圈養靈長類動物肝炎病毒血清流行病學的調查

農 汝，吳俊儀，黃 寧，曹佳媛，楊 露，黃澤琳，陸兵兵，王 松

（ 南寧市動物園，廣西 南寧 530003 ）

肝炎病毒有甲型肝炎病毒（HAV）、乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）、丁型肝炎病毒（HDV）、戊型肝炎病毒（HEV）、庚型肝炎病毒（HGV）等6 型[1-2]，其傳播途徑各不相同。HAV 和HEV 主要通過腸道途徑傳播[3-4]，食入被污染的水和食物是HAV 暴發性流行最主要的傳播途徑，人與動物可發生交叉感染[5]。戊型肝炎是一種人畜共患病，也是我國乃至全球關注的公共衛生問題[6-7]。HCV主要通過血液、性接觸傳播，如輸血時共用注射器和在醫療過程中重復使用注射器均可傳播，可感染黑猩猩和人。HBV 和HDV 通過血液和其他體液傳播[3,8]，黑猩猩和土撥鼠是HDV的易感動物[1]。

南寧動物園在對其他類長臂猿[包括黃頰長臂猿（Nomascus gabriellae） 、北 白 長 臂 猿（Nomascusleucogenys）、黃頰長臂猿與北白長臂猿雜交猿；因長臂猿個體的物種鑒定近期才完成，故在本次調查中除白掌長臂猿（Hylobates lar）和戴帽長臂猿（Hylobates pileatus）外，其余猿均以其他類長臂猿表示。]及戴帽長臂猿體檢中發現存在HBV 抗原陽性或抗體陽性結果，因此也對個別其他類長臂猿、戴帽長臂猿、廣西獼猴（Macaca mulatta）等動物進行過重組乙肝基因工程苗的免疫研究，結果顯示，在受試動物體內均產生相應的免疫應答。南寧動物園目前飼養的非人靈長類動物中，一級保護動物11 種258 頭（只），二級保護動物15種251頭（只），本文通過調查南寧動物園內部分靈長類動物肝炎病毒血清抗體情況，為靈長類動物保育員、獸醫在臨床工作中防范該種疫病提供參考。

1 材料與方法

1.1 樣本采集

本次調查收集了南寧市動物園內戴帽長臂猿、其他類長臂猿、白掌長臂猿、黑葉猴（Trachypithecus francoisi）、廣西 獼 猴、熊 猴（Macaca assamensis）、山 魈（Mandrillus sphinx）等17 種靈長類動物，因動物交流入園、園內轉移、疾病治療等因素時，隨機進行前肢淺靜脈紅頭采血管采血2管或1管，每管2 mL，進行HBV血清標志物檢測或HAV、HBV、HCV、HDV、HEV等血清標志物檢測的結果。

1.2 測定指標及方法

樣本均委托廣西民族醫院檢測，使用商品化試劑盒：HAV IgM抗體檢測試劑（鄭州安圖生物工程股份有限公司等）、HBV表面抗原等測定試劑盒（邁克生物股份有限公司等）、HCV抗體檢測試劑（北京科美生物技術有限公司等）、HDV抗體檢測試劑盒（京貝爾生物工程股份有限公司等）、HEV IgM抗體檢測試劑盒（鄭州安圖生物工程股份有限公司等）。樣本檢測方法及檢測試劑因醫院儀器設備更新、試劑購買等因素而不同，均在72 h內送檢。

1.2.1 HBV血清標志物檢測

HBV抗體采用macchiato1300發光免疫法[9]（乙肝兩對半檢測方法）檢測。1,3,5 陽性表示乙肝表面抗原（HBsAg）、乙肝e抗原（HBeAg）、乙肝核心抗體（HBcAb）項陽性（+）；2,4,5陽性表示乙肝表面抗體（HBsAb）、乙肝e抗體（HBeAb）、HBcAb項陽性（+）；2陽性表示HBsAb項陽性（+）；全陰性表示HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb項均為陰性（-）。

