IL-5與INF-γ在腺樣體肥大伴分泌性中耳炎中的表達及臨床意義*

唐一萍，馮 俊，馬 鵬，羅德艷

[南充市中心醫院(川北醫學院第二臨床學院)耳鼻咽喉頭頸外科，四川南充 637000]

腺樣體也叫咽扁桃體或增殖體，為人體6個扁桃體之一。腺樣體肥大是兒童常見疾病[1]，其原因在于小兒發育不夠成熟，咽喉部容易發炎，如果炎癥反復刺激腺樣體，就會導致其發生病理性增生[2]。分泌性中耳炎是腺樣體肥大的常見并發癥，其以中耳積液、聽力下降為主要特征，屬于中耳非化膿性疾病[3]。學者們在研究分泌性中耳炎發病機制的過程中，發現免疫因素發揮了重要作用，特別是腺樣體的免疫功能異常受到了密切關注[4]。本研究選取Th2/Th1的代表性指標進行研究，觀察白細胞介素(IL)-5與γ-干擾素(INF-γ)在腺樣體肥大伴分泌性中耳炎中的表達，分析其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2020年1月至2021年6月本院收治的117例腺樣體肥大患兒，臨床癥狀為鼻塞、鼻溢、打鼾、張口呼吸，部分患兒伴耳痛、耳鳴、聽力減退、有耳內悶塞感等。所有患兒經纖維鼻咽鏡檢查確診，腺樣體/鼻咽腔(即A/N)比值>0.6，為腺樣體肥大，需切除腺樣體；部分患兒伴分泌性中耳炎，經電耳鏡、聲導抗、純音測聽等確診，需行鼓膜穿刺術或鼓膜置管術引流中耳內積液[5]。納入標準：患兒家屬同意并配合本研究；臨床資料完整。排除標準：并發免疫系統疾病、過敏性疾病、全身性疾病；近期使用過免疫抑制劑。按照病情把患兒分為兩組，56例單純腺樣體肥大患兒為對照組，61例腺樣體肥大伴分泌性中耳炎患兒為研究組。對照組男27例，女29例，年齡2～8歲，平均(4.37±0.39)歲；研究組男28例，女33例，年齡3～8歲，平均(4.42±0.40)歲。兩組患兒性別、年齡比較差異無統計學意義(P>0.05)。本研究經醫院倫理委員會審批同意(2019CH037)。

1.2 方法

所有患兒均接受全身麻醉下腺樣體切除術治療，針對伴分泌性中耳炎患兒還需鼓膜置管引流中耳內積液。留取部分腺樣體標本和中耳積液，清晨空腹抽取外周靜脈血，保存于超低溫冰箱(-70 ℃)待檢。ELISA測定兩組患兒腺樣體組織、中耳積液、血清中Th2分泌的IL-5、Th1分泌的IFN-γ水平，采用VERSAmax型酶標儀，試劑盒由上海彩佑實業有限公司提供。

1.3 統計學處理

2 結 果

兩組患兒血清IL-5水平無明顯差異(P>0.05)，而在腺樣體組織中比較差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。研究組腺樣體組織IL-5水平明顯高于在血清(t=67.285，P<0.001)和中耳積液(t=63.714，P<0.001)，血清與中耳積液IL-5水平比較差異無統計學意義(t=1.604，P=0.087)。

表1 兩組IL-5水平比較(pg/L)

在血清、腺樣體組織中兩組患兒的INF-γ水平均無明顯差異(P>0.05)，見表2。研究組腺樣體組織INF-γ水平明顯高于血清(t=38.147，P<0.001)和中耳積液(t=35.051，P<0.001)，血清與中耳積液INF-γ水平比較差異無統計學意義(t=1.627，P=0.084)。

表2 兩組INF-γ水平比較(pg/L)

兩組血清IL-5/INF-γ比值無明顯差異(P>0.05)，在腺樣體組織中研究組IL-5/INF-γ比值明顯高于對照組(P<0.05)，見表3。

表3 兩組IL-5/INF-γ比值比較

3 討 論

腺樣體位于咽穹后部，與中耳相鄰，2～6歲為腺樣體增殖的旺盛時期。腺樣體肥大和分泌性中耳炎都是小兒常見疾病[6]，小兒還處于生長發育期，免疫功能不夠健全，抵抗病原菌的能力較弱[7]。從結構來看，肥大的腺樣體會壓迫細長的咽鼓管，影響咽鼓管正常通氣，結果中耳鼓室與外界無法進行正常的氣體交換，中耳鼓室逐漸形成負壓，導致中耳黏膜的靜脈擴張，鼓室黏膜開始充血和滲出，血清漏出聚積于中耳，逐漸形成中耳積液，久而久之就誘發了分泌性中耳炎。事實上，關于腺樣體肥大引發分泌性中耳炎的作用機制，學者們有著不同的見解，并且形成了機械性阻塞學說、免疫學說、炎癥學說、感染學說等[8]。其中免疫學說從細胞水平和分子水平揭示了分泌性中耳炎的發病機制，受到了人們的高度關注，成為探索靶向治療、細胞因子治療的方向。

