牛口蹄疫的診斷與防控

翟 艷

貴州省畢節市七星關區農業農村局，貴州畢節 551700

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的人畜共患傳染病，偶蹄獸最易感。其臨床癥狀主要表現為口黏膜、身體四肢下部和胸部等處的皮下產生水皰和爛斑。口蹄疫已被OIE（世界動物衛生組織）確認為A 類動物疾病，且一直以來把口蹄疫病列入發病前必須報告的A 類動物疾病名錄之首，我國將其作為一類傳染病。

口蹄疫病在全世界范圍傳播，特別是歐、亞、非、南美洲地區最為嚴重，在我國及周邊國家疫情也十分嚴峻。成年動物感染，一般呈良性經過，死亡率較低，但是幼齡動物感染，往往發生惡性口蹄疫，死亡率最高可達100%。口蹄疫病包括7 個主型、80余個亞型，主型相互之間無交叉免疫，而亞型相互之間則有交叉免疫，我國主要是A、O 和亞洲I 型，口蹄疫主要通過空氣傳播，呈跳躍式、直線式流行，此種傳播方式可以使口蹄疫從一個地區傳播到很遠的非疫區，造成口蹄疫的大流行。

1 臨床癥狀

口蹄疫潛伏期長短不一，最長可達2 周，最短僅2 d。病畜體溫升高，最高達41 ℃，全身癥狀明顯，并伴有大量流涎、開口時有吮吸聲；發病1 d 后唇內、口、舌面等黏膜起瘡，起初黃豆大小，此為一期水皰，隨著病情發展，水皰融合，大小有核桃大，顏色也由原來的淡黃轉為灰白色，此時口掛白沫，像極胡須。2 d 后，水皰完全破潰，破潰處形成紅色潰瘍，體溫恢復正常。當口腔發生水皰后，趾間和蹄冠的柔嫩部位會產生水皰，此為二期水皰，二期水皰很快破潰，繼而逐漸痊愈。有些患畜乳頭皮膚上也可見水皰。一般患病動物呈良性經過，7 d 后可以痊愈；如果蹄部有病變，病程會有所延長，14～21 d或者更長時間；病死率較低，一般在1%～2%，該病型叫良性口蹄疫。原發部位水皰出現1～2 d 后，蹄、乳房皮下等其他部位開始出現水皰，并很快破潰，形成糜爛，大約1 周愈合。如發生繼發感染，則有跛行，若有化膿性細菌感染，可引起化膿，嚴重的造成蹄匣脫落，此現象稱為“脫靴”，再嚴重者還可見蹄部變形，無法站立，常臥地不起。

惡性口蹄疫，病死率可達50%。惡性口蹄疫病牛一般是患牛在病情好轉過程中，病情突然惡化，表現虛弱、肌肉顫抖、心跳加速、心率不齊、食欲廢絕、反芻停止、站立不穩、行走搖擺，最后常由于心肌炎導致的心臟麻痹而突然死亡。惡性口蹄疫往往發生在犢牛，犢牛主要表現為出血性腸炎、心肌麻痹。

2 診 斷

2.1 分子生物學診斷

隨著科技的發展，分子生物學診斷技術也得到了快速發展，針對口蹄疫診斷，分子生物學方法可以采用核酸雜交、RT-PCR 等技術，診斷更加簡便、快捷和敏感。

核酸雜交技術：從病牛身上采集病料，提取遺傳物質，將獲取的遺傳物質通過電泳固定在硝酸纖維素膜上，利用生物素與DNA 克隆片段進行標記與雜交，通過氫鍵作用把不能融合的探針洗去，進而得到結合明顯的探針顯影。最后，利用芯片掃描技術，讀取標記的遺傳物質，對讀取的數據進行分析，從而確定病毒株的基因型和血清型[1]。

RT-PCR 技術：首先，從病毒牛身上采取病料，提取口蹄疫病毒基因RNA，由于RNA 提取對操作人員的要求較高，需特別注意操作流程，避免污染致使RNA 被酶分解，導致提取失敗，出現假陰性結果。根據口蹄疫病毒基因序列，設計引物，合成引物，根據所擴增基因大小、引物情況，設計RT-RNA 參數，利用RT-PCR 儀進行擴增，對擴增產物進行電泳，比對擴增產物大小，從而確定是否為口蹄疫病。

2.2 血清學診斷

對于口蹄疫病毒毒型的鑒定可以采用血清學試驗法，利用鑒定毒性對于現階段流行毒株可以有針對性地選用同型口蹄疫疫苗，進行緊急免疫接種。常用的血清學試驗有補體結合試驗（CFT）、微量補體結合試驗、（乳鼠病毒）中和試驗（NT）、免疫擴散沉淀試驗（IDPT）、熒光抗體技術等。近年來，OIE 推薦的間接夾心ELISA 在國際貿易中廣泛使用，在數小時內可獲得試驗結果。因為免疫接種動物3ABC 抗體呈陰性，而感染動物3ABC 抗體則呈陽性，若要區分感染動物和免疫接種動物，可通過檢測血清中口蹄疫病毒非結構蛋白3ABC 抗體情況[2]。

