多酶清洗劑對手術器械去污效果的試驗分析

文霞 賴元容 楊玥 葉云娣

(1.重慶市江津區中心醫院，重慶 402260；2.重慶市江津區第二人民醫院，重慶 402283)

手術器械使用后通常都會沾染患者的血液和體液等有機污染物，需要使用多酶清洗劑進行去污清洗，才能確保器械后續消毒滅菌的有效性和再次使用的安全性，因此，多酶清洗劑已成為國內、外醫院手術器械去污清洗和保濕處理的主要醫用清洗劑，對控制醫院感染、保障患者手術救治安全發揮著重要的作用[1]。當前，多酶清洗劑在國內屬消毒產品，在國家取消了對消毒產品行政審批的大環境下，缺乏統一的質量評判標準，面對市場上品牌繁多且質量參差不齊的多酶清洗劑，醫院消毒供應中心和手術室等器械洗消部門在使用過程中常常難以甄別其質量優劣，以致于部分低質低價的多酶清洗劑用于手術器械洗劑的使用效果，2022年3月，我們對市場上正常銷售經常使用的5種多酶清洗劑進行了污染手術器械浸泡去污試驗。現報告如下。

1 材料與方法

1.1材料 多酶清洗劑樣本：4個國產品牌和1個進口品牌的多酶清洗劑各1批，均為中性，均具有廠商提供有產品檢測合格報告材料。手術器械樣本：正常使用的清潔血管鉗80件次，均帶有齒槽或軸節等較難去污清洗的部位。模擬污染物：國產某品牌的無菌脫纖維羊血1批。去污清洗保溫設備：經校檢合格的恒溫水浴箱1臺，容積為10 L。去污清洗用水：經純化的水1批，電導率≤15 μS/cm(25 ℃)。清潔質量檢測器材：某進口品牌的ATP熒光監測系統1套，含監測耗材1批。器械烘干設備：醫用器械熱風干燥柜1臺，干燥溫度≤90 ℃。

1.2方法 參照中國衛生監督協會團體標準T/WSJD-002 2019《醫用清洗劑衛生標準》中附錄E的規定和WS 310.2-2016《醫院消毒供應中心：清洗消毒及滅菌技術操作規范》中“器械檢查與保養”的規定，采用血液污染試驗方法和ATP熒光監測方法(通過“熒光素酶—熒光素體系”快速監測物品上微生物和有機物如血液、體液、分泌物、引流物等殘留的含量，以此監測物體表面、器械或內鏡管腔的清潔效果),對5種多酶清洗劑樣本的去污效果進行對比試驗。

1.2.1污染器械制備 將無菌脫纖維羊血倒入清潔碗盤中，用血管鉗夾無菌小紗布蘸羊血，在試驗樣本血管鉗上反復涂抹污染，并確保軸節和齒槽等部位與羊血充分接觸，然后將污染后的血管鉗保持軸節張開狀態，均勻放置于不銹鋼方盤中(避免器械間重疊)，在陰涼通風處自然晾放4～8 h，使血管鉗上污染的羊血完全干涸。

1.2.2多酶清洗液配制 在恒溫水浴箱的清潔槽內注入3 000 mL經純化的水，然后開啟電源加溫至(40±2)℃備用。將5種樣本多酶清洗劑編為1～5號，其中1號為國產多酶手術器械清洗劑(全效型、藍色)，浸泡清洗器械的配制比例為1∶100；2號為國產多酶手術器械清洗劑(超濃縮型、無色)，浸泡清洗器械的配制比例為1∶600；3號為國產多酶手術器械清洗劑(全效型、綠色)，浸泡清洗器械的配制比列為1∶200；4號為國產多酶手術器械清洗劑(全效型、藍色)，浸泡清洗器械的配制比例為1∶200；5號為進口多酶手術器械清洗劑(全效型、藍色)，浸泡清洗器械的配制比例為1∶270。根據多酶清洗劑浸泡清洗器械的配制比例，每次取1種多酶清洗劑，用一次性無菌注射器精確吸取，然后注入恒溫水浴箱的槽內，與槽內3 000 mL經純化的水混合形成器械浸泡去污的多酶清洗液，1～5號多酶清洗劑每次的注入量分別為30 mL、5 mL、15 mL、15 mL和11 mL。

