糞便幽門(mén)螺桿菌抗原聯(lián)合血清胃蛋白酶原檢測(cè)對(duì)兒童幽門(mén)螺桿菌感染診斷的價(jià)值分析

姚韻，吳成，龍?jiān)疲顐鲬?yīng)，胡艷，陳苗苗，卓琳

（安徽省兒童醫(yī)院 兒童消化科，安徽 合肥 230051 ）

幽門(mén)螺桿菌（Hp）為一種螺旋狀、革蘭陰性、微需氧菌，其與消化性潰瘍、慢性胃炎、胃癌及胃黏膜相關(guān)的淋巴瘤的發(fā)生存在密切關(guān)系，曾被世界衛(wèi)生組織（WHO）稱(chēng)為I級(jí)致癌物質(zhì)，嚴(yán)重威脅感染者的健康［1］。人類(lèi)普遍易感染Hp，感染多出現(xiàn)在兒童時(shí)期，常因人口擁擠、兒童期不分床、家庭中存在感染者、飲用不潔凈水、非母乳喂養(yǎng)、孩子吃過(guò)咀嚼的食物等因素，兒童一旦被感染很難自然清除，感染會(huì)引起的胃黏膜持續(xù)出現(xiàn)慢性炎癥［2］。雖然兒童感染Hp 較少出現(xiàn)胃部惡性疾病，但能引起兒童消化性潰瘍、慢性胃炎等發(fā)病率升高，還會(huì)引起發(fā)育遲緩等。早期Hp 診斷并及時(shí)治療，能明顯降低發(fā)生胃潰瘍和胃癌的危險(xiǎn)。檢測(cè)Hp 的手段眾多，其中快速尿素酶檢測(cè)等具有侵入性的檢查，均需經(jīng)胃鏡收集人胃黏膜，有一定的創(chuàng)傷性且痛苦大。而13C 尿素呼氣試驗(yàn)檢查是一種無(wú)創(chuàng)檢測(cè)，目前被認(rèn)為是檢測(cè)Hp 的最有效方法之一，也廣泛應(yīng)用在兒童檢測(cè)中，但該方法僅適用于大于4 歲的兒童，對(duì)4 歲以下嬰幼兒不適用［3］。而糞便Hp 抗原檢測(cè)有著取材方便、價(jià)廉、操作步驟簡(jiǎn)單、出結(jié)果快、安全等優(yōu)點(diǎn)［4］。血清胃蛋白酶原為一種胃蛋白酶前體，其在pH 值小于5 時(shí)能活化變?yōu)槲傅鞍酌福话闱闆r下約1%胃蛋白酶原能在胃黏膜處進(jìn)入血液循環(huán)，能準(zhǔn)確的反映胃黏膜的功能和狀態(tài)，可用于Hp 感染的診斷等［5］。糞便Hp 抗原檢測(cè)和胃蛋白酶原的檢測(cè)都屬于無(wú)創(chuàng)檢測(cè)，很適合兒童的Hp 檢測(cè)。基于此，本研究采用糞便Hp 抗原聯(lián)合血清胃蛋白酶原檢測(cè)對(duì)兒童幽門(mén)螺桿菌感染診斷的價(jià)值，旨在為兒童的提供新的檢測(cè)Hp 感染的診斷方法，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018 年1 月到2021 年12 月在安徽省兒童醫(yī)院就醫(yī)的慢性腹痛患兒200 例作為研究對(duì)象，并經(jīng)本院倫理委員會(huì)審批，患兒及其家屬知悉本研究且同意簽署知情同意書(shū)。200 例患兒均經(jīng)糞便Hp 抗原檢查、血清胃蛋白酶原檢測(cè)及胃鏡活檢檢查的病理學(xué)檢查。納入標(biāo)準(zhǔn)：①診斷與《小兒腹痛診療指南》中相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)［6］相符；②患兒年齡2～16 歲；③出現(xiàn)上腹部飽脹、疼痛等消化道癥狀；④臨床資料完整；⑤在檢測(cè)前1 個(gè)月內(nèi)使用過(guò)抗生素、非甾體類(lèi)抗炎、藥物質(zhì)子泵抑制劑（PPI）等藥物治療過(guò)；⑥依從性好，配合研究者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①臨床相關(guān)資料不完整者；②合并膽、肝、脾、胰等其它腹部的疾病；③腹痛癥狀通過(guò)驅(qū)蛔蟲(chóng)治療后有明顯改善者；④年齡大于16 歲者；⑤存在內(nèi)鏡檢測(cè)禁忌者；⑥依從性差，中途退出者。選取的200 例患兒中男115 例，女85例；年齡2～16 歲，平均（8.32±2.28）歲。本研究以胃鏡活檢檢查作為金標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 方法

