高增輝 秦珍珍 栗鳳霞
慢性腎臟病(chronic kidney disease, CKD)是威脅人類健康的全球性重要公共衛生問題,在全球不同地區其發生率高達6%~10%,目前尚無根治方法,最終進展至終末期腎病(end stage renal disease,ESRD)[1]。近年來研究顯示,CKD患者本身腸道微生態失調及其腸道屏障功能受損,進一步加重了慢性腎臟病的進展[2]。
腸道微生態與人體的生理病理過程密切相關,具有營養腸上皮細胞、維護腸道屏障、免疫調節等作用[3]。既往有研究表明,腸道微生態失調與人體消化、心血管、內分泌及神經等系統疾病密切相關[4]。有研究者發現腸道微生態失調會造成腸道屏障破壞及通透性增加,導致病原體或其毒性代謝產物進入血液循環,進而加重疾病進展[5,6]。而筆者前期研究發現,CKD患者和健康對照者腸道微生態在多樣性和菌群結構存在明顯差異,CKD患者中阿克曼菌的豐度較健康對照組顯著降低[7]。本研究旨在探討阿克曼菌對CKD大鼠腎功能的影響作用及其可能機制,為CKD的預防及治療提供新的思路。
1.一般材料:健康6周齡SPF級SD大鼠26只,平均體質量約200g,購自山西省人民醫院實驗動物中心,許可證號:SCXK(晉)2019-0001。免疫印跡、免疫組化及病理染色等相關試劑購自賽文創新(北京)生物科技有限公司。ZO-1抗體(批號UH289284)及Claudin-1抗體(批號UB280983)購自美國賽默飛世爾科技公司公司,Occludin抗體(批號EPR20992)購自英國Abcam公司,β-actin抗體、羊抗兔二抗及羊抗鼠二抗購自美國Immunoway Biotechnology公司(批號YM3028)。
2.A.muciniphila株的培養:A.muciniphila株培養物購自德國微生物菌種保藏中心。培養條件37℃,厭氧袋內,在哥倫比亞瓊脂培養基平板上培養48~72h?!?br>