尖被百合不同器官多酚物質與抗氧化活性的研究

張希平 馬 瑩

（寧夏大學農學院，寧夏銀川 750000）

百合為百合科（Liliaceae）百合屬（LiliumL.）多年生鱗莖類草本植物，其鱗莖中含有較為豐富的多酚類物質，具有抗氧化、抗輻射、抗癌、降血壓等生物活性［1-2］。近年來，人們對保健食品的關注越來越多，百合這一傳統資源也走入了人們的視野，受到了越來越多人的青睞。尖被百合（L.pinnatifidum）是十分重要的野生百合資源，其野生資源的豐富度也是非常高，其主要分布在包括西藏東南部，喜馬拉雅山區和云南四川橫斷山脈的中國西南高海拔山區［3］，其不僅本身耐干旱、耐鹽堿、具有較高的觀賞價值，而且具有抗氧化和抗病毒雙重作用，是現代觀賞百合的重要抗病毒種質來源［4］。作為一種天然抗氧化劑，百合富含大量多酚，其多酚廣泛分布于植物的各個器官中，具有抗癌性、預防心臟病、抗病原體性、抑菌和延緩衰老等功效［5］，對多種慢性疾病，如糖尿病性、心血管疾病和癌癥等起到很好的預防和治療作用［6］。

現今對蘭州百合（L.davidii）粗多糖的體內抗氧化能力已有研究報道，結果表明蘭州百合粗多糖可以有效增強白鼠機體的抗氧化能力，從而減少自由基對其機體的損傷［7］；Dhiman等［8］和Jin等［9］研究了卷丹百合的鱗莖中多酚類物質的組成及其抗氧化能力，研究發現其鱗莖中含有豐富的多酚類物質，具有良好的抗氧化能力；然而，以往研究僅分析了特定時期卷丹單個器官中的多酚含量及抗氧化活性，而對整個生育期卷丹不同器官的多酚類物質的積累規律及抗氧化活性的分析尚少見報道，缺乏對百合植株不同器官的橫向比較［10］。所以本研究以尖被百合為試驗材料，對百合不同器官內的酚類物質進行測定分析，并對酚類物質的抗氧化能力進行比較，旨在為保健食品、富含抗氧化能力的食品、藥品以及天然抗氧化劑的開發利用提供理論支撐，為野生資源的利用及規模化種植的研究提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料尖被百合于2021年8月采自四川寶興（經緯度：102°70′E，30°85′N，海拔：3 548 m），百合植株按不同器官分別去泥洗凈，烘干（50 ℃）后粉碎，過100目篩備用。

1.2 試驗試劑水溶性維生素E、DPPH粉末購自美國Sigma公司；福林酚試劑購自天津市大茂化學試劑廠；碳酸鈉、沒食子酸、氯化亞鐵均購自天津博迪化工有限公司；菲洛嗪試劑購自南京化學試劑股份有限公司。

1.3 百合不同器官多酚類物質的制備稱取百合不同器官干粉10.0 g于三角瓶中，加入200 mL體積分數為60%的酸化甲醇（甲醇∶鹽酸=100∶0.1），在50 ℃下超聲波提取器中提取20 min，隨后在4 ℃下離心15 min（10 000 r/min），收集上清液備用；向沉淀中繼續加入100 mL酸化甲醇重復提取2次；合并所有上清液減壓濃縮，將濃縮液定容至50 mL容量瓶中，將制備液置于-40 ℃超低溫冰箱中用于進一步分析。所有試驗步驟均在避光條件下進行。

1.4 多酚類物質含量的測定總酚含量采用福林-肖卡試劑法［11］測定；總黃烷醇含量采用香草醛比色法［11］測定。

1.5 抗氧化活性的測定

1.5.1 清除DPPH自由基活性的測定 DPPH自由基活性清除測定參照裘紀瑩等［12］研究方法。

1.5.2 還原銅離子的能力 還原Cu2+的能力（CUPRAC）參考Apak等［13］的方法。

1.5.3 金屬離子螯合能力 吸取百合鱗莖多酚樣品液1 mL，依次加入2 mmol/L FeCl20.05 mL、2.5 mmol/L Ferro?zine溶液0.15 mL和H2O 3.8 mL，反應10 min后于562 nm處測定其吸光值。以甲醇為空白對照，結果以螯合率（%）表示［14］。

1.6 數據統計分析數據采用Microsoft Office Excel 2010與SPSS 22.0軟件對數據進行方差分析和相關性分析，差異顯著性水平P<0.05。所有樣品均重復3次，結果以“平均值±標準差”表示。

