APN、OX-LDL 和TBIL 水平與冠心病患者發生冠狀動脈病變的關系研究

寇 天，郝振偉，陳 曦

（佳木斯市中醫醫院檢驗科1，神經內科2，黑龍江 佳木斯 154002）

冠心病（coronary heart disease）具有較高的發病率和致殘率[1]。據相關數據統計[2]，該病發病率可達（293～594）/1 萬人左右[2]。冠心病的發生會增加惡性心血管不良結局風險，甚至出現多器官功能衰竭，嚴重威脅患者的健康安全。研究顯示[3]，冠心病病情進展與氧化應激損傷相關，可通過影響氧化應激性損傷，加劇冠狀動脈血管內皮細胞的凋亡，進而促進冠心病病情的進展。脂聯素（APN）是脂肪細胞相關因子，其表達濃度的上升能夠保護血管內皮細胞，抑制血管內皮細胞的凋亡，降低血管平滑肌細胞的痙攣程度[4]。氧化型低密度脂蛋白（OX-LDL）的表達上升能夠通過誘導脂質的沉積，促進泡沫細胞對于血管內皮細胞的損傷，進而促進粥樣斑塊的形成[5]。總膽紅素（TBIL）是衰老紅細胞釋放的相關因子，近年來相關研究認為TBIL 能夠保護心血管，降低氧化應激反應的激活程度[6]。為了揭示APN、OX-LDL 和TBIL 的表達與冠心病的病情關系，從而為臨床上冠心病患者的病情評估提供參考，本次研究選取2017 年2 月-2018 年2 月在我院接受治療的冠心病患者為研究對象，探討APN、OX-LDL 和TBIL 的表達及其與冠心病患者的病情關系，現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017 年2 月-2018 年2 月在佳木斯市中醫醫院接受治療的60 例冠心病患者為研究對象，定義為冠心病組，同時選取同期在我院接受體檢的60 例健康成年人作為對照組。冠心病組男32 例，女28 例；年齡52～78 歲，平均年齡（64.35±2.98）歲；對照組男30 例，女30 例；年齡55～76 歲，平均年齡（64.32±3.14）歲。根據冠狀動脈病變支數，冠心病組患者又分為單支血管病變患者40 例，雙支及以上血管病變患者20 例。本研究經醫院倫理委員會通過，且患者均知情同意，并簽署知情同意書。

1.2 納入和排除標準 納入標準：①均為成年患者；②均經心臟超聲或冠脈造影確診為冠心病者[7]；③無其他系統嚴重疾病者[8]；④對照組均未體檢健康成年者，無嚴重基礎疾病。排除標準：①臨床資料不全者；②合并肥胖癥等影響血脂的原發性疾病者。

1.3 方法 患者入院后采集晨起空腹靜脈血6 ml，分為2 個試管，第1 個試管，以1000 r/min 轉速離心5 min，離心半徑10 cm。離心后取上清液，采用CA-1600 全自動生化分析儀（北京生物科技有效公司）及配套試劑盒均由南京碧云天生物檢測公司提供，檢測TC、TG、LDL-C、HDL-C 水平。HDL-C 和TC、TG 測定采用酶法，LDL-C 測定采用清除法，TBIL 采用重氮鹽法檢測，APN、OX-LDL 采用酶聯免疫吸附法。應用科華ST-360 酶標儀（Abbott Laboratories 公司提供）進行檢測。具體方法：取第2 個試管靜脈血3 ml，加入APN、OX-LDL 單抗，標本和標準品中的APN、OX-LDL 會與單抗結合，PBS 液體洗滌5 min。按照1∶500 的比例加入羊標志的一抗5 ml，4 ℃放置過夜，PBS 緩沖液洗滌3 次，5 min/次，加入鼠來源的二抗（1∶1000）2 ml，室溫放置2 h，PBS液體洗滌5 min。加入顯色底物，辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑現藍色，加終止液變黃，在每孔中迅速加入100 μl 終止液，終止反應，在反應終止的10 min 內，用450 nm 檢測波長讀值。

