一款含藍銅勝肽精華液的制備及其抗皺功效評價

趙絢 王領 劉佳偉

關鍵詞：藍銅勝肽；抗皺；功效評價

隨著社會的進步、科學技術的發展以及生活水平的提高，人們追求天然、綠色、健康安全的意識日漸增強，綠色化、功能化的化妝品深受人們青睞。近年來，以勝肽為主要活性成分的護膚品在市場上比比皆是，其中蟄伏多年的藍銅勝肽開始重新活躍，頻頻出現在各種化妝品配方中，被稱為“寶藏成分”。

藍銅勝肽（CopperTripeptide-1，GHK-Cu）為甘氨酰-組氨酰-賴氨酸三肽（GHK）與二價銅離子相結合而成的化合物，因其與水相溶后溶液為藍色，也被稱為“藍銅肽”[1]。藍銅勝肽是一種活性三肽，在1973年，由Pickart研究團隊首次從“人的血漿里分離純化而得”[1]。通過進一步的研究，學者們發現Cu2+與藍銅勝肽之間擁有良好的親和性，兩者間能自發結合從而形成GHK-Cu化合物[2，3]。藍銅勝肽以GHK為載體，絡合和運載Cu2+進入細胞從而發揮相應的作用[2，3]。

銅離子的存在，對自然界中多種生物的生命活動都有著十分重要的作用與功能，包括細胞呼吸作用、抗氧化防御、結締組織的形成和血液凝固等多種生命活動過程[1-3]。除此之外，藍銅勝肽具有多種優勢：（1）刺激膠原蛋白與彈力蛋白形成，緊致松弛肌膚，逆轉老化肌膚變薄，修復保護性肌膚屏障蛋白[4，5]；（2）恢復肌膚修復能力，增加皮膚細胞間黏質產生，改善老化肌膚結構，平滑粗糙肌膚，減少皮膚受損[5]；（3）刺激葡萄糖聚胺形成，增加皮膚厚度，減少皮膚松弛，緊實肌膚[6，7]等。因此，藍銅勝肽的重要性不言而喻，成功的從眾多多肽中脫穎而出，成為護膚品領域的新貴。其抗衰老的原理是藍銅勝肽可以促進膠原蛋白生成，刺激葡萄糖聚胺合成，而膠原蛋白增長可以增強皮膚彈性，改善細紋，使面部飽滿堅實。藍銅勝肽性情溫和兼具多種功效，可抗老、可修復、可抗皺、可抑制脫發、可抗自由基等[7]。多種功效協同作用使其獨一無二，成為現下精簡護膚的一種有效手段。

材料與方法

01材料與儀器

甘油聚醚-26，北京信諾久恒科貿有限公司；雙丙甘醇，北京信諾久恒科貿有限公司；透明質酸鈉，華熙生物科技股份有限公司；皺波角叉菜，上海博爍實業有限公司；泛醇，上海理鴻化工科技有限公司；PEG/PPG-17/4二甲基醚，上海理鴻化工科技有限公司；1，2-己二醇，北京信諾久恒科貿有限公司；對羥基苯乙酮，北京信諾久恒科貿有限公司；三肽-1銅，山東濟肽生物科技有限公司。

面部影像分析VISIA圖像分析軟件（Canfied公司，美國）、皮膚彈性測試探頭Cutometer（MPA580，德國CK公司）、皮膚顯微鏡及活性皮膚表面分析系統VisioScan（VC20plus，德國CK公司）

測試產品為含有藍銅勝肽的化妝品，實驗室自制，詳見表1。

02含藍銅勝肽的精華液配方組成及工藝流程

將A相中甘油聚醚-26、雙丙甘醇、透明質酸鈉、皺波角叉菜進行預分散，后加入剩余其他原料，放入85℃水浴鍋中攪拌均勻，攪拌器轉速為300r/min，保溫30min后降溫，當產品溫度降至65℃時加入B相中1，2-己二醇和對羥基苯乙酮，攪拌均勻。繼續降溫，產品溫度降至45℃時，加入剩余其他原料，攪拌均勻，得含藍銅勝肽的精華液。

03方法

3.1受試者篩選

受試者篩選工作參考2015版《化妝品安全技術規范》。受試者的選擇遵循人體測試的醫學和倫理學標準，所有受試者的測試均必須出于受試者本人自愿，并在測試前簽署知情同意書。

招募健康男女受試者30人，年齡為18～45歲，志愿者排除條件符合《化妝品接觸性皮炎診斷標準及處理原則》納入、排除標準。

3.2產品評價

參照2015版《化妝品安全技術規范》對所制備產品進行安全性、穩定性、感官評價。

3.3產品使用及測試安排

3.3.1實驗樣品使用方式

受試者每日早晚潔面后，按照產品使用說明使用產品，每次使用0.3g～0.5g（一至兩泵）精華，輕輕按摩至吸收，實驗期間停用其他抗皺護膚品。

3.3.2測試部位

面部左右臉頰部位。

3.3.3測試指標

面部VISIA圖像分析、皮膚彈性數值、皮膚粗糙度數值

3.3.4對照組選擇

本研究為面部皮膚抗皺功效測試，對照選擇以自身前后對照。將所有受試者使用產品前的皮膚皺紋分值、皮膚粗糙度、皮膚彈性測試數據作為對照，分別在使用產品第14和28天后，測試受試者相應的指標作為實驗組。