2.3 動物接種

接種試驗動物，需要選取2～7 日齡純系乳小鼠，也可選用豚鼠或乳兔進行試驗接種，選擇其頸背部皮下接種法，接種病毒感染液0.2 mL，若接種后的小鼠在20～30 h 出現運動不靈活，用鑷子夾住尾巴或四肢，其已失去知覺，隨著病情發展，四肢麻痹，呼吸急促，最終死亡，可以確診為口蹄疫。對于瀕死期或新死乳小鼠，可以采集骨骼肌，研磨搗碎，制成10%的病料懸液，可用于傳代接種和鑒定。

3 防控措施

3.1 非疫區的預防措施

非疫區的牛群應做好平時的飼養管理，保持舍內衛生干凈，制定好平時消毒計劃，定期清掃消毒，盡量減少應激，避免影響牛群健康。如引種或者其他需要引進牲畜，嚴禁從疫區或者曾經發生過口蹄疫的國家或地區引進動物或動物產品，即使引進動物或動物產品為非疫區，也需要進行隔離、檢測，確保為陰性或者非患病動物才可混群，如果在隔離或者檢疫過程中發現陽性病例，需要及時撲殺并上報，將動物尸體進行無害化處理，對于運載工具或者被污染的其他物品，必須就地嚴格消毒，經檢測合格方可使用。

3.2 口蹄疫流行區的預防措施

對于口蹄疫流行區，應堅持免疫接種，免疫接種前需要鑒定當地流行口蹄疫的類型，確定病型后選擇疫苗。目前，口蹄疫疫苗有滅活苗、合成肽苗，口蹄疫滅活苗應用較廣，選擇當地流行毒株同型的口蹄疫滅活苗接種動物后，需要定期檢測抗體水平，對于漏免動物需要及時補免，對于不宜免疫的動物，當其恢復健康時需及時免疫，從而提高群體免疫水平。免疫接種的目的是為了建立免疫帶，防止疫情擴散。

針對不同性別、不同用途的牛，其免疫接種程序不同。針對種公牛、后備牛，每半年免疫1 次，注射方式采用肌肉注射；針對生產母牛，在其生產前3個月肌肉注射滅活苗；犢牛，4、5 月齡首免，間隔半年加強免疫，以后每間隔半年免疫接種1 次[3]。

對于口蹄疫流行區，牛的圈舍、場地和抗腐蝕的用具均需要用2%燒堿液或者10%石灰乳潑灑消毒；動物排出的糞便，最好選用酚類消毒藥進行徹底消毒或者堆積發酵后再處理；對于口蹄疫流行區內的動物皮毛需要利用甲醛熏蒸消毒，經檢疫無問題后才可使用；對于肉品需要自然產酸熟化或者采用2%乳酸消毒處理。

3.3 發病時的防控措施

當牛群發生口蹄疫時，疫情需要在第一時間上報，不能超過24 h，以免耽誤疫情。確定疫情后，立即劃定疫點、疫區和受威脅區，按“早、快、嚴、小”的原則，立即采取封鎖、隔離、檢疫、消毒等措施。撲殺疫點疫區內所有易感動物，撲殺后尸體進行無害化處理，被污染的工具、飼料、墊草等均需嚴格按照要求就地處理，對于受威脅區易感動物可以采用康復血清或高免血清進行接種，也可以采用緊急免疫方式建立免疫帶以防疫情擴散。當疫區內最后1 頭患病動物痊愈或者死亡、撲殺后，連續觀察14 d 后未出現新的病例，且檢測無陽性病例，經終末消毒，采樣檢測無問題，經申請，原封鎖單位可解除封鎖。

3.4 口蹄疫的治療

對于感染口蹄疫的患病動物不允許治療，應就地撲殺，并對尸體與糞便進行無害化處理。但對于某些珍貴種用動物或其他特殊情況，可經報批后在嚴格隔離的條件下予以治療。

4 結語

養牛業是當前熱門的畜牧養殖種類，且每頭牛經濟價值較大，可為養牛戶帶來較為豐厚的經濟收益，但是一旦發生口蹄疫，不僅給養牛業帶來巨大經濟損失，還會影響經濟貿易。養牛人員應加強對口蹄疫的防控意識，積極落實口蹄疫防控工作，采取綜合防控措施，配合政府做好口蹄疫疫苗接種工作，從而保障牛群健康，防止牛口蹄疫的發生和傳播，減少經濟損失。