某三甲醫(yī)院血小板抗體陽性的影響因素分析

劉 娟，向紅銘，彭海燕△

湖南省常德市第一人民醫(yī)院：1.輸血科；2.病案科，湖南常德 415000

血小板輸注是維持血小板減少及血小板功能障礙患者止血的必要療法[1]。然而，反復(fù)進(jìn)行血小板輸注可能會(huì)導(dǎo)致同種異體抗體的形成[2]，主要包括血小板相關(guān)抗體、血小板特異性抗體及CD36抗體[3]。血小板抗體是導(dǎo)致血小板輸注無效、輸血后紫癜、新生兒同種免疫性血小板減少癥及特發(fā)性血小板減少性紫癜的主要原因[4]。因此，血小板抗體檢測(cè)對(duì)于血小板相關(guān)疾病的預(yù)防和診斷具有重要意義。目前，紅細(xì)胞抗體檢測(cè)已成為臨床輸血前的常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目，但血小板抗體檢測(cè)還未得到充分重視。本研究對(duì)2017-2021年在本院住院并可能需要輸注血小板的2 229例患者進(jìn)行血小板抗體檢測(cè)，并分析血小板抗體陽性患者的分布情況及影響因素，為臨床提高血小板輸注療效提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 回顧性分析2017年1月1日至2021年12月31日本院2 229例住院患者的血小板抗體檢測(cè)結(jié)果，其中男1 160例、女1 069例，平均年齡(44±25)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)血小板計(jì)數(shù)<50×109/L及伴有出血需輸注血小板治療；(2)血小板輸注無效；(3)新生兒免疫性血小板減少；(4)輸注血小板后發(fā)生非溶血性輸血反應(yīng)；(5)患有自身免疫性疾病；(6)不明原因的血小板減少患者。排除標(biāo)準(zhǔn)：病歷資料不完整。本研究已通過本院醫(yī)學(xué)倫理會(huì)批準(zhǔn)。

1.2主要儀器與試劑 IH-1000全自動(dòng)血型分析儀為美國伯樂公司產(chǎn)品；配套所用血型分析稀釋液及血型檢測(cè)卡為珠海貝索生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品；單克隆抗-A、抗-B標(biāo)準(zhǔn)血清為北京金豪制藥股份有限公司產(chǎn)品；抗-D標(biāo)準(zhǔn)血清為英國密理博有限公司產(chǎn)品；血小板抗體檢測(cè)反應(yīng)板、凍干血小板抗體篩檢細(xì)胞、低離子強(qiáng)度溶液、抗人IgG抗體、指示紅細(xì)胞以及陰、陽性對(duì)照為長(zhǎng)春博德生物技術(shù)有限責(zé)任公司產(chǎn)品。TD-3A型血小板專用離心機(jī)為長(zhǎng)春博研科學(xué)儀器有限責(zé)任公司產(chǎn)品。

1.3方法

1.3.1血型檢測(cè) 采集患者靜脈血2～3 mL置于乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝管中，離心后用IH-1000全自動(dòng)血型分析儀對(duì)標(biāo)本進(jìn)行ABO及RhD血型鑒定，有疑問的標(biāo)本采用試管法復(fù)查。

1.3.2血小板抗體檢測(cè) 采集患者靜脈血3～5 mL，待血清析出后離心，取上清進(jìn)行檢測(cè)。采用固相凝集法檢測(cè)血小板抗體。檢測(cè)前將試劑盒平衡至室溫，取凍干血小板抗體篩檢細(xì)胞配制血小板懸液；并將洗滌液原液用蒸餾水稀釋至合適濃度配制洗滌工作液，抗體檢測(cè)步驟嚴(yán)格按照試劑盒使用說明書進(jìn)行操作。指示紅細(xì)胞在微孔底部形成單層判為陽性反應(yīng)；指示紅細(xì)胞只結(jié)合到部分孔底判為弱陽性反應(yīng)；指示紅細(xì)胞在微孔中央形成細(xì)胞扣判為陰性反應(yīng)。

2 結(jié) 果

2.1住院患者血小板抗體檢測(cè)結(jié)果分布 2 229例住院患者中，血小板抗體檢測(cè)陽性276例，陰性1 953例，陽性率為12.38%。男性患者的血小板抗體陽性率為9.66%，女性患者的血小板抗體陽性率為15.34%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)；有輸血史患者的血小板抗體陽性率為15.03%，無輸血史患者的血小板抗體陽性率為11.50%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；不同年齡、不同血型患者的血小板抗體陽性率比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

2.2血小板抗體陽性患者的科室分布 血小板抗體陽性患者主要分布在風(fēng)濕免疫科(41.27%)、呼吸內(nèi)科(22.22%)、感染科(15.15%)、新生兒科(15.15%)等科室，結(jié)果見表2。

表2 血小板抗體陽性患者的科室分布

續(xù)表2 血小板抗體陽性患者的科室分布

2.3血小板抗體陽性患者的疾病分布 在疾病分布中，血小板抗體陽性率最高的為系統(tǒng)性紅斑狼瘡，其次為結(jié)締組織的其他系統(tǒng)性受累及紫癜和其他出血性情況，結(jié)果見表3。