糞便Hp 抗原檢查：采集患兒糞便2～4 g 送檢，選用Hp 抗原檢測(cè)試劑盒結(jié)合酶聯(lián)免疫法對(duì)大便樣本進(jìn)行Hp 抗原檢測(cè)，步驟嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。并在波長(zhǎng)450 nm 下酶標(biāo)儀讀取吸光值（A），如果A 值≥0.12 則說(shuō)明Hp 檢測(cè)呈陽(yáng)性，反之呈陰性。

血清胃蛋白酶原檢測(cè)：清晨空腹下采集5 mL患兒的外周靜脈血，并用半徑為15 cm 離心機(jī)離心，離心時(shí)間為10～12 min，轉(zhuǎn)速為2 500 r/min，分離后取血清，并將其放置于-20℃環(huán)境下備測(cè)。采用普朗PUZS-600A/B 型全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)，以酶聯(lián)免疫吸附法定量檢測(cè)和定性診斷血清胃蛋白酶原I（PGI）、Hp-免疫球蛋白G（IgG）和PGⅡ，PGI試劑盒和PGⅡ試劑盒均購(gòu)于浙江伊利康生物技術(shù)有限公司，操作均嚴(yán)格以說(shuō)明書(shū)。PGI及PGⅡ檢驗(yàn)結(jié)果的臨界參考值：PGI小于80 ng/mL，PGⅡ小于90 ng/mL。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

用SPSS23.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，并以Microsoft Excel 構(gòu)建原始數(shù)據(jù)庫(kù)。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，組間比較用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以百分率表示，用χ2檢驗(yàn)。P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 胃鏡活檢檢查情況

本研究中選取的消化道癥狀患兒200 例，經(jīng)胃鏡活檢檢查，有80 例Hp 呈陽(yáng)性（40.00%），陰性120 例（60.00%）。

2.2 兒童糞便Hp 抗原檢查情況

糞便Hp 抗原檢查的特異度為87.50%（105/120），敏感性為85.00%（68/80），準(zhǔn)確度為86.50%（173/200），見(jiàn)表1。

表1 兒童糞便Hp 抗原檢查情況（例）

2.3 兒童血清胃蛋白酶原檢測(cè)情況

血清胃蛋白酶原檢測(cè)的特異度為88.33%（106/120），敏感性為87.50%（70/80），準(zhǔn)確度為88.00%（176/200），見(jiàn)表2。

表2 兒童血清胃蛋白酶原檢測(cè)情況（例）

2.4 兒童糞便Hp 抗原檢查聯(lián)合血清胃蛋白酶原檢測(cè)情況

糞便Hp 抗原檢查聯(lián)合血清胃蛋白酶原檢測(cè)的特異度為95.83%（115/120），敏感性為96.25%（77/80），準(zhǔn)確度為96.00%（192/200），見(jiàn)表3。

表3 兒童糞便Hp 抗原檢查聯(lián)合血清胃蛋白酶原檢測(cè)情況（例）

2.5 三種兒童Hp 檢查方法的診斷效能比較

聯(lián)合檢查的特異度、敏感性及準(zhǔn)確度都明顯高于單一檢查的糞便Hp 抗原檢查、血清胃蛋白酶原檢測(cè)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表4。