1.2.3器械浸泡去污試驗 在每次試驗時，隨機抽取4件污染羊血并干涸的血管鉗，其中1件血管鉗作為去污清洗的陽性對照物，其余3件血管鉗保持軸節張開狀態浸泡于恒溫水浴箱內的多酶清洗液中，并保持(40±2)℃的水溫浸泡10 min；從恒溫水浴箱中取出浸泡結束后的血管鉗，立即采用低壓流動經純化水沖洗和漂洗(不做手工刷洗和擦洗)，然后放置于醫用器械熱風干燥柜中干燥處理，最后取出做去污效果監測。每種多酶清洗劑各試驗4次，共試驗20次。

1.3評價指標

1.3.1去污效果目測 對浸泡去污處理并干燥后的各批次試驗血管鉗(3件)，均先采用目測方法進行檢查。目測檢查合格標準：器械表面及其關節、齒牙處應光潔，無血漬、污漬、水垢等殘留物質和銹斑[3]。

1.3.2去污效果ATP熒光監測 對浸泡去污處理并干燥后的各批次試驗血管鉗(3件)和陽性對照血管鉗(1件)，均采用ATP熒光監測方法監測ATP值，并以此評價多酶清潔劑對手術器械的浸泡去污效果。監測步驟為：(1)采用ATP采樣拭子均勻擦拭被采樣血管鉗的軸節、齒槽和其他表面，然后迅速將采樣拭子放回采樣管，直至采樣拭子的尾端完全壓入采樣管內。(2)震蕩采樣管，使采樣管內的監測液體對拭子采樣部位充分浸泡和洗脫。(3)開啟ATP熒光測試儀電源并完成設備自檢后，將采樣管插入ATP測試儀的檢測孔中，讀取監測儀上顯示的ATP RUL值。ATP熒光監測結果判別：根據ATP熒光監測系統的使用說明書的判別標準，ATP值越小，器械去污效果越優；當監測結果讀數ATP值<45 RUL時為陰性，判定器械去污效果合格(-)；ATP值<15 RUL時，判定器械去污效果優(- -)；當監測結果讀ATP值≥45 RUL時為陽性(+)，判定器械去污效果不合格。

2 結果

2.1器械多酶清洗劑去污處理后的目測效果 經目測檢查，1～5號多酶清洗劑各4次浸泡處理的血管鉗(各12件次)，合格分別為12件次(100%)、4件次(33.33%)、1件次(8.33%)、12件次(100%)和12件次(100%)。不合格原因主要表現為器械上有局部可見血漬殘留。

2.2器械多酶清洗劑去污處理后的ATP監測效果 1號、4號、5號多酶清洗劑浸泡去污處理的各12件次血管鉗，均為ATP值<45 RUL，去污合格率為100%，其中ATP值<15 RUL的血管鉗15件次(41.67%)；2號、3號多酶清洗劑浸泡去污處理的各12件次血管鉗，ATP值<45 RUL的分別為3件次(25.00%)和0，ATP值≥45 RUL的分別為75.00%(9件次)和100%(12件次)；見表1。各批次試驗的陽性對照血管鉗(共20件次)，均為ATP值>5 000 RUL。

