不同產前診斷指征與胎兒臍帶血染色體異常核型分析*

梁灼健，何慧燕，趙 鑫，秦 娟，廖秋燕，戴 勇，湯冬娥

廣東省深圳市人民醫院臨床研究中心，廣東深圳 518020

產前診斷是妊娠期間通過各種手段檢測胎兒生長發育狀況及是否患有遺傳病的主要手段，對預防出生缺陷、提高出生人口素質有重要意義。染色體是遺傳物質的載體，染色體核型分析能夠準確反映胎兒染色體是否發生了異常，是產前診斷的金標準。因此，對有產前診斷指征的孕婦進行染色體核型分析，對產前診斷有重要指導意義。本研究對2017年6月至2020年10月在本院就診的有不同產前診斷指征孕婦的臍帶血染色體核型結果進行統計分析，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2017年6月至2020年10月于本院產前診斷中心就診、經遺傳咨詢有產前診斷指征的3 252例孕婦作為研究對象，就診時年齡17～47歲，孕周16～26周。知情并簽署知情同意書后，經臍靜脈穿刺。

1.2產前診斷指征 高齡孕婦(預產期年齡≥35歲)、血清學篩查高風險或臨界風險、產前超聲檢查提示胎兒結構或其他軟指標發育異常、有不良孕產史、夫婦一方染色體核型異常等，以及無產前診斷指征而自愿要求進行臍靜脈穿刺的孕婦。

1.3方法 在B超引導下經臍靜脈穿刺，抽取1 mL臍帶血注于肝素抗凝管，取0.4 mL接種至臍帶血培養基(廣州拜迪生物醫藥有限公司生產)，37 ℃培養70 h，取濃度為40 μg/mL的秋水仙素80 μL加入培養細胞中，2 h后常規制片、染色，最后使用萊卡染色體全自動掃描儀(GSL120)進行掃描、分析。每例孕婦計數30個分裂相，核型分析至少5個，存在數目異常至少計數50個分裂相。

1.4統計學處理 采用SPSS23.0統計軟件進行數據分析處理。計數資料以例數或百分率表示，組間比較采用χ2檢驗。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1染色體異常情況 3 252例臍帶血共檢出染色體異常核型182例，異常檢出率為5.60%，其中染色體數目異常141例(77.47%)，染色體結構異常41例(22.53%)。141例染色體數目異常中性染色體數目異常69例(48.93%)，21-三體56例(39.72)，18-三體9例(6.38%)，13-三體3例(2.13%)，多1條標記染色體4例(2.84%)；41例染色體結構異常中易位、缺失、衍生均為11例(26.83%)，倒位8例(19.51%)。

2.2不同產前診斷指征的異常核型檢出情況 3 252例不同產前診斷指征臍帶血染色體異常核型檢出率如下：夫婦一方染色體異常核型13.79%(4/29)，產前超聲檢查異常7.09%(60/846)，高齡孕婦7.05%(68/964)，血清學篩查聯合產前超聲檢查異常3.86%(10/259)，血清學篩查高風險或臨界風險2.70%(13/482)，有不良孕產史1.05%(1/95)，NIPT異常46.77%(87/186)，各項產前診斷指征與NIPT異常比較，差異均有統計學意義(χ2=13.86、196.56、210.94、116.95、204.84、61.12，P<0.05)；NIPT聯合產前超聲檢查異常(64.29%)與單項NIPT異常比較，差異有統計學意義(P<0.05)；NIPT聯合血清學篩查(60.00%)與單項NIPT異常比較，差異有統計學意義(P<0.05)；NIPT聯合血清學篩查和產前超聲檢查異常(40.00%)與單項NIPT異常比較，差異無統計學意義(P>0.05)；產前超聲檢查異常與血清學篩查高風險或臨界風險比較，差異有統計學意義(P<0.05)。高齡孕婦異常核型檢出率[7.05%(68/964)]與非高齡孕婦[4.98%(114/2 288)]比較，差異有統計學意義(χ2=5.51，P<0.05)；964例高齡孕婦21-三體、18-三體、13-三體、 9-三體 、性染色體數目異常、結構異常核型異常檢出率分別為2.90%、0.52%、0.21%、0.10%、2.39%、0.93%；2 288例非高齡孕婦21-三體、18-三體、13-三體、+mar、性染色體數目異常、結構異常核型異常檢出率分別為1.22%、0.17%、0.04%、0.17%、1.97%、1.40%。高齡孕婦21-三體檢出率與非高齡孕婦比較，差異有統計學意義(χ2=11.32，P<0.05)；高齡孕婦其他異常核型檢出率與非高齡孕婦比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。高齡孕婦中NIPT聯合血清學篩查異常2例，NIPT聯合超聲檢查異常10例，異常核型檢出率均達100.00%，明顯高于非高齡孕婦的檢出率[44.44%(8/18)、50.00%9(4/8)]。