1.2.2 HAV、HCV、HDV、HEV血清標志物檢測

HAV、HCV、HDV、HEV抗體采用酶聯免疫法[9]進行檢測，檢測項目包括：HAV-IgM、HCV 抗體、HDV-IgM、HEV-IgM。

2 結果與分析

2.1 靈長類動物HBV血清標志物檢測結果（見表1）

由表1可知，本調查共收集到戴帽長臂猿、紅毛猩猩、黑葉猴、熊猴、平頂猴等17 種動物共169 份血清樣本。乙肝兩對半檢測結果顯示，1,3,5項陽性的11例，占總樣本數的6.51%，其中戴帽長臂猿10例，占該物種的37.04%；其他類長臂猿1例，占該物種的2.33%。2,4,5項陽性的6例，占總樣本數的3.55%，其中戴帽長臂猿4 例，占該物種的14.81%；其他類長臂猿2 例，占該物種的4.65%，HBsAb 陽性的5例，占總樣本數的2.96%，其中其他類長臂猿4例，占該物種的9.30%；戴帽長臂猿1例，占該物種的3.70%。

2.2 靈長類動物HAV、HCV、HDV、HEV血清標志物檢測結果（見表2）

由表2可知，本次調查共收集到12種74份靈長類動物血清樣本，HAV-IgM、HCV抗體、HDV-IgM、HEV-IgM的檢測結果均為陰性，陽性率為0。

表2 靈長類動物HAV、HCV、HDV、HEV血清標志物檢測結果Tab.2 Detection results of serum markers of HAV, HCV, HDV and HEV in primates

3 討論

本研究結果顯示，南寧動物園內17種非人靈長類動物的乙肝病毒血清流行病學調查對象中只有長臂猿類動物感染或攜帶HBV，其余物種亦均未檢測出陽性個體。戴帽長臂猿HBsAg 陽性率為18.2%，HBsAb 陽性率為9.1%，其他種類長臂猿HBsAg 陽性率為5.6%，HBsAb 陽性率為5.6%（有人工接種重組酵母乙肝疫苗史）。在馬來西亞長臂猿康復中心，研究人員在長臂猿身上分離出HBV，與人類HBV病毒相似性為85.5%～89.6%[10]。

目前已有研究報道人類HBV病毒可橫向傳播給非人靈長類動物[11-12]。因此，動物保育員、獸醫等工作人員在入職前應進行相關體檢，接種乙肝疫苗；同時加強工作人員對HBV感染風險意識，加強對保育員、獸醫等工作人員職業暴露防護、銳器損傷預防及處理等知識的培訓和教育，提高工作人員的自我保護和防范意識，合格的員工是確保游客安全的關鍵。

雖然HAV 可成功感染非人靈長類動物，但該病毒的宿主范圍相對有限。對HAV最為敏感的非人靈長類動物主要是狨猴和黑猩猩，此外，HAV 也能感染食蟹猴、恒河猴、松鼠猴等其他種類非人靈長類動物[13]。有研究對中國試驗動物云南靈長類中心525只獼猴進行HAV-IgG、乙肝兩對半、HCV-IgG、HDV-IgG、HEV-IgG 檢測，結果顯示，在相同的人工飼養條件下，除HAV以外，獼猴其他肝炎病毒抗體均為陰性。有研究對中國試驗動物云南靈長類中心525 只獼猴（恒河猴216 只，食蟹猴309 只）進行HAVIgG、乙肝兩對半、HCV-IgG、HDV-IgG、HEV-IgG 檢測，結果顯示，在相同的人工飼養條件下，除HAV 以外，獼猴其他肝炎病毒抗體均為陰性，恒河猴與食蟹猴HAV-IgG陽性率分別為81.9%、91.9%[14]。本研究中，南寧動物園12 種靈長類動物HAV、HCV、HDV、HEV 抗體陽性率為均為0。

管理、控制傳染源，切斷傳播途徑，保護易感人群、畜禽是控制和消滅疫病的三大要素。為保證游客、動物以及工作人員的公共衛生安全，工作人員入職前要做好相關疫苗接種，定期體檢，上崗前做好疫病防控知識培訓，提高對風險的認識，同時必須遵守、遵照相關的疫病防控操作指南下開展工作。臨床工作中可采用商品化試劑盒，對非人靈長類動物肝炎病毒抗體進行檢測、篩查，對陽性個體做進一步的檢測及研究，對相關動物個體定期體檢，并根據檢測結果做好疫病防范措施。此外，還可通過不同形式對游客開展相關的科普宣傳活動，提高民眾對人類肝炎病毒的認知水平。

4 結論

本研究使用商品化試劑盒及相關檢測方法對南寧動物園內靈長類動物進行乙肝病毒抗體檢測和篩查，結果表明，長臂猿動物可感染或攜帶HBV，但未檢出HAV、HCV、HDV、HEV陽性個體。