為操作，采集公牛精液，對精液進行保存與處理，之后在母牛發情期借助相應器具把公牛精液輸送到母牛子宮內，以此來達到母牛受孕的目的，通過該種技術方法替代公母牛自然交配，該技術在20世紀50年代就開始推廣，如今已經成為各養殖場常見的肉牛妊娠控制技術之一。

與傳統自然交配相比，利用人工授精技術可有效提高公牛配種效率和精液利用率[1]。通常情況下，如果利用自然交配，一頭公牛每次射精只能使一頭母牛懷孕，而為了提高養殖場經濟效益，多數養殖戶在肉牛飼養過程中，母牛飼養數量遠遠超過公牛，因此在自然交配情況下，必然出現公牛精液供不應求情況，部分母牛不能受精受孕。而采用人工授精技術可將公牛精液一次性注射到幾十頭，甚至數百頭母牛體內，從而提高配種效率，有效擴大良種公牛（精液）使用率，增加優良家畜數量。其次，在傳統自然配種下，要想使得全養殖場母牛得到均勻配種，必然會從外界引入種公牛，而與活畜運輸成本相比，精液運輸費用更低，可以跨地區、跨省市、跨國流通，具有長遠積累性經濟效益。

2 牛人工授精工作中成功率低的原因

當前部分基層地區肉牛養殖場戶均可意識到人工授精妊娠技術的優勢與特點，且該技術在肉牛妊娠、良種繁育過程中應用率較高，已經實現常態化推廣，但是從具體人工授精操作技術成功率方面來看，家庭養殖場和規模化養殖基地仍然存在牛受胎率低、人工授精操作成功率低等問題。根據多年肉牛擴繁擴育研究經驗，文章將牛人工授精成功率低的原因概括為以下幾個方面：

2.1 對母牛發情期判定不準

部分配種員在牛人工授精技術操作中，難以合理掌握母牛發情時間、排卵時間和發情癥狀[2]。通常情況下，多數配種員認為只要同欄舍內有母牛騎跨其他牛就可認定為母牛發情，之后便通過輸精方法，將公牛精液輸送到母牛體內，但往往受精成功率較低。產生這一問題的根本原因在于：多數配種員對母牛發情癥狀的判定存在誤區，不能否認的是“騎跨其他母牛”這一表現確實為發情癥狀的典型表征，但僅此還不夠，必須結合正常卵泡發育情況、生殖道變化情況才可綜合判定母牛是否發情。

2.2 精液解凍溫度不適宜

精子質量是影響牛人工授精操作成功率的重要因素，在輸精之前，配種員需將精液進行解凍，通常情況下，解凍方法有無水解凍杯解凍、水介質解凍杯解凍、水浴鍋解凍這三種方式，多數農村地區常見解凍方法為無水解凍杯解凍。但是在具體操作中，部分配種員在解凍精子時不能精準判斷凍精細管具體位置，取凍精時間過長，均超過10s，或者在解凍過程中解凍時間過短，解凍溫度過低或過高，直接影響輸精效果和受精成活率，如果操作嚴重失誤可能導致種公牛精子在復蘇過程中大量死亡，進而致使牛受胎率下降，增加整個養殖場地產犢間隔時長，加大農村地區養殖戶母牛飼養成本。

2.3 精子活力低

在輸精之前，部分配種員不能對精子活力進行檢查，通常情況下，在采精時，每周采精1～2次最為適宜，如果采精頻次過高，將直接導致精子活力不強，或者多數精子未成熟，影響后續母牛受精能力。其次，在采精之后精子儲藏溫度、冷凍解凍溫度，光照與輻射，均可以直接影響精子代謝活動，引起精子內外部變化，甚至如果光照過強，輻射過大，將直接對精子活力產生殺傷作用。此外，如果精子周圍液體環境滲透壓過高，也將影響精子活力，致使精子膨脹，內部脫水，進而死亡，不利于肉牛人工授精成功率，因此在今后工作中，配種員在采精之后應該做好精子貯藏與存放，輸精之前檢查精子活力，以此才能提高母牛受胎率。