表4 三種兒童Hp 檢查方法的診斷效能比較（%）

3 討論

據(jù)研究［7］報(bào)道，我國(guó)居民被Hp 感染的風(fēng)險(xiǎn)高達(dá)40%～60%。而本研究中Hp 感染率是40.00%，與上述報(bào)道一致。Hp 是一種微厭氧、螺旋形、對(duì)生長(zhǎng)環(huán)境較為苛刻的細(xì)菌。這種細(xì)菌被感染后會(huì)定植在十二指腸或胃的黏膜表面上，可以借助黏附素黏附在上皮細(xì)胞上，產(chǎn)生過(guò)氧化氫酶及過(guò)氧歧化酶，能保護(hù)其不被中性粒細(xì)胞殺死。胃黏膜新陳代謝很快，平均更新一次的時(shí)間為1～3 d，Hp 能跟脫落的黏膜由腸道向體外排出。有人試圖在大便中培養(yǎng)并將其分離，因Hp 處于不利環(huán)境時(shí)極易形成較為難分離的球形體，而且糞便中摻雜其他種類(lèi)的菌種，單獨(dú)分離出Hp 較為困難。

糞便Hp 抗原檢查是對(duì)糞便中Hp 抗原進(jìn)行檢測(cè)來(lái)確定有無(wú)Hp 感染。糞便中的Hp 抗原成分部分被裂解，保留了多數(shù)的抗原成分。檢測(cè)過(guò)程中試劑中抗體與糞便中保留的抗原結(jié)合變成抗體抗原復(fù)合物，進(jìn)而使底物變色，依此來(lái)判斷有無(wú)感染Hp。因此可用來(lái)作為診斷感染Hp 的依據(jù)。糞便Hp 抗原檢查作為一種檢測(cè)簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)且無(wú)創(chuàng)的檢測(cè)方法，其檢測(cè)用到的糞便標(biāo)本容易獲取，適合于各年齡段的患者，特別適合嬰幼兒檢測(cè)，操作較為簡(jiǎn)單，無(wú)需采用大型設(shè)備進(jìn)行檢測(cè)等優(yōu)勢(shì)大大降低患者的檢查費(fèi)用，也在家自己檢測(cè)。SCHULZ 等［8］研究發(fā)現(xiàn)，采用糞便Hp 抗原檢查對(duì)Hp 感染的篩查及隨訪中，糞便Hp 抗原檢查費(fèi)用顯著比內(nèi)鏡檢查或呼氣試驗(yàn)低，其檢測(cè)的陽(yáng)性率相差不大。糞便Hp 抗原檢查的特異度為87.50%（105/120），敏感性為85.00%（68/80），準(zhǔn)確度為86.50%（173/200），表明糞便Hp 抗原檢查有較高的診斷效能，佐證了上述研究。

血清胃蛋白酶原檢測(cè)能反映出患者的胃黏膜病變情況，而Hp 能導(dǎo)致胃黏膜細(xì)胞發(fā)生慢性炎癥，并可使胃黏膜細(xì)胞被誘導(dǎo)進(jìn)而產(chǎn)生胃蛋白酶原，引起血清中的PGI、PGⅡ和其比值的變化。研究［9］表明，血清胃蛋白酶原水平與感染Hp 胃炎患兒的狀態(tài)存在密切關(guān)系，PGⅡ>9.01 μg/L 能輔助兒童Hp 感染引起的相關(guān)胃部病變?cè)\斷標(biāo)準(zhǔn)。血清胃蛋白酶原檢測(cè)的特異度為88.33%（106/120），敏感性為87.50%（70/80），準(zhǔn)確度為88.00%（176/200），表明血清胃蛋白酶原檢測(cè)有較高的檢測(cè)效能。

本研究結(jié)果顯示，糞便Hp 抗原檢查聯(lián)合血清胃蛋白酶原檢測(cè)的特異度、敏感性及準(zhǔn)確度都明顯高于單一檢查的糞便Hp 抗原檢查、血清胃蛋白酶原檢測(cè)（P<0.05），表明聯(lián)合檢測(cè)效能更高。由于本研究針對(duì)兒童感染Hp 疾病的診斷，有別于常規(guī)診斷方法，糞便Hp 抗原檢查聯(lián)合血清胃蛋白酶原檢測(cè)方法不僅檢驗(yàn)標(biāo)本容易獲得，且安全、無(wú)創(chuàng)，適合各年齡段兒童，檢測(cè)簡(jiǎn)單。

綜上所述，糞便Hp 抗原檢查聯(lián)合血清胃蛋白酶原檢測(cè)對(duì)兒童Hp 感染的診斷高于單一檢查的糞便Hp 抗原檢查、血清胃蛋白酶原檢測(cè)，在臨床上值得推廣。