侯慶同
江蘇聯合職業技術學院淮安生物工程分院,江蘇淮安 223200
豬圓環病毒(Porcine Circo virus,PCV)是由德國科學家Tischer 等于1974年發現,當時被認為是一種細胞污染物,后被證實為1 種新的單鏈環狀DNA 病毒,命名為豬圓環病毒1 型(PCV-1)。臨床上PCV-1 能感染豬,但不致病,被認為廣泛存在于豬體內[1-2],后又發現PCV-1 可經垂直傳播感染胎豬,致使初生仔豬發生“先天性震顫(CT)”[1]。豬巴氏桿菌病又稱為豬肺疫、豬出血性敗血癥,俗稱“鎖喉風”,病原為巴氏桿菌屬的多殺性巴氏桿菌,是豬的一種急性烈性傳染病。主要特征為最急性型呈敗血癥經過,咽喉及其周圍組織急性炎性腫脹,病豬張口呼吸;急性型呈纖維素性肺炎變化,表現為咳嗽、肺及胸膜有纖維蛋白滲出和粘連;慢性型癥狀通常不明顯,臨床常表現為漸進性消瘦,有時伴發關節炎[3]。急性病例以敗血癥和炎癥出血為主要特征,慢性病例的病變則只局限于局部器官[3-4]。巴氏桿菌病廣泛分布于世界各地,但發病率一般不高,臨床常繼發于豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、豬圓環病毒病、豬支原體肺炎等傳染病[5]。巴氏桿菌病的發生有外源性感染和內源性感染2 種途徑[6],外源性感染主要是由病畜的排泄物和分泌物排出的病菌,污染飼料、飲水和周圍環境后經消化道或呼吸道侵入健康家畜機體。內源性感染是指健康家畜的扁桃體和上呼吸道在正常情況下棲留有本菌,但毒力微弱而不致病,一旦家畜的飼養管理條件或氣候劇變而致機體抵抗力下降時,寄居于呼吸道的病菌毒力增強并趁虛而入,經淋巴進入血流而導致發病[7]。
主訴:豬場新購入的180 頭仔豬飼養1 周后開始發病,病初2 d 患病豬已達30 余頭,其中發病死亡6 頭,病死率近20%。病豬食欲不振甚至廢絕、嗜睡、體溫可達40~42 ℃、呼吸困難有黏性鼻汁、咳嗽、皮膚干燥發紅、少數病豬后肢關節腫脹。發病期間曾用過頭孢噻呋鈉、林可霉素等藥物,但治療效果不佳。
臨床進一步檢查發現,病豬消瘦、生長發育不良,腹股溝淋巴結明顯腫大,可視黏膜發紺,皮膚有斑點狀出血、尤以兩耳及軀干最為明顯,觸診胸部有明顯的疼痛反應,聽診可聞及啰音和摩擦音。剖檢主要見纖維素性肺炎,肺臟充血水腫,有出血斑塊,肺間質增寬,肺臟肝樣變;胸腔內積有含纖維蛋白凝塊的混濁液體,肺臟病變部位及胸膜上附有黃白色纖維素性滲出物;其他器官未見明顯異常。
無菌采集病豬的肝臟、腎臟、肺臟、心臟及淋巴結,研磨后用磁珠法進行PCR 擴增。PCR 鑒定結果顯示,豬圓環病毒1 型為陽線(圖1),其余均為陰性。

圖1 豬圓環病毒1 型PCR 鑒定結果
無菌采集病豬的肝組織,三區劃線接種于無菌脫纖維綿羊血瓊脂培養基上[8],置于恒溫培養箱內,37 ℃條件下培養24 h 后觀察。培養基上可見灰白色、圓整、濕潤的滴露狀小菌落、菌落周圍不溶血。無菌采取肝組織,通過革蘭氏染色(圖2)和肝組織觸片(圖3)的方法初步鑒定為多殺性巴氏桿菌感染。

圖2 革蘭氏染色鏡檢(1000X)

圖3 肝組織觸片鏡檢(1000X)
根據臨床檢查及實驗室檢測結果,診斷為豬圓環病毒1 型和多殺性巴氏桿菌混合感染。
將鑒定為多殺性巴氏桿菌的細菌培養物在3個不同區域隨機篩選3 個樣本(1 號分離菌、2 號分離菌、3 號分離菌),分別將每個樣本分離菌均勻涂布于3 個血瓊脂培養基上,將藥敏試紙片(復方新諾明、氟苯尼考、恩諾沙星等15 種藥物)分別貼在每個分離菌樣本對應的3 個平皿中,置于恒溫培養箱中37 ℃培養24 h,測定抑菌圈的直徑大小(表1)。根據檢測標準判定藥敏試驗結果:分離菌對復方新諾明、氟苯尼考、丁胺卡那、氯霉素、利福平、氨芐西林、青霉素、慶大霉素、卡那霉素和四環素等藥物敏感。

表1 藥敏試驗結果
密切觀察豬群狀況,通過精神狀態、飲食狀況及其他外觀表現,及時隔離病豬,對病死豬挖坑深埋做無害化處理。
豬場用戊二醛或聚維酮碘每天消毒1 次,豬糞堆積發酵。加強護理,保持豬舍清潔衛生,重點做好豬舍保溫和通風換氣工作。
1)病豬按每千克體重,用氟苯尼考注射液30 mg、青霉素G 鉀5 萬~8 萬單位、氨基比林注射液0.2 mL,混合肌內注射,2 次/d,連用5 d。
2)肌內注射黃芪多糖注射液,0.2 mL/kg,2 次/d,連用5 d。
大群豬投藥,按每千克飼料添加氟苯尼考粉劑50 mg、黃芪多糖粉劑400 mg,每千克飲水中加入電解多維0.5 g,連用7 d。防治3 d 后豬場反饋,病豬狀況好轉,已無病豬死亡,且豬群的發病率已明顯下降。1 周后,疫情得到有效控制。
臨床上豬感染PCV-1 很常見,普遍認為廣泛存在于豬體內及豬源傳代細胞系[1],由于其無致病性,所以無法通過臨床癥狀或病理診斷來確定是否感染PCV-1[1-2]。
多殺性巴氏桿菌是一種條件致病菌,廣泛存在于動物體內,通常附殖在健康動物的上呼吸道,在機體抗病力低下時可發生內源性感染。在養殖過程中通過加強飼養管理,定期消毒,在季節交替、寒潮來臨之前、長途運輸、轉群轉舍等應激發生時,做好預防性投藥[9],可減少該病的發生;對新購入豬要隔離觀察1 個月后再合群并圈[10]。豬場要合理選用并規范使用生產中所需要的抗菌藥物,以減少細菌的耐藥性問題。治療可根據藥敏試驗篩選敏感藥物,早期綜合治療具有較好的療效。