2.4 輸精槍掌握不當，輸精太深

通常情況下，母牛的輸精部位有三處，分別為子宮角、子宮頸口和子宮體深部[3]。經過多年理論研究和實踐探索，認為將精液輸到母牛子宮角內最為適宜，不易損傷子宮黏膜，如果將精液輸送到子宮頸口，需要輸送的精子數量較大，且輸精之后精液容易倒流，致使母牛受胎率低，如果采用子宮體深部輸精，可能導致輸精槍插入太深，損傷子宮黏膜。但是在實際輸精過程中，部分配種員輸精管插入深度過深或過淺，直腸把握輸精方法操作不當，可能導致母牛子宮黏膜損傷或者其他炎癥出現，致使母牛妊娠率大大降低。

2.5 存在難孕牛

部分養殖場內存在難孕母牛，即母牛有不孕癥或者存在永久性、暫時性繁殖障礙，將直接導致人工授精成功概率低[4]。通常情況下，青年牛20月齡不受孕，高產奶牛120d不受孕，或者母牛產后80d之內，均屬于難孕牛，母牛不發情，或發情配種之后受胎率低，妊娠率低，或者在三個情期配種均不孕，或者參與配種70d從受孕，也可以劃分到難孕牛范疇。此時配種員應判定難孕母牛是否為先天性不孕癥，比如生殖器官發育不完全、存在兩性畸形、異性孿生不孕以及其他生殖道疾病問題，如果經科學診斷，母牛不屬于先天不孕癥，應該從后天發育情況入手，判斷母牛是否存在營養性不孕、氣候性不孕、繁殖技術性不孕，以此提高母牛受胎率。

3 牛人工授精技術要點

3.1 科學掌握發情期

配種員應該科學掌握母牛排卵時間、發情癥狀，通常情況下，母牛進入發情期之后，可能存在爬跨其他母牛情況，此時還應該結合母牛外部表現、粘液滲出情況和直腸檢查法，判斷牛卵泡壁厚度。通常情況下，卵泡發育到1.5～2.0m，即視為發育良好，在進入到發情期之后，卵泡頂端有腫脹感，且卵泡壁較薄，同時陰道處有粘液滲出，粘液較為濃稠，滲出量大，將以上多種檢查方法相結合，可以降低母牛發情誤診率，避免造成誤配和精液浪費現象。在母牛發情結束后4～16h，視為母牛排卵時間，母牛表現逐漸由亢奮轉為安靜，臀部陰門腫脹感減退，有褶皺出現，且食欲基本恢復正常，陰道黏膜顏色呈暗紅色，粘液滲出量較小，且與發情時相比，濃度更為稀稠，卵泡壁較薄，子宮頸由外向內更有彈性，有一處即破之感，此時為最佳輸精時間。

3.2 做好精液冷凍解凍

在種公牛精液采集之后，應該做好精液冷凍與解凍，牛精液冷凍溫度最低不能低于零下0.6℃，在細管取出冷凍精液之后，先在空氣中停留幾秒，如果利用水浴解凍，0.25ml細管停留時間約在15s，解凍溫度在32℃左右。在冷凍和解凍過程中，所有與精液直接接觸的器具必須經過嚴格滅菌消毒，尤其是裝解凍液和精液的容器，與配種員所需的鑷子，以此防止液氮罐內出現污染現象，通常情況下，精子解凍溫度在32～38℃，如果低于32℃，將直接影響精子活力恢復，如果高于42℃，將直接使得種公牛精子迅速死亡。解凍后應將精液從水浴中取出，不能長時間保存精液，尤其是細管冷凍精液，保存時間最多不能超過60min，如果是顆粒冷凍精液最高不能超過120min，否則將影響精子活力。如果解凍后需要遠距離運輸，應將精子進行5℃低溫保存和攜帶，之后將解凍溫度調節到10～15℃，以此可以延長精子存活時間（可延長數小時左右）。

