體外銀屑病樣三維皮膚模型的構建

解雨馨，彭慧玲，先德海，鐘建橋

銀屑病是一種慢性炎癥性疾病，與遺傳易感性、免疫、炎癥、氧化應激、外界環境等因素密切相關，影響全球人群約2%～3%[1]。在組織學上主要表現為角質形成細胞(keratinocytes，KCs)異常增殖、真皮毛細血管增生和炎性細胞浸潤。目前銀屑病的發病機制仍不完全清楚，但炎癥和氧化應激被認為是致其發病的重要促進因素[2-3]。為更好地闡明銀屑病的發病機制進而開發相應的藥物，各種體內外模型得以快速發展。雖然動物模型能在一定程度上模擬人銀屑病，但由于動物和人體的差異性與倫理學爭議，使該類模型在發病機制研究和新藥療效觀察方面仍受局限?；诖?，體外模型得到了很好的發展，尤其是體外三維皮膚模型具有比單層細胞模型更符合人體皮膚結構和功能的特點[4-5]。故本研究通過聯合應用腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-alpha，TNF-α)和γ-干擾素(interferon-gamma，IFN-γ)干預正常三維皮膚模型，建立具有類銀屑病形態學、分子生物學特征的銀屑病樣三維皮膚模型，為進一步探究銀屑病的發病機制以及后續藥物研發提供理想的實驗模型。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1實驗細胞 構建三維皮膚模型的細胞所需要的原代KCs和成纖維細胞(fibroblasts, FBs)，均來自西南醫科大學附屬醫院行包皮環切術的2～10歲健康兒童的包皮。該研究獲得西南醫科大學附屬醫院倫理委員會的批準(2015016A)，同時已獲取患兒家屬的書面同意，簽署知情同意書。

1.1.2主要試劑 Ⅰ型鼠尾膠原蛋白購自北京鴻躍生物科技有限公司；……