血漿熱休克蛋白70、褪黑素、可溶性細胞黏附因子水平與新生兒窒息的相關性研究

姜念依，薄延橋，陳恒，張晉雷

（ 南陽醫學高等專科學校第一附屬醫院 兒科，河南 南陽 473000 ）

新生兒窒息已嚴重危害到新生兒的健康發育，據有關報道指出，新生兒窒息在全球新生兒死亡率排行第三，在發展中國家居于首位，我國新生兒窒息發生率可高達11%，對新生兒的生命造成了嚴重的威脅［1-3］。新生兒窒息是由于小兒在生產過程中出現各種不良因素，導致胎兒出生后造成血氣障礙不能與外界建立正常呼吸的嚴重危險狀況，若長時間這種狀態可對新生兒的心腦腎等多個器官造成損傷，會導致不同程度的神經系統問題。隨著醫療技術的不斷發展，新生兒窒息診療水平逐年提升，但由于個別嚴重窒息的新生兒未及時發現，導致后續治療中可能會存在一些后遺癥，嚴重影響胎兒的身心健康發展［4-5］。因此對孕產婦分娩后可對新生兒采取臍帶血氣分析、Apgar評分以及羊水是否受到污染等輔助手段進行分析檢測，但輔助手段不能對窒息和預后進行有效診斷，所以對于新生兒窒息診斷標準尚未完善。近年來隨著國家開放三胎的政策，現代醫學關于新生兒窒息方面研究的越來越完善，對于新生兒窒息因及時早發現、早診斷、早治療，從而達到減少并發癥和早期恢復健康的目的。現選取本院74例新生兒窒息的患兒進行資料分析，探討新生兒窒息中熱休克蛋白70（heat shock protein 70,HSP70）、褪黑素（melatonin, MT）和可溶性細胞黏附因子（soluble cell adhesion molecules-1, sICAM-1）的相關性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年3月至2021年3月南陽醫學高等專科學校第一附屬醫院新生兒科收治的窒息新生兒74例為窒息組，女36例，男38例；日齡0～1 d，平均（0.5±0.12）d；體重 2 445～4 135 g，平均（3 023.50±237.41）g；窒息程度：重度42例，輕度32例。另選對照組68例，均為同期住院的足月健康胎兒，女35例，男33例；日齡0～1 d，平均（0.45±0.14）d；體重2 819～4 011 g；平均（2 803.50±206.33）g。納入標準：①均經陰道分娩；②均符合新生兒窒息診斷標準［6］。新生兒娩出1 min后Apgar評分為0～3分為重度，4～7分為輕度，8～10分為正常；③均排除母孕患病史；④取得父母或法定監護人同意并簽署知情同意書。排除標準：①患兒出生時間超過1 d；②嚴重先天性缺陷患兒；③自愿放棄治療出院患兒；④除Apgar評分外導致窒息的患兒。兩組一般資料比較差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

在新生兒完全娩出后剪斷臍帶，新生兒娩出后24 h內抽臍動脈血3 mL放入抗凝管中，治療均給予維持機械通氣、體液循環以及對癥治療，患兒需放置在環境設備一致的新生兒室，無特殊情況不將新生兒帶出新生兒室。在常溫下靜置30 min，采用離心機以3 000 r/min，半徑為83 mm離心10 min，離心結束后將上層血清液放置酶EP管中，按照編號在EP管中用黑色記號筆進行標記，標記后將血清放置-70oC冰箱內進行保存備用。冰凍樣品進行測定時需放置室溫內或冷水中進行復溫，解凍需達到實驗試劑盒所需溫度后進行檢測。統一采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）試劑盒（伊萊瑞特生物科技有限公司，檢測試劑編號E-EL-HI862c，產品批號：AK0016APR27021），使用酶聯免疫吸附雙抗體夾心法檢測血清中的HSP70、sICAM-1和MT濃度，操作步驟需嚴格按照試劑盒使用說明書。

1.3 觀察指標

①分析兩組患兒HSP70、sICAM-1和MT水平。②分析新生兒窒息不同程度患兒HSP70，sICAM-1和MT濃度。③分析HSP70、sICAM-1和MT因子與Apgar評分的相關性。

1.4 統計學方法

采用SPSS 22.0統計軟件包處理。計量資料以均數±標準差（±s）表示，兩組間比較行t檢驗，多組間比較采用方差分析；計數資料以百分率（%）表示；相關性使用Pearson相關性分析。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組新生兒HSP70、sICAM-1和MT水平比較

窒息組患兒血清HSP70、sICAM-1水平高于對照組，MT水平低于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。見表 1。