1.4 觀察指標 比較兩組血脂指標（TC、TG、LDL-C、HDL-C）、APN、OX-LDL 和TBIL 水平，以及不同冠狀動脈病變支數和不同狹窄程度患者患者以上各指標水平，并分析APN、OX-LDL 和TBIL 水平與冠心病患者血脂指標的相關性。根據動脈造影計算Gensini積分分為輕度狹窄：≤50%；中度狹窄：51%～75%；重度狹窄：76%～90%；極重度狹窄：91%～100%。

1.5 統計學處理 采用統計軟件包SPSS 21.0 進行處理，用（）表示符合正態分布的計量資料，組間比較分析采用t檢驗；計數資料用[n（%）]表示，組間比較采用χ2檢驗；冠心病患者APN、OX-LDL 和TBIL水平與血脂水平的相關性分析采用Pearson 相關分析，P＜0.05 說明差異有統計學意義。

2 結果

2.1 冠心病組和對照組血脂、APN、OX-LDL 和TBIL水平的比較 冠心病組TC、TG、LDL-C、OX-LDL 水平高于對照組，HDL-C、APN、TBIL 水平低于對照組（P＜0.05），見表1。

表1 冠心病組和對照組APN、OX-LDL 和TBIL 水平的比較（n=60，）

表1 冠心病組和對照組APN、OX-LDL 和TBIL 水平的比較（n=60，）

2.2 不同冠狀動脈病變支數患者APN、OX-LDL 和TBIL 水平的比較 雙支及以上病變患者APN 和TBIL 水平低于單支病變患者，OX-LDL 水平高于單支病變患者（P＜0.05），見表2。

表2 不同冠狀動脈病變支數患者APN、OX-LDL 和TBIL 水平的比較（）

表2 不同冠狀動脈病變支數患者APN、OX-LDL 和TBIL 水平的比較（）

2.3 不同狹窄程度患者APN、OX-LDL 和TBIL 水平的比較 雙支及以上病變患者APN 和TBIL 水平低于單支病變患者，OX-LDL 水平高于單支病變患者（P＜0.05）；91%～100%患者APN 和TBIL 水平均低于≤50%患者、51%～75%患者，OX-LDL 水平高于≤50%患者、51%～75%患者（P＜0.05），且APN 和TBIL水平隨患者狹窄程度嚴重逐漸降低，OX-LDL 水平逐漸升高，見表3。

表3 不同狹窄程度患者APN、OX-LDL 和TBIL 水平的比較（）

表3 不同狹窄程度患者APN、OX-LDL 和TBIL 水平的比較（）

注：與91%～100%患者比較，*P＜0.05

2.4 冠心病患者APN、OX-LDL 和TBIL 水平與血脂水平的相關性 冠心病患者的APN、TBIL 水平與TC、TG、LDL-C 水平負相關，與HDL-C 正相關，OXLDL 水平與TC、TG、LDL-C 水平正相關，與HDL-C負相關（P＜0.05），見表4。