表3 血小板抗體陽性患者的疾病分布

2.4血小板抗體陽性影響因素的多因素分析 本研究中因變量為血小板抗體是否陽性(陰性=0，陽性=1)，自變量為性別(男=0，女=1)、輸血史(無=0，有=1)、各病種(以其他病種為參照)，進(jìn)行二分類Logistic回歸分析。結(jié)果顯示，女性、有輸血史、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、結(jié)締組織的其他系統(tǒng)性受累、紫癜和其他出血性情況是血小板抗體陽性的危險(xiǎn)因素(P<0.05)。見表4。

表4 血小板抗體陽性率影響因素的多因素分析

3 討 論

血小板在生理性止血、血栓形成、維持血管完整性等方面起著重要作用[5]。血小板輸注是一項(xiàng)挽救生命的干預(yù)措施。近年來，血小板輸注已被廣泛應(yīng)用于現(xiàn)代醫(yī)療實(shí)踐中，用于預(yù)防和治療患有血液系統(tǒng)惡性腫瘤、實(shí)體瘤、大手術(shù)出血、外傷患者的血小板減少性出血，以及更少見的血小板功能障礙綜合征患者[6]。然而，盡管在血小板的生產(chǎn)、儲(chǔ)存和輸血方面已取得了重大進(jìn)展，輸血反應(yīng)仍然是一個(gè)重大的臨床問題。免疫因素是導(dǎo)致輸血反應(yīng)的主要原因之一[7]。血小板表面含有多種抗原，包括ABO血型抗原、人類白細(xì)胞抗原(HLA)、人類血小板抗原(HPA)和定位于CD36上的Naka抗原[8]。相關(guān)研究表明，HLA抗體和HPA抗體的存在是血小板輸注引起各種反應(yīng)的主要原因，如血小板輸注不應(yīng)期 (PTR) 和輸血后紫癜(PTP)[9]。因此，早期檢測(cè)血小板抗體并在輸血前選擇抗原陰性供體的血小板是臨床預(yù)防和應(yīng)對(duì)PTR的主要途徑[10]。

本研究結(jié)果顯示，2 229例患者的血小板抗體檢測(cè)陽性率為12.38%，稍高于文獻(xiàn)[11]報(bào)道的10.62%，這可能與區(qū)域、人群分布等因素有關(guān)。女性患者的血小板抗體陽性率顯著高于男性，與吳燕等[12]的研究結(jié)果較一致。這可能是由于女性的妊娠所致，妊娠是導(dǎo)致血小板抗體陽性的重要因素[13]。另外，本研究多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，有輸血史是血小板抗體陽性的危險(xiǎn)因素，這與牛佳萌等[9]的研究結(jié)果較一致。由于當(dāng)前血小板輸注主要采用ABO同型隨機(jī)輸注法，避免了ABO系統(tǒng)不合的不良反應(yīng)，但血小板表面抗原系統(tǒng)多而復(fù)雜，除了ABO抗原外，還包括HLA抗原和HPA抗原等，一旦輸注的血液制品與患者抗原存在差異時(shí)，易刺激機(jī)體產(chǎn)生血小板抗體。此外，袁慧銘等[14]的研究還指出，血小板抗體陽性率與輸血次數(shù)之間呈正相關(guān)，血小板陽性率會(huì)隨著輸血次數(shù)的增多而增高。

本研究結(jié)果顯示，風(fēng)濕免疫科為血小板抗體陽性檢測(cè)率最高的科室。將血小板抗體陽性患者的疾病種類按ICD-10分類，系統(tǒng)性紅斑狼瘡、結(jié)締組織的其他系統(tǒng)性受累以及紫癜和其他出血性情況為血小板抗體陽性的危險(xiǎn)因素，其原因可能是患有這幾類疾病的患者自身免疫系統(tǒng)失調(diào)，容易產(chǎn)生針對(duì)自身血小板相關(guān)抗原的抗體，從而導(dǎo)致血小板破壞加劇，血小板計(jì)數(shù)減少[15]。有研究稱系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者除產(chǎn)生血小板抗體外，還可能產(chǎn)生抗磷脂抗體，而抗磷脂抗體又可與血小板結(jié)合。因此，系統(tǒng)性紅斑狼瘡中血小板減少癥的機(jī)制可能依賴于抗磷脂抗體與血小板抗原抗體之間更復(fù)雜的相互作用[16]。此外，本研究發(fā)現(xiàn)呼吸內(nèi)科患者的血小板抗體陽性率也較高，且該科室血小板抗體陽性患者多為肺炎患者，說明機(jī)體發(fā)生炎癥反應(yīng)時(shí)，也可能會(huì)刺激機(jī)體產(chǎn)生血小板抗體。有研究在15例新型冠狀病毒感染恢復(fù)期擬捐獻(xiàn)血漿者中發(fā)現(xiàn)其血小板抗體全部呈陽性，但具體發(fā)生機(jī)制還需進(jìn)一步研究[17]。

綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)女性、有輸血史、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、結(jié)締組織的其他系統(tǒng)性受累、紫癜和其他出血性情況是血小板抗體陽性的危險(xiǎn)因素，在輸注血小板前應(yīng)綜合考慮這些因素，盡可能選擇血小板交叉配血相容的獻(xiàn)血者血小板，防止出現(xiàn)輸注無效。