表1 兩組患兒HSP70，sICAM-1和MT水平比較（±s, ng/mL）

表1 兩組患兒HSP70，sICAM-1和MT水平比較（±s, ng/mL）

組別對照組窒息組t值P值n 68 74 HSP70 11.91±2.31 34.52±2.61 44.473<0.001 sICAM-1 206.48±66.74 743.58±91.44 32.526<0.001 MT 2.95±0.37 2.65±0.46 3.484 0.001

2.2 不同窒息程度新生兒HSP70、sICAM-1和MT水平比較

74例窒息新生兒中，窒息程度輕度者32例（輕度組），重度者42例（重度組），兩組HSP70，sICAM-1比較：輕度組<重度組，兩組MT水平比較：輕度組>重度組，差異有統計學意義（P<0.05）。見表 2。

表2 不同窒息程度新生兒HSP70、sICAM-1和MT水平比較 （±s, ng/mL）

表2 不同窒息程度新生兒HSP70、sICAM-1和MT水平比較 （±s, ng/mL）

組別輕度組重度組t值P值n 32 42 HSP70 14.33±2.77 20.19±3.11 9.646<0.001 sICAM-1 227.35±67.25 516.23±92.38 17.332<0.001 MT 1.57±0.17 1.08±0.12 16.144<0.001

2.3 HSP70、sICAM-1和MT因子與Apgar評分相關性分析

相關性分析結果顯示，HSP70與sICAM-1與窒息程度均呈負相關；MT與窒息程度呈正相關，差異有統計學意義（P<0.05）。見表3。

表3 HSP70、sICAM-1和MT因子與Apgar評分的相關性分析

3 討論

近年來新生兒窒息成為學術界常研究的熱點，更是新生兒科和產科最為常見的問題，窒息是導致新生兒死亡的主要因素之一，其本質為臟器組織缺氧缺血，新生兒窒息對腦細胞損害影響最大，嚴重可出現腦癱等不可逆轉的神經系統疾病［7］。早期進行檢驗能有效及早救助患兒的生命，減少新生兒窒息死亡的發生。目前臨床上常用的檢驗方式為Apgar評分，對于窒息危險因素具有一定的分析作用，但由于容易受外界因素的影響，不能準確診斷窒息情況。新生兒期是神經系統代償和可塑性較好的時期，是由于新生兒身體器官都處于發育的狀態，若在這個時期對神經進行干預可成為康復的關鍵，能有效減少窒息所導致的腦神經損傷，提高新生兒存活率和預后生活質量。

ICAM-1在機體正常狀態下只是單純的血管內皮細胞，當機體發生損害時，ICAM-1可釋放入血變成sICAM-1，會促進炎性因子進入腦細胞釋放有毒物質，會干擾氧細胞進行修護作用，減少氧細胞的存活率，導致腦細胞出現不同程度的死亡，血液中的sICAM-1可作為檢測疾病發展狀態的有效指標［8-9］。MT是一種強大的自由基清除劑，能自由通過血腦屏障，對缺氧細胞具有一定的保護作用，有抗炎、抗凋亡的效果，能有效減輕腦損傷。MT減少時會誘發機體的應激紊亂，降低患兒的免疫水平，會導致機體產生繼發性損害，若出現嚴重窒息情況，可通過外源性MT進行緩解病情［10-12］。HSP70可參與細胞內蛋白質的合成、運輸及降解的全過程，能讓變性的蛋白質進行結合，降低機體氧化應激反應，能讓機體產生的一種代償性修復氧細胞的能力，使其得到不同程度的恢復，是細胞發生缺血缺氧損傷時的敏感性指標［13-15］。本研究結果顯示，窒息新生兒重度組中的HSP70、sICAM-1高于輕度組，MT低于輕度組（P<0.05），說明窒息程度越高，HSP70、sICAM-1因子數值就越高，且MT因子數值就越低，說明三者均與窒息嚴重程度密切相關，能有效判斷窒息嚴重程度并及早進行干預救治。進一步分析各因子發現窒息組中的HSP70與sICAM-1與窒息程度均呈負相關，MT與窒息程度呈正相關（P<0.05），說明新生兒窒息時血清中sICAM-1、HSP70和MT均發生不同程度的變化，上述三種因子均能作為新生兒窒息輔助診斷的重要指標，具有較大的臨床價值。

綜上所述，血清HSP70、sICAM-1和MT因子與新生兒窒息程度密切相關，能有效反應新生兒窒息的嚴重程度，可作為檢測新生兒窒息的重要指標，值得臨床廣泛應用。