3.3.5實驗流程

①志愿者由研究人員進行篩選，滿足入組、排除標準，并且簽署志愿者協議書后參加測試，實驗開始前48h停用類似功效化妝品。

②實驗測試時，清水清洗受試部位，在溫度21.0℃±1.0℃，相對濕度50%±10%RH的恒溫恒濕環境中，靜坐30min之后進行數據采集。填寫自評問卷。發放樣品和產品使用說明。

③受試者按照使用說明進行使用，周期為28天，分別在第0天、第14天、第28天進行皮膚測試和回訪。

3.3.6受試者自我評估（問卷調查）

在第0天、第14天、第28天測試時對受試者進行產品使用評估調查。

3.4數據分析

應用EXCEL軟件對各個測量值進行描述性統計，包括數量、最大值、最小值、均值、標準差等。

應用SPSS軟件Shapiro-WilkTest方法進行數據改善值正態分布的顯著性檢驗，若Sig.（雙側）>0.05，則呈正態分布，進行配對樣本t檢驗，顯著性差異水平α取0.05；若Sig.（雙側）<0.05，則呈非正態分布，進行Wilcoxon檢驗，顯著性差異水平α取0.05，分析使用產品前后皮膚參數是否具有顯著性差異。

結果與討論

01人體功效評價實驗結果

1.1皮膚指標分析測試結果

1.2皮膚抗衰指標結果分析

皮膚老化是機體衰老的直接體現，主要表現為皺紋增生、皮膚干燥萎縮、色素沉著和失去彈性等[8]。皺紋和粗糙度是反映肌膚年輕狀態的重要指標，皺紋分值和粗糙度值越低，肌膚越光滑，更顯年輕態。面部皺紋分值、粗糙度分值測量結果見表2，表3和圖1，在測試周期內，與本底值相比，面部皺紋分值和粗糙度分值均呈下降趨勢，面部皺紋平均值在第14天和28天時，分別降低10.82%和21.13%，且面部皺紋分值改善表現出顯著性差異明顯（0.001≤P＜0.01）。另從圖2可見，測試者使用樣品后面部皺紋明顯減少。面部粗糙度平均值在第14天和28天時，分別降低19.91%和32.00%，且在第28天時，面部粗糙度值改善表現出顯著性差異明顯（0.001≤P＜0.01）。另從圖3可見，測試者使用樣品后面部粗糙度明顯減輕。

1.3皮膚彈性指標結果分析

皮膚衰老過程中皮膚真皮層的變化主要為膠原蛋白減少，成纖維細胞增殖能力下降。皮膚衰老問題主要體現在皮膚粗糙增厚，彈性下降，皺紋增多，出現色斑，皮膚暗淡沒光澤[8，9]。補充膠原蛋白，增強彈力蛋白活性，改善皮膚彈性是延緩皮膚衰老的有效方法。面部彈性分值R2、Q1值測量結果見表2，表3和圖4，在測試周期內，與本底值相比，面部彈性R2和Q1分值均呈上升趨勢，面部彈性R2值平均值在第14天和28天時，分別升高8.57%和13.18%，且在第28天時，面部彈性R2值改善表現出顯著性差異明顯（0.001≤P＜0.01）。面部彈性Q1平均值在第14天和28天時，分別上升8.63%和12.23%，且在第28天時，面部彈性Q1值改善表現出顯著性差異明顯（0.001≤P＜0.01）。

通過VISIA面部影像分析和皮膚表面分析可知，測試期內，使用樣品后測試者面部皺紋和粗糙度明顯減少，表明該測試樣品具有一定的緊致肌膚和改善細紋的作用。通過面部彈性數據表明，與本底值相比，皮膚彈性數值呈上升趨勢，測試數據表明該樣品能夠有效提高皮膚彈性，使肌膚緊致。

02受試者主觀評價結果

受試者在使用28天后，對面部水潤度改善程度滿意的占比100%，對面部緊致度改善程度滿意的占比96.67%，對面部光澤感改善程度滿意的占比96.67%，對面部粗糙度改善程度滿意的占比96.67%，對面部彈性改善程度滿意的占比100%，對面部細紋改善程度滿意的占比100%，對面部整體改善程度滿意的占比100%。

結論

藍銅勝肽具有較好的抗衰老效果，并且可以刺激膠原蛋白與彈力蛋白形成，緊實肌膚及減少細紋，可用于制備具有一定功效的化妝品。本文通過配方設計制備了含藍銅勝肽的精華液，并運用人體實驗法通過30名受試者連續使用該精華液28天的實驗數據，進一步驗證了其抗皺功效，結果表明含藍銅勝肽的精華液有明顯的補水、提高皮膚彈性的效果，在降低皮膚粗糙度、淡化細紋方面也有顯著效果。因此，藍銅勝肽具有較好的開發價值和開發前景。