附子聯合MPTP誘導肝陽上亢型PD小鼠亞急性模型與慢性模型的建立及比較

榮 華 劉得水 張靜艷 郭科東 渠麗麗 張曉杰 陸佰榮

帕金森病(Parkinson′s disease，PD)在中醫學中屬于“顫證”范疇，早在黃帝內經中就有“諸風掉眩，皆屬于肝”記載[1]。PD的病機是肝腎陰虛，水不涵木，肝風內動，導致筋脈失其儒養而致病[2]。主要病理變化是中腦黑質和紋狀體多巴胺(dopamine，DA)含量降低，TH是DA生物合成中的限速酶，在PD腦組織中，表達明顯下降[3,4]。通常MPTP致PD小鼠模型作用明確，是目前常用的PD動物模型之一。急性和亞急性模型被應用的十分廣泛，但是上述模型損傷在短期內恢復較快，而人類PD發病是一個長期的發展過程，因此需要一種能產生損傷并且保持時間長的動物模型才能與臨床的病理變化更為接近[5,6]。中醫臨床診療PD的特點是“辨病與辨證結合”以往都是采用單純的疾病動物模型而忽視了中醫藥自身特點，與中醫臨床實踐銜接不夠密切，因此本研究采用附子煎液灌服聯合MPTP不同周期誘導，旨在建立病證結合動物模型，并通過行為學檢測、病理學檢測等手段驗證慢性模型比急性模型更加穩定這一優勢，證明慢性模型在研究PD的發病機制方面更具有可靠性。

材料與方法

1.實驗材料：SPF級雄性C57BL/6小鼠60只，2～3月齡，體質量為20～25g，購自遼寧長生生物技術股份有限公司[許可證號：SCXK(遼)2020-0001]。所有實驗研究均符合中國倫理委員會有關動物研究指導原則。附子煎液由單味附子組成[生藥4g/(kg·d)，批號:000001294]購自北京同仁堂飲片有限責任公司。TH抗體購自美國Cell Signaling公司，批號(1)，SP法免疫組化試劑盒購自北京康為世紀生物科技有限公司(批號：00011404)。……