3.3 檢查精子活力

通常情況下，要想保證母牛受胎率，提高種公牛精液品質，對于冷凍精液，其解凍后必須確保精子活力高于35%，精子畸形率必須小于18%，且前進運動精子數至少大于800萬個，細菌總數小于800個，才能保證用于母畜繁殖生產。因此在輸精之前配種員需對冷凍精液精子活力進行鑒定，取0.25ml細管凍精，在蒸餾水、載玻片、磷酸二氫鈉、顯微鏡、姬姆薩染料、3.0%氯化鈉溶液、磷酸氫二鈉等實驗材料輔助下，對冷凍精子畸形率、活力、菌落數和密度進行檢查。在檢查精子密度時，常利用血細胞計數器計數法，來判定1ml精液中所含精子數量，具體操作方法為，首先吸取公牛精液0.5ml，之后取3%氯化鈉溶液5ml.搖勻一min左右后將精液稀釋到200倍液，將血細胞計數器的計算室蓋上蓋玻片，利用600倍顯微鏡觀察，可計算出精子數量，為后續精子活力判定打下堅實基礎，通過該種方法及時淘汰不良精子，從而提高母牛受胎率。

3.4 規范輸精

配種員應該掌握科學化、準確化輸精技術，實現規范輸精，必要時配種人可將第一次輸精法和二次輸精法相結合[5]。在母牛發情開始后的18～24h，進行第一次輸精，在第一次輸精之后約隔12～14h，進行第二次輸精，以此可以加大受胎率，受胎率可高達60%左右，對于部分發情時間延長的母牛，可進行第三次輸精，以此提高母牛妊娠率。在輸精操作之前，戴好長臂手套，按照操作規程，輸精器內裝好備用精液，將左手伸入母牛直腸內，清洗母牛外陰部并擦干，同時掏出糞便。用手找到子宮頸，隔著直腸壁握住子宮頸，利用中指、食指與大拇指固定，必要時可輕微調控宮頸位置，伸入直腸的手通過子宮頸后，將精液輸送至子宮頸內，在輸精過程中，不可用力過猛，插入輸精管時必須小心謹慎，通常情況下，輸精深度不宜過深，以防穿透子宮壁或子宮頸。同時配種員也應該注意到，部分母牛在輸精過程中較為緊張，其直腸壁收縮頻次過快，且子宮頸也向后移，為有效刺激腸壁，配種員可把手前伸，握住子宮頸向前推，以便輸精管插入，如果部分母牛子宮垂入腹腔，可以利用左手握住子宮頸慢慢上提，以便輸精管通過。當輸精管已經達到子宮頸口時，個別情況下會遇到不好插入問題，產生這一現象的根本原因可能為部分已孕母牛假發情，或者母牛子宮頸張開度不好，頸口有疤痕，子宮內有炎癥，此時配種員需停止輸精，對不好插入的原因診斷清楚，以防導致母牛子宮壁破損，或者由于強行深部輸精引起已孕母牛流產。

3.5 做好難孕牛治療

對于難孕牛，配種員應在基層畜牧獸醫技術指導下，對不孕癥進行治療，其中對于先天性不孕癥，其治療方法主要有按摩卵巢子宮法、激素治療法和激光穴位照射法，農村地區常用治療方法為激素治療法。比如肌肉注射PMSG1500IU，或者靜脈注射HCG5000IU，也可以使用苯甲酸雌二醇20mg，配合己烯雌酚20mg進行綜合治療；對于異性孿生不孕母牛，其染色體異常，同時母牛陰道短小，輸精器無法插入，在直腸檢查時不能判定正常卵巢發育情況和子宮狀況，因此對于該類母牛應及時淘汰。如果是后天不孕癥母牛，應對其不孕原因進行檢查，如果是營養型不孕，養殖戶應該在日糧中補充維生素A、維生素D和維E以及礦物質，其中維生素A每日補充20萬IU，可采用針劑注射法，每隔7d注射1次，連續注射3次，對于維生素D，每次注射10IU，每隔5d天注射1次，連續注射4次左右，并及時給予母牛室外運動和光照，對于維生素E，每次注射2ml左右，每隔7d使用3次，如果是繁殖技術性不孕，配種員應強化技術操作，避免漏配、錯配和誤傷等現象發生。

4 結語

綜上所述，配種員應該科學掌握母牛排卵時間、發情癥狀，結合母牛外部表現、粘液滲出情況和直腸檢查法，判斷牛卵泡壁厚度，做好精液冷凍與解凍，將一次輸精法和二次輸精法相結合，及時檢查精子活力，在基層畜牧獸醫技術指導下，對先天不孕癥母牛和后天不孕癥母牛予以科學治療，才能進一步提高牛人工授精成功率，加快母牛妊娠，突破母牛受胎率低等瓶頸問題，以此實現育種目的。