免疫學認為，Th細胞通過增生擴散來激活其他免疫細胞，在免疫應答反應中發揮了關鍵性作用。Th細胞分為很多種類，Th1和Th2是它的兩個主要亞型，Th1主要分泌IL-2、IL-12、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、INF-γ等細胞因子，介導細胞免疫，其中INF-γ為Th1的標志性細胞因子，Th1通過INF-γ激活巨噬細胞，INF-γ則可雙向調節Th1/Th2，一方面誘導Th0向Th1轉化，增強Th1的活性，另一方面拮抗Th0向Th1分化，抑制Th2的活性，INF-γ表達降低將直接影響機體的免疫能力；Th2主要分泌IL-3、IL-4、IL-5、IL-10、IL-13等細胞因子，介導體液免疫，其中IL-5又名嗜酸性粒細胞分化因子、B細胞生長因子-Ⅱ、IgA增強因子，可刺激嗜酸性粒細胞生長和分化，進而引發免疫反應。近年來，“Th2/Th1平衡假說”得到了越來越多的認可，其認為Th細胞在免疫應答反應中發揮著關鍵性的作用，Th2/Th1應答的動態平衡保證機體處于正常狀態，失衡則會導致疾病發生和發展[9]。既往文獻提示，在人體中Th2/Th1分泌的細胞因子保持動態平衡，因此機體能夠維持免疫自穩狀態。而一旦Th2/Th1平衡被打破，就會發生免疫異常，機體就會呈現出發病狀態[10]。有學者研究還發現，中耳積液、上呼吸道、鼻咽部有著類似的免疫反應，而且上氣道變態反應與分泌性中耳炎具有密切關系[11]。

從本研究的結果來看，IL-5與INF-γ水平在血清、腺樣體組織、中耳積液中的表達既有相似之處，又有不同之處。相似之處在于，在血清中兩組患兒的IL-5、INF-γ水平無明顯差異(P>0.05)；而從研究組組內來看，在腺樣體組織中的表達(無論是IL-5還是INF-γ)都明顯高于血清，在腺樣體組織中的表達(無論是IL-5還是INF-γ)明顯高于中耳積液，與GAN等[12]的研究結果類似。這就說明，腺樣體肥大患兒的IL-5、INF-γ在腺樣體組織中都呈高表達，表現為IL-5、INF-γ水平異常增高。其原因可能在于腺樣體組織存在Th2高表達的免疫反應，在IL-5刺激下，腺樣體局部微環境發生了IgE介導的Ⅰ型超敏反應，而嗜酸性粒細胞參與了炎癥過程，這驗證了“變態反應中的Th2假說”[13]；腺樣體組織存在Th1高表達的免疫反應，INF-γ參與相關細胞免疫反應，其激活巨噬細胞，拮抗IgE合成，抑制變態反應的發生、發展。

不同之處在于，在腺樣體組織中研究組患兒的IL-5水平明顯高于對照組(P<0.05)，INF-γ水平比較差異無統計學意義(P>0.05)，與崔喜財等[14]的研究結果相似，提示Th細胞分泌的IL-5因子多于INF-γ因子，腺樣體中可能存在Th2占優勢的情況。雖然在腺樣體組織中，對照組、研究組患兒的IL-5、INF-γ水平都增高，但是研究組患兒的IL-5水平異常增高，加速釋放嗜酸性粒細胞，導致腺樣體和中耳微環境發生Th2免疫偏極化反應，促進體液免疫，而這對于分泌性中耳炎的發生甚至發展有一定的刺激作用。進一步分析IL-5/INF-γ比值可以看出，在腺樣體組織中研究組的IL-5/INF-γ比值明顯高于對照組(P<0.05)，提示Th2/Th1失衡可能是重要的致病機制，其在分泌性中耳炎發生、發展的過程中起到了重要作用。因此，抑制腺樣體局部Ⅰ型變態反應，降低Th2極化，應成為預防和治療分泌性中耳炎的關鍵，也是靶向治療、細胞因子治療的重要方向。

綜上所述，在腺樣體肥大伴分泌性中耳炎患兒的腺樣體組織中IL-5水平異常增高，而INF-γ水平與單純腺樣體肥大患兒接近，這可為臨床診斷提供重要依據，也可以成為評價預后的關鍵指標。IL-5、INF-γ在腺樣體肥大伴分泌性中耳炎患兒血清、腺樣體組織、中耳積液中的不同表達水平，提示Th2/Th1的平衡向Th2發生了漂移，患者存在細胞介導的免疫功能缺陷，而這可能是分泌性中耳炎發病的因素之一。在免疫受抑的早期，采用基因轉錄或生物調節劑等改變局部微環境，有利于恢復細胞免疫功能，進而促進患者康復。