表1 5組多酶清洗劑浸泡去污處理后的器械ATP監測結果

3 討論

3.1多酶清洗劑去污清洗的特性 患者血液和體液主要由蛋白質、脂肪、淀粉等大分子不溶于水的有機物構成，同時也是各種病源微生物停留和滋生的良好載體，沾染患者血液和體液的手術器械如未得到有效的去污清洗，則殘留在器械上的有機污染物容易在干燥環境中形成難以殺滅的有機生物膜，最終產生滅菌失敗風險[5]。多酶清洗劑中至少含有蛋白水解酶、脂肪酶、淀粉酶和糖酶等生物酶類酶，可將血液和體液中的大分子污染物分解成小分子及可溶于水的物質，從而達到可靠的浸泡和清洗效果，最終使污染物中攜帶的病原微生物得到較徹底的去除[6]。但是，多酶清洗劑中各種酶之間相容性較差，特別是蛋白水解酶可對其他酶可產生較強的分解破壞作用，需要在多酶清洗劑中準確添加必要的穩定劑和螯合劑等物質，才能使各種酶平衡共存和保持各自的酶活性，否則難以達到預期的分解去污效果[7]。因此，評價多酶清洗劑對手術器械的去污性能是否可靠，僅通過各種酶含量指標來判別存在較大的局限性，而如何維持多種生物酶在運輸、存放和使用過程中的穩定性及活性，才是多酶清洗劑對手術器械上有機污染物能否分解去除的關鍵所在[8]。

3.2多酶清洗劑去污清洗的差異性 本次試驗針對市場上供給的多樣化多酶清洗，均根據廠商提供的使用說明書進行血源性污染手術器械的浸泡去污測試，旨在檢驗不同品牌多酶清洗劑的使用效果，并從中遴選效果可靠的多酶清洗劑；結果5種多酶清洗劑在相同條件下，對污染手術器械的浸泡分解去污能力具有顯著的差異，特別是2號和3號多酶清洗劑浸泡處理后的污染血管鉗，目測和ATP熒光監測的去污效果都處于較低水平(合格件數為0)，可以判定為不合格產品。后經對該5種多酶清洗劑的廠商進行調研發現，國產的1號和4號多酶清洗劑，生產規模都較大，且生產環節具備有效的全程質量控制措施，能確保多酶清洗劑中各種酶的精準含量和穩定性，試驗結果證實對器械的去污清洗能力可靠(合格率100%)。國外生產的5號多酶清洗劑為國際知名品牌，其生產、儲存和使用環節均通過嚴格的質量體系認證，試驗結果證實對器械的去污清洗能力優異(合格率100%)。而國產的2號和3號多酶清洗劑，屬代工勾兌型產品，生產條件較差，也缺乏全面的質量控制措施，雖多酶清洗劑中各種酶的含量合格，但部分原材料特別是穩定劑的質量不可靠，導致產品穩定性和酶活性較差，用于手術器械清洗則難以應有的效果。由此可見，不是所有的多酶清洗劑都可安全用于手術器械的清洗，醫院在選用多酶清洗劑使時，盡量使用行業內熟知的大品牌多酶清洗劑，并對首次使用和更換批號的多酶清洗劑實施去污清洗效果的監測，確保多酶清洗劑的有效性和穩定性[9]；針對不知名品牌和部分低價的多酶清洗劑，務必經嚴謹的審核和測試，合格后才能用于手術器械清洗，并在使用過程中加大質量監控力度，消除不合格多酶清洗劑應用可能產生的各種風險。

綜上所述，目前醫院中監測多酶清洗劑的去污清洗效果主要有目測、茚三酮蛋白監測和ATP生物熒光監測等技術，其中目測和茚三酮蛋白監測都屬于定性監測，不能準確反映器械上血源性污染物的殘留程度，存在技術局限性和監測結果精準度差的問題[11]。ATP熒光監測屬定量監測，僅需通過簡單的操作，就可檢測出微生物細胞中都含有的能量物質ATP，并根據ATP值的大小快速精確地測算出微生物的含量；因此，ATP熒光監測技術已廣泛應用于食品和手術器械上微生載荷的監測[12]。本次試驗將ATP熒光監測技術應用于多酶清洗劑的浸泡去污效果監測，監測結果較客觀地反映了5種多酶清洗劑存在的質量差異，該方法也為醫院對多酶清洗劑的準入使用提供了較可靠的甄別參考。