利用Cre-loxP系統構建AT2細胞特異性敲除HDAC3基因小鼠

熊 銳 李國瑞 鄒詩施 李 寧 耿 慶

組蛋白去乙酰化酶3(histone deacetylase 3，HDAC3)是組蛋白去乙酰化酶家族的一員，具有調節生物節律、代謝和發育的功能，位于細胞核中，在特定條件下可以從細胞核轉位到胞質中發揮作用[1]。筆者團隊前期研究顯示，HDAC3參與了多種疾病的病理過程，包括缺血再灌注損傷、纖維化、神經退行性變、感染和炎癥[2]。特別是在肺損傷中，HDAC3在促進炎性細胞因子的表達中起著多方面的作用，這是由HDAC3的酶活性決定的，因此在基因層面抑制HDAC3的表達或者在藥理學層面抑制其酶活性可能是減輕肺損傷的重要策略[3,4]。

肺泡2型上皮(alveolar type 2 epithelial，AT2)細胞在產生肺表面活性物質方面具有獨特的功能，并在肺損傷中作為祖細胞發揮作用[5,6]。此外，AT2細胞的損傷與肺纖維化和炎癥有關[7，8]，而HDAC3作為肺穩態重要的調節酶，在AT2細胞中如何發揮生物學功能鮮見報道。因此，筆者聚焦于AT2細胞來探討HDAC3在肺部疾病中的作用及機制。

本研究利用Cre-loxP系統，選取HDAC3flox/-小鼠與AT2細胞特異性表達Sftpc-Cre重組酶的工具鼠進行數代雜交，成功構建了AT2細胞特異性敲除HDAC3的基因小鼠，為探究肺部疾病的發病機制及治療靶點提供了動物研究模型。

材料與方法

1.實驗動物：HDAC3-flox(+/-)小鼠購自上海南方模式生物科技股份有限公司，交付2雌1雄，6～8周齡，體質量為20～25g。Sftpc-Cre(+/-)小鼠購自江蘇集萃藥康生物科技股份有限公司，交付2雄1雌，6～8周齡，體質量為20～25g。所有動物均飼養于武漢大學人民醫院動物實驗中心SPF 級動物間(25℃，光暗周期12h/12h),實驗操作均獲得武漢大學人民醫院動物倫理委員會批準[WDRM動(福)第20210305號]。……