血清CTX-Ⅱ和HO-1水平與類風濕關節炎患者疾病活動度的相關性分析

肖飛 杜磊

(1.寶雞市第二中醫醫院，陜西 寶雞 721300；2.咸陽市涇陽縣醫院，陜西 咸陽 713700)

類風濕關節炎是一種慢性全身性的炎癥疾病，屬自身免疫性疾病的范疇，好發于女性[1]。Ⅱ型膠原C端肽(CTX-Ⅱ)是Ⅱ型膠原的裂解產物，與關節軟骨損傷有關，其被認為是可反映軟骨破壞程度的評估指標[2]。血紅素氧合酶-1(HO-1)是催化血紅素在體內氧化降解的限速酶之一，通常在應激條件下表達增加[3]。最近有文獻報道，在類風濕關節炎患者的滑膜組織中可檢測到HO-1表達[4]。因此，本研究旨在分析血清CTX-Ⅱ和HO-1水平與類風濕關節炎患者疾病活動度的相關性，以探討CTX-Ⅱ和HO-1對類風濕關節炎疾病活動度的監測意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2016年1月至2019年6月我院收治的類風濕關節炎患者80例，所有患者均符合風濕關節炎臨床診斷標準[5]，排除合并糖尿病、高血壓、高血脂、心腦血管疾病、嚴重肝腎功能障礙、甲狀旁腺功能障礙及其他風濕性疾病。其中男22例，女58例，年齡43～75歲，平均年齡(56.37(12.16)歲，病程16～103個月，平均病程(77.82(21.36)個月。另納入43例非類風濕關節炎患者和39例體檢健康自愿者作對照，其中非類風濕關節炎組，男16例，女27例，年齡45～73歲，平均年齡(55.08(10.37)歲，疾病類型：骨關節炎11例、反應性關節炎18例、非類風濕關節炎彌漫性結締組織病14例；健康對照組，男14例，女25例，年齡41～72歲，平均年齡(54.36(10.91)歲。3組的一般資料相比差異無統計學意義(P<0.05)。

1.2方法

1.2.1樣本采集 采集3組空腹外周靜脈血4～5 mL，EDTA抗凝處理，室溫靜置30 min，3 000 rap/min離心15 min，分離上層血清，于-80℃保存備用，血清分離過程中避免發生溶血。

1.2.2主要試劑與儀器 人CTX-Ⅱ酶聯免疫吸附法試劑盒購自上海滬震生物有限公司，人HO-1酶聯免疫吸附法試劑盒購自上海極威生物科技有限公司，Synergy2多功能酶標儀購自美國BioTek公司。

1.2.3檢測方法 采用酶聯免疫吸附法檢測血清CTX-Ⅱ和HO-1水平，實驗步驟嚴格按照相應試劑盒說明書進行操作，首先設置標準孔、樣本孔及空白孔，向標準孔加入按一定比例稀釋好的標準品，樣本孔加入待測樣本，空白孔不加溶液，然后除空白孔外，其余孔均加HRP標記的檢測抗體，附上封板膜，37℃溫育60 min，棄去孔內液體，甩干、洗板、再甩干，所有孔均加入配置好的底物溶液，37℃避光溫育15min，最后向每孔中加入終止液，立即使用Synergy 2型多功能酶標儀在450 nm波長處測定各孔的OD值，然后根據標準曲線計算出血清樣本中CTX-Ⅱ和HO-1水平。

1.3觀察指標 采用疾病活動度評分28(DAS28)評價類風濕關節炎患者的疾病活動程度，首先計算28個關節的關節腫脹數(SJC)和關節壓痛數(TJC)，根據SJC、TJC和血沉(ESR)數值計算DAS28評分[6]。

2 結 果

2.13組血清CTX-Ⅱ和HO-1水平比較 3組血清CTX-Ⅱ和HO-1水平存在顯著性差異(P<0.05)，其中類風濕關節炎組血清CTX-Ⅱ和HO-1水平明顯高于非類風濕關節炎組和健康對照組(P<0.05)，非類風濕關節炎組血清CTX-Ⅱ和HO-1水平明顯高于健康對照組(P<0.05)。見表1。

表1 3組血清CTX-Ⅱ和HO-1水平比較

2.2類風濕關節炎患者血清CTX-Ⅱ和HO-1水平的相關性 類風濕關節炎組患者的血清CTX-Ⅱ水平與HO-1水平呈正相關(r=0.726，P<0.05)。

2.3類風濕關節炎患者血清CTX-Ⅱ和HO-1水平與疾病活動度指標的相關性 類風濕關節炎組患者血清CTX-Ⅱ水平與SJC及DAS28評分均呈正相關(P<0.05)，而與TJC及ESR不相關(P>0.05)，血清HO-1水平與TJC及DAS28評分均呈正相關(P<0.05)，而與SJC及ESR不相關(P>0.05)。見表2。

表2 類風濕關節炎患者血清CTX-Ⅱ和HO-1水平與疾病活動度指標的相關性

3 討 論

有研究顯示，在正常情況下細胞內的HO-1基因呈低表達，但當機體發生炎癥、缺氧等應激反應時，應激反應轉錄因子NF-kB可與HO-1啟動子區域的特殊位點結合，促進HO-1基因高表達[7]，而普遍認為NF-kB的異常活化與關節損傷及骨膜組織炎性增生密切相關[8]，且近年在類風濕關節炎患者關節液中檢測到了HO-1[9]。因此，研究CTX-Ⅱ和HO-1表達與類風濕關節炎的關系有一定意義。

本文結果顯示，類風濕關節炎組血清CTX-Ⅱ和HO-1水平明顯高于非類風濕關節炎組和健康對照組(P<0.05)，同時，類風濕關節炎組患者的血清CTX-Ⅱ水平與HO-1水平呈正相關(P<0.05)，表明類風濕關節炎患者血清CTX-Ⅱ和HO-1水平明顯上升，且二者具有明顯的相關性。

監測類風濕關節炎疾病進展，對于此類患者的臨床治療和預后具有重要意義。本文結果發現，類風濕關節炎組患者血清CTX-Ⅱ水平與SJC及DAS28評分均呈正相關(P<0.05)，而與TJC及ESR不相關(P>0.05)，血清HO-1水平與TJC及DAS28評分均呈正相關(P<0.05)，而與SJC及ESR不相關(P>0.05)，由于DAS28評分是評價類風濕關節炎患者疾病活動程度的重要指標，而血清CTX-Ⅱ和HO-1水平又均與DAS28評分呈正相關，這表明血清CTX-Ⅱ和HO-1水平與類風濕關節炎疾病活動程度呈正相關，檢測二者水平對于監測類風濕關節炎疾病活動度具有積極意義。

綜上，類風濕關節炎患者血清CTX-Ⅱ和HO-1水平升高，且與患者的疾病活動度呈正相關，是可用于監測類風濕關節炎疾病活動度的潛在指標。