2 結果與分析

2.1 尖被百合不同器官（鱗莖、莖稈、葉片、花）中多酚類物質含量的比較

2.1.1 總酚 酚類化合物是植物的次生代謝產物，具有強大的抗氧化活性和清除自由基的能力，參與果蔬香氣、風味、色澤等品質的形成，長期以來都是植物研究開發的重點。酚類物質是酚類百合鱗莖中十分重要的活性物質，能夠為百合的開發和利用帶來深遠意義。由表1可知，尖被百合不同器官的多酚類物質含量存在顯著性差異。葉片中的總酚含量為最高，可達16.72 mg/g，遠高于其他器官且與其他測試部位差異顯著；花器官總酚含量次之，達14.01 mg/g，莖稈總酚含量第3，約為葉片總酚含量的49.16%；鱗莖中的總酚含量最低，占葉片總酚含量的21.35%，僅達3.57 mg/g。

2.1.2 黃酮 黃酮是一類非常重要的多酚類物質，黃酮中具有2-苯基色原酮（flavone）結構的重要化合物，且于自然界中廣泛出現，具有多種生物活性，在抗癌、防癌、抗氧化、抑制脂肪酶等方面有顯著效果。由表1可知，葉片中的黃酮含量最高，達14.91 mg/g，是莖稈中黃酮含量的5倍，與其他器官黃酮含量有顯著性差異。鱗莖中的黃酮含量最低，僅為2.19 mg/g，不同器官中的黃酮含量的高低順序為葉片>花>莖稈>鱗莖。

2.1.3 黃烷醇 黃烷醇既是理想的天然抗氧劑，又是具有開發價值的天然藥物原料。由表1可知，不同器官的黃烷醇含量差異顯著。其中，葉片中的黃烷醇含量最高，可達4.04 mg/g，是鱗莖中黃烷醇含量的3倍，是莖稈中黃烷醇含量的2.7倍，是花器官中黃烷醇含量的2.9倍。鱗莖中黃烷醇含量最低，僅為1.33 mg/g，與其他器官黃烷醇含量有顯著性差異。尖被百合不同器官中黃烷醇含量由高到低的順序為葉片>莖稈>花>鱗莖。

表1 野生百合不同器官多酚類含量 單位：mg·g-1

綜上所述，尖被百合不同器官中多酚類物質含量差異顯著（P<0.05），總體表現為葉片中的多酚類物質含量最多，花器官次之，莖稈第3，鱗莖中的多酚類物質含量最少。尖被百合不同器官中的總酚含量有顯著性差異，總酚含量的高低順序為葉片>花>莖稈>鱗莖。

2.2 尖被百合不同器官中多酚類物質抗氧化活性本研究選擇了DPPH自由基活性、銅離子還原能力、金屬螯合能力以及抑制脂質過氧化活性等方面來評價百合多酚提取物的抗氧化活性，利用不同的方法之中的相互促進的作用與相互的差異性。由表2可知，尖被百合各器官中的DPPH自由基清除力、銅離子還原能力、金屬螯合能力、抑制脂質抗氧化能力含量存在差異。

表2 野生百合不同器官提取物抗氧化能力

2.2.1 DPPH 尖被百合不同器官的DPPH清除自由基能力差異顯著，其中，葉片的DPPH清除自由基能力最高，可達36.64 μmol/g，是鱗莖中DPPH的9.8倍，是花器官中DPPH的1.4倍，是莖稈中DPPH的4.5倍。鱗莖中的DPPH最低，僅為3.74 μmol/g，與其他器官DPPH的差異顯著。不同器官的DPPH高低順序為葉片>花>莖稈>鱗莖。

2.2.2 銅離子還原能力 葉片的銅離子還原能力最高，為49.91 μmol/g，與其他器官銅離子還原能力有顯著性差異，是鱗莖中銅離子還原能力的5.7倍，是莖稈中銅離子還原能力的2.2倍。花器官銅離子還原能力次之，莖稈第3，鱗莖中的銅離子還原能力最弱，僅為8.73 μmol/g，不同器官銅離子還原能力強弱順序為葉>花>莖稈>鱗莖。

2.2.3 金屬螯合能力 花器官中的金屬螯合能力最強，為60.10%，是葉片中的1.2倍，是莖稈中的1.5倍，是鱗莖中的2.9倍；葉片器官金屬螯合能力次之，莖稈第3，鱗莖的金屬螯合能力最弱，僅為20.89%，不同器官金屬螯合能力存在差異，且達顯著水平（P<0.05）。

綜上所述，本研究選擇了DPPH清除自由基能力、金屬螯合能力以及銅離子還原力來評價尖被百合多酚類提取物的抗氧化活性。結果表明，尖被百合不同器官多酚提取物對DPPH自由基清除力、銅離子還原力和金屬螯合能力均具有良好的抗氧化活性，并且尖被百合葉片的抗氧化能力顯著強于其他器官。

3 結論

尖被百合不同器官的多酚類物質含量及其抗氧化活性存在顯著差異（P<0.05），其中，葉片多酚含量及抗氧化活性最高，花器官次之，鱗莖最低，研究表明，尖被百合可作為天然抗氧化劑開發利用。