乳酸刺痛試驗在敏感皮膚評價中的應用

韓雨晴 于佳 王瑞 趙金楓 顏士玉 盤瑤

關鍵詞：乳酸刺痛試驗；敏感皮膚；表皮屏障功能；化妝品功效評價

01引言

隨著適用于敏感皮膚的化妝品的不斷發展，評價敏感性皮膚（Sensitiveskin，SS）的相關方法在化妝品功效研究中顯得至關重要。流行病學調查顯示，SS在亞洲地區的女性中發生率為40%～55.98%，在中國女性中發生率約為36.1%[1]。在我國皮膚病專家共同發布的《中國敏感性皮膚診治專家共識》（以下簡稱《共識》）中，將SS定義為：皮膚在生理或病理條件下發生的一種高反應狀態，主要發生于面部，表現為受到物理、化學、精神等因素刺激時皮膚易出現灼熱、刺痛、瘙癢及緊繃感等主觀癥狀，伴或不伴紅斑、鱗屑、毛細血管擴張等客體特征[2]。國外對于SS的定義是皮膚對于外界因素呈現的一種高反應狀態[3]。SS的發生機制尚未完全闡明，目前公認其是涉及皮膚屏障—神經血管—免疫炎癥的一個復雜過程[4]。

《共識》中將SS的評定方法劃分為主觀評估、半主觀評估和客觀評估。半主觀評估是基于化學探頭引起皮膚的刺激反應這一原理，根據受試者感受到的刺激大小對他們的皮膚的敏感程度進行評分。而乳酸刺痛試驗（LacticAcidStingTest，LAST）是《共識》中提到的半主觀評價SS的方法之一[2]，同時也是目前評價SS的方法中認可度最高、應用最廣泛的方法。

02研究方法

2.1文獻檢索策略

計算機檢索中國知網、萬方、WebofScience數據庫，搜索有關使用、研究LAST的文章，檢索時限為建庫到2022年11月前。搜索的關鍵詞為“乳酸刺痛試驗”“敏感皮膚”“皮膚屏障”“lacticacidstingtest”“sensitiveskin”“self-perceivedsensitiveskin”和“epidermalskinbarrierfunction”等。檢索文獻類型：綜述性論文和研究性論文。

2.2文獻篩選

納入標準：根據文章題目和摘要，選擇涉及LAST的相關研究以及其參考文獻。

排除標準：研究目的與該文內容無關的文獻；觀點陳舊或重復性研究的文獻。

2.3資料提取

初檢后獲得關鍵詞為“乳酸刺痛試驗”“lacticacidstingtest”的文獻116篇，按照發表時間倒序選取關鍵詞為“敏感皮膚”“皮膚屏障”“sensitiveskin”“selfperceivedsensitiveskin”和“epidermalskinbarrierfunction”的文獻107篇，通過其他資源途徑獲得的文獻53篇，共收集相關文獻276篇。在去重、閱讀題目及摘要后排除明顯不相關文獻，共收集185篇。對初篩后可能符合標準的185篇文獻進一步閱讀全文，最終納入43篇文獻。文獻篩選流程及結果見圖1。

03結果

3.1乳酸刺痛試驗的發展歷程

1977年，Frosch[5]等人最先設計出LAST，用于篩選出易感受到皮膚刺激的人群。最經典的LAST方案是首先在室溫下涂抹50μL5%或10%的乳酸于鼻唇溝及任意一側面頰，從計時開始分別在2.5分鐘、5分鐘和8分鐘的時間點詢問受試者的感受，然后按4分法進行評分（0分為沒有刺痛感，1分為輕度刺痛，2分為中度刺痛，3分為重度刺痛），最后將分數相加。總分≥3分，則為LAST陽性。

由于LAST的結果是根據受試者的主觀評分得出的，具有較強的主觀性，為了使試驗結果更加客觀、標準，一些試驗經常會結合其他測試共同作為評價SS的依據。最先與其他測試結合是在1998年，Seidenari[6]等人將10%LAST的評分、受試者的問卷調研以及無創儀器測試相結合，發現SS的經表皮失水率、pH值相對高，而水分、皮脂的含量相對較少。在2002年，基于亞洲人使用化妝品后上報的不良反應更多這一情況，Aramaki[7]等人使用濃度為10%的LA結合不同濃度的十二烷基硫酸鈉的結果共同作為評判的依據，發現亞洲人的皮膚對刺激物的滲透速度更快，刺激感受更強烈。因此，為提高LAST對于亞洲人的安全性，在2003年，Wu[8]等人首先提出將LA濃度調整為3%和5%。皮膚病患者的表皮屏障功能表現出不同程度的損傷，出于對皮膚病患者安全性的考慮，Tsuyoshi[9]等人在2018年將在皮膚病患者中進行LAST的LA濃度降為1%。

因此，從安全性的角度出發，研究人員對LAST的方法做了調整，在不同地區會選擇不同濃度的LA，詢問受試者的時間節點也做出了相應的改變。表1是對32篇文獻中選擇的LA濃度、地區、部位、作用時間、試驗目的的匯總。研究者可以參考文獻中的方法，根據受試者的實際情況來調整LAST的實際操作方式。

3.2乳酸刺痛試驗在皮膚疾病臨床治療中的應用

表皮屏障功能是皮膚重要的防御屏障之一。越來越多的研究證實，表皮屏障功能混亂是引起多種皮膚病的主要因素[34]。LAST可以辨別由于表皮屏障受損導致的SS，并且通過受試者的評分評價皮膚敏感程度。