表4 冠心病患者APN、OX-LDL 和TBIL水平與血脂水平的相關性

3 討論

基礎性高血壓、高血脂癥或者體內過度激活的氧化應激性反應，均可促進冠狀動脈粥樣硬化，造成血管內皮細胞的損傷，進一步造成冠狀動脈狹窄[9]。冠心病肺栓塞、腦損傷患者多器官功能衰竭的發生風險會顯著提高，影響患者的預后效果[10]。目前臨床缺乏對于冠心病患者病情評估的有效指標。雖然可通過冠狀動脈介入造影評估冠心病的病情嚴重程度，但冠造影檢查屬于有創檢查，且對于操縱者專業技術要求較高，在臨床應用具有一定的局限性，難以普及。此外，造影檢查費用較高，部分患者難以接受[11]。血清學指標檢測在心血管疾病患者病情評估中具有重要的作用。APN 是脂肪細胞分泌的相關因子，其能夠通過抑制脂肪酸的過度氧化，降低氧化自由基的激活程度，進而保護冠狀動脈血管內皮細胞，降低血管粥樣硬化性病變的發生風險[12]。APN 的表達上升還能夠抑制血管內皮細胞的線粒體損傷，降低內皮細胞的凋亡程度[13]。OX-LDL 是心血管系統的危險性因子，其表達濃度的上升能夠促進泡沫細胞的沉積，提高脂質在內皮下的富集，進而促進粥樣斑塊的形成和血管的狹窄[14]。研究顯示[15]，OX-LDL 的表達上升還能夠導致單核細胞和巨噬細胞富集程度的增加，進一步促進心血管系統的病情進展。TBIL 是反映膽紅素代謝的相關指標，且近年來相關研究已證實，TBIL對降低心血管不良臨床結局的發生風險具有一定的預測價值[16，17]。因此，研究冠心病患者機體APN、OXLDL 和TBIL 的表達情況，可一定程度提升冠心病患者的病情進展情況。但是目前，關于APN、OXLDL 和TBIL 水平與冠心病患者發生冠狀動脈病變的關系方面的研究存在爭議，無明確定論。

本研究結果顯示，冠心病組患者的TC、TG、LDL-C、OX-LDL 水平高于對照組，HDL-C、APN、TBIL 水平低于對照組（P＜0.05），該結論表明冠心病患者中不僅存在明顯的高血脂癥，同時APN、TBIL的表達明顯下降，而OX-LDL 的表達明顯上升，進一步提示了APN、TBIL、OX-LDL 的異常表達與冠心病患者的病情關系。分析原因主要與相關細胞因子的下列病理性作用有關[18]：①APN 的表達下降，失去了其對于氧化應激性反應的穩定作用，導致還原性谷胱甘肽芳基轉移酶的顯著下降，降低了還原型化合物對于心血管的保護性作用；②TBIL 的下降影響到共軛雙鍵及過氧化基團中和，進而促進相關游離自由基對于冠狀動脈的損傷；③OX-LDL 對于心血管的損傷作用，主要由于其能夠加劇心血管的粥樣斑塊的形成。宋瑩等[19]研究也認為，在冠心病患者中，APN 的表達濃度可平均下降40%以上，與賈國偉等[20]的研究結果相似。同時在合并有急性冠脈綜合癥的患者中，APN 的表達濃度可進一步的下降。在探討相關指標與冠心病患者血管病變數量的關系過程中發現，雙支或者多支病變的患者APN、TBIL 明顯下降，而OX-LDL 明顯上升，提示了相關細胞因子與冠狀動脈血管病變數量的關系，這主要由于APN、TBIL、OX-LDL 的表達波動，能夠影響到冠狀動脈血管分支的脂質沉積和斑塊面積的擴大，進而促進血管病變數量的增加。在不同的血管狹窄程度的患者中，可以發現血管狹窄程度越高，APN、TBIL的表達濃度越低，而OX-LDL 的表達濃度越高，提示不同指標與血管狹窄程度的關系。對于介入手術困難或者無法開展的患者，可以選擇檢測APN、TBIL、OX-LDL 水平，進而評估血管的病變程度。最后，本次研究還探討了APN、TBIL、OX-LDL 的表達與血脂的關系，發現相關指標與血脂水平密切相關，進一步提示了相關指標與冠心病患者綜合性病情的關系。

綜上所述，在冠心病患者中，APN、TBIL 的表達下降，而OX-LDL 的表達上升，同時相關指標的表達與冠心病患者的血管病變數量、血管狹窄程度或者血脂水平密切相關。本研究的局限性在于未能探討APN、TBIL、OX-LDL 的表達與冠狀動脈斑塊特征的關系，有待進一步研究。