3 討 論

造成出生缺陷的因素有環境因素(10%)、遺傳因素(25%)、環境與遺傳因素相互作用及原因不明因素(65%)[1]。因遺傳因素造成的出生缺陷，現階段暫無有效的治療手段，只能通過產前診斷減少異常新生兒出生。染色體核型分析是診斷胎兒是否患有遺傳病的重要手段，但是有創的采樣操作容易引起宮內感染和胎兒流產，因此，臨床需要通過產前篩查后再進行染色體核型分析，這樣既能減少對孕婦的傷害，又能提高檢出率。因此，臨床合理應用產前診斷指征對產前診斷意義重大。染色體病指染色體因病理條件或受某些環境誘發因素影響而發生數目異常或結構畸變，此變化可造成遺傳物質增減或者位置改變，而原來的遺傳信息控制性狀將不顯現或出現異常，結果可導致該個體死亡或表現出各種癥狀。其中染色體非整倍體數目異常較為常見，結構異常較為少見。本研究染色體異常核型檢出率為5.60%，其中數目異常占77.47%，結構異常占22.53%，數目異常是結構異常的3倍多，數目異常與結構異常的比例與羅艷等[2]研究結果相近。數目異常中異常率最高的為性染色體數目異常(69例)，其次為21-三體(56例)，此結果與武堅銳等[3]研究中21-三體發生率最高有所不同，其原因可能為標本統計地區與標本類型有所不同所致。

血清學篩查是傳統的產前檢查項目，甲胎蛋白、人絨毛膜促性腺激素、游離雌三醇等血清標志物與唐氏綜合征密切相關。本研究血清學篩查高風險或臨界風險異常核型檢出率為2.70%，與其他產前診斷指征比較，異常核型檢出率相對較低。血清學篩查還有另外一個作用，能檢查出神經管缺陷、胎盤異常、母體腫瘤等[4]，再加上高靈敏度[5]的檢測特點，使血清學篩查成為當前產前診斷不可缺少的一個項目。產前超聲檢查能安全有效地檢測胎兒在宮內的發育情況，同時，超聲檢查指標異常對胎兒染色體異常有一定提示作用[6]。本研究產前超聲檢查異常核型檢出率為7.09%，明顯高于血清學篩查，差異有統計學意義(P<0.05)。隨著科技的進步，超聲儀器分辨率不斷提高，產前超聲檢查給臨床提供更多的異常核型指標，使產前超聲檢查對染色體異常核型的檢出更具靈敏度與特異度。胎兒的染色體遺傳于父母，父母染色體異常是胎兒染色體異常的主要原因。本研究夫婦一方染色體異常核型檢出率為13.79%，明顯高于血清學篩查與產前超聲檢查，并且當染色體發生平衡易位、倒位時暫無其他手段能檢出。因此，當夫婦一方染色體異常時，建議孕婦按規定直接進行穿刺檢查染色體核型。本研究有不良孕產史孕婦異常核型檢出率為1.05%，均低于其他產前診斷指征，可能與引起不良孕產史的誘因太多有關[7]。

NIPT是一種無創的產前篩查技術，本研究NIPT高風險的異常核型檢出率最高(46.77%)。NIPT對唐氏篩查的特異度很高，與其他產前診斷指征相比結果最接近臍帶血的染色體異常核型檢出率，與中孕期三聯血清學篩查比較，檢出率可升高數十倍，此結果與張舫等[8]研究產前診斷指征與羊水異常核型檢出率相似。本研究發現，NIPT聯合產前超聲檢查(64.29%)、NIPT聯合血清學篩查(60.00%)的異常核型檢出率明顯高于單項NIPT異常。由此可見，聯合檢測與單項檢測比較，有更高的特異度與靈敏度。NIPT也有其局限性，NIPT僅對21、13、18-三體，性染色體數目異常有較高的篩查能力，其陰性結果仍無法證明其他染色體是否發生異常，同時NIPT不適合于多胎及自身染色體異常的孕婦檢查[9]。因此，在條件允許的情況下,當NIPT指標發生異常時，還是建議進行介入性產前診斷；當條件不允許時，可以適當結合其他產前診斷指征，盡可能提高出生缺陷檢出率。

隨著年齡的增長，卵細胞老化會越來越嚴重，加上環境因素的影響，卵細胞染色體異常率會逐漸增高，特別是染色體不分離的現象，與卵細胞的老化密切相關[10]。本研究高齡組異常核型檢出率(7.05%)明顯高于非高齡組(4.98%),差異有統計學意義(P<0.05),由此可見，高齡孕婦可以作為一項獨立的高危因素應用于產前診斷。本研究發現，高齡孕婦中NIPT聯合血清學篩查異常2例，NIPT聯合超聲檢查異常10例，異常核型檢出率均達100.00%，明顯高于非高齡孕婦的檢出率[44.44%(8/18)、50.00%(4/8)]，雖然病例數不多，但是這2個組合的高檢出率應引起重視，特別是對于一些無法進行穿刺或者胎兒來之不易、不愿接受穿刺的家庭，NIPT聯合血清學篩查及產前超聲檢查能很大程度地提高異常檢出率，減少漏診與誤診發生。高齡孕婦唐氏綜合征發生率明顯高于非高齡孕婦，本研究高齡孕婦21、18、13-三體發生率(2.90%、0.52%、0.21%)明顯高于非高齡孕婦(1.22%、0.17%、0.04%)。高齡孕婦21-三體發生率與非高齡孕婦比較，差異有統計學意義(P<0.05)；高齡孕婦18、13-三體與非高齡孕婦比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。由此可見，21-三體的發生率與孕婦的年齡密切相關，并且隨年齡增加，有上升趨勢。高齡孕婦性染色體數目異常、結構異常與非高齡孕婦比較，差異均無統計學意義(P>0.05)，此結果與王麗霞等[11]的分析一致。由此可見，卵細胞染色體不分離的現象不是單純的紡錘體老化所致，還與其他因素有關。

綜上所述，產前診斷指征與胎兒染色體異常密切相關，臨床應結合孕婦自身情況，制訂合理的篩查與診斷方案，提高異常檢出率，減少出生缺陷發生。