玫瑰痤瘡是常見的慢性充血性炎癥性皮膚病，吳琰瑜[14]等人為了研究玫瑰痤瘡不同時期敏感程度的差異，使用濃度為5%的LA進行LAST，發現紅斑期患者的皮膚敏感程度高于丘疹期，推測這一現象可能是由于局部血管明顯擴張導致。手部暴露于親脂性刺激物很有可能引起手部皮膚過敏，Schliemann[18]等人使用濃度為5%的LA進行LAST，篩選出現刺痛的患者，發現他們對于兩種脂質刺激物的反應更敏感，且LAST可以預測出對脂質刺激物敏感的人群。LAST也可用于探究皮膚敏感性與特異性皮炎嚴重程度的關系，Tsuyoshi[9]等人使用1%的LAST，結合客觀儀器測量和量表評分，發現特異性皮炎患者的LAST評分更高，且特異性皮炎越嚴重皮膚越敏感。軟體動物傳染在非洲是一種常見的兒童皮膚感染病，Melike[39]等人發現LA和水楊酸的混合溶液能有效判斷兒童的軟體動物傳染。

LAST也常被用于評價皮膚病治療方法的療效，李艷飛[34]等人通過對比面部激素依賴性皮炎患者使用噻嗎洛爾和卡替洛爾聯合他克莫司前后的LAST評分和毛細血管再充盈時間，發現二者均能明顯改善面部激素依賴性皮炎導致的皮膚毛細血管擴張，緩解皮膚敏感狀態。黃迎玉[40]等人通過對比SS受試者治療前后的LAST評分和經表皮失水率，發現透明質酸經微針注射以及外用對于修復SS的皮膚屏障是有效的。Zhang[33]等人對比了SS受試者使用新開發的乳膏前后的LAST評分和紅斑指數等指標，發現其能夠改善皮膚的敏感狀態。Sabine[17]等人測試了一款保濕乳液對于玫瑰痤瘡的療效，使用15%的LA進行LAST，同時檢測皮膚的水分含量、經表皮失水率等數據，結果表明此款乳液能夠降低玫瑰痤瘡患者皮膚的敏感程度。

3.3乳酸刺痛試驗在化妝品功效評價中的應用

消費者的需求愈發多樣化，化妝品研發人員針對SS人群推出適用于敏感皮膚的化妝品，其主要是通過修復皮膚屏障發揮功效，以此提高皮膚對于化妝品的耐受性。因此，可以在受試者單次及多次使用化妝品后，通過LAST結合其他測試對產品的功效或護膚習慣進行評價。

清潔、保濕、防曬是保持皮膚健康的基本三步，Stacy[13]等人讓SS受試者持續三周不斷重復這三個步驟，再比較三周前后的LAST得分，發現堅持這三個步驟可以降低皮膚的敏感性。袁超[19]等人為探究保濕劑短期內對LAST陽性者的皮膚屏障修復作用，發現短期內，保濕劑對LAST陽性患者皮膚屏障的影響為增加皮膚水分含量、降低皮膚的經皮水分散失量，對LAST刺痛的改善不大。為探究透明質酸修護膜與保濕修復霜輔助治療SS效果，李娜[20]等人對比了受試者在涂抹樣品前后的LAST得分和經表皮失水率等數據，發現透明質酸修護生物膜能促進皮膚屏障的恢復。Hiroshi[41]等人對比SS受試者使用神經酰胺前后的LAST評分，發現神經酰胺可以減少由LA引起的刺痛感。張圓瑾[42]等人對比SS受試者使用含有當歸、紫球藻的新型功效性護膚品前后的LAST評分和紅斑指數等數據，發現其可以改善SS受試者的面部紅斑和毛細血管擴張，有效修復皮膚屏障。宮建輝[43]等人使用LAST篩選出LAST陽性受試者，發現受試者食用透明質酸鈉膠原蛋白果味飲品后表現出皮膚發紅程度降低、皮膚水分含量提升、皮膚彈性提升、經皮水分散失量降低，且能夠有效修護皮膚屏障。

04總結與展望

皮膚屏障受損是SS的一大特征，而LA可以靈敏的辨別由于皮膚屏障受損所導致的SS。LA具有分子量小這一優點，極容易在皮膚屏障受損后經皮滲透，刺激真皮層中的無髓C類神經，進而產生刺痛的感覺。LAST作為評價SS的一種半主觀評價方法，操作簡便，應用廣泛。最經典的LAST是使用10%的LA，但不同地區的人群對LA的耐受程度不同，在歐美地區進行LAST時通常情況下仍然使用10%～15%的LA濃度，而在亞洲地區進行的LAST會按照研究需求和受試人群選擇1%～10%的LA濃度。在今后的實驗當中，應當考慮到不同受試者人群的皮膚特點，并有針對性地修改LAST中LA的濃度和作用時間。

導致皮膚敏感的因素有很多，包括屏障受損、神經血管反應、免疫炎癥等，而LAST只適用于判斷是否為SS，無法準確區其SS類型。其一，LAST無法檢測出皮膚屏障完好的SS。皮膚屏障受損只是SS的眾多表現之一，但也存在一部分SS的皮膚屏障完好的情況。考慮到LA的作用原理，皮膚屏障完好的SS無法感受到刺痛感，可能會被誤判為健康肌膚。其二，LAST無法區分血管性反應型SS和皮膚屏障受損型SS，由于二者都會對LA產生刺痛感，所以單獨使用LAST無法對其進行區分。綜上所述，LAST不適合單獨作為SS的判斷依據。在今后的研究中，應當綜合考慮不同的研究目的和不同的SS類型，選擇多種判斷方法并結合LAST一起使用。