溫陽通絡(luò)方聯(lián)合加巴噴丁對糖尿病周圍神經(jīng)病變患者超敏C 反應(yīng)蛋白水平和PKC 活性影響

金斌斌 張炳才

溫州市中醫(yī)院內(nèi)分泌科，浙江溫州 325000

糖尿病屬于一種慢性代謝性疾病，由于胰島素分泌不足，發(fā)生胰島素抵抗，從而出現(xiàn)血糖水平升高。2 型糖尿病臨床癥狀表現(xiàn)為多食、消瘦、體重減輕等，對患者日常生活、身體健康造成一定威脅。在糖尿病發(fā)病過程中會出現(xiàn)不同程度的并發(fā)癥，其中糖尿病周圍神經(jīng)病變（diabetic peripheral neuropathy，DPN）是較為常見的慢性并發(fā)癥之一。DPN 是指在已排除其他導(dǎo)致周圍神經(jīng)病變原因的情況下，糖尿病患者出現(xiàn)與周圍神經(jīng)功能障礙相關(guān)的臨床癥狀[1]。臨床患者多表現(xiàn)為對稱性疼痛及感覺異常，遠(yuǎn)端對稱性多發(fā)神經(jīng)病變最為常見。加巴噴丁屬于一種新型抗驚厥藥物，能夠?qū)ι窠?jīng)系統(tǒng)通道進(jìn)行抑制，阻止機(jī)體疼痛因子的傳導(dǎo)，從而緩解疼痛，但患者在服用后會出現(xiàn)小程度的不良反應(yīng)[2]。傳統(tǒng)中醫(yī)理論認(rèn)為DPN 屬于“麻木”“血痹”“絡(luò)病”等范疇，溫陽通絡(luò)方為純中藥湯劑，具有活血化瘀、祛風(fēng)除濕的功效[3]。因此，本研究針對DPN 患者使用溫陽通絡(luò)方聯(lián)合加巴噴丁治療開展研究，分析聯(lián)合治療療法對患者超敏C 反應(yīng)蛋白（hspersensitive C reactive protein，hs-CRP）水平及對蛋白激酶C（protein kinase C，PKC）活性影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019 年5 月至2020 年5 月溫州市中醫(yī)院收治的DPN 患者60 例，采用隨機(jī)數(shù)字表法將其分為單藥組與聯(lián)合組，每組30 例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合關(guān)于DPN 的診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]；②無精神障礙，能積極治療；③臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①臨床資料不完整；②合并有其他肝腎等主要器官病癥；③研究期間使用其他藥物進(jìn)行治療；④對研究藥物過敏。兩組一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性，見表1。本研究經(jīng)溫州市中醫(yī)院倫理委員會審批通過（倫理學(xué)審批號：WTCM-KT-2021037），所有患者及家屬均知情并簽署知情同意書。

表1 兩組患者一般資料比較

1.2 方法

兩組均采用常規(guī)治療，包括降血糖、控制飲食、適當(dāng)運(yùn)動，并給予硫辛酸膠囊(生產(chǎn)單位：蓬萊諾康藥業(yè)有限公司，批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字H20133253，規(guī)格：0.3g）口服，0.2g/次，3 次/d，均于飯前服用。單藥組在常規(guī)治療基礎(chǔ)上使用加巴噴丁（生產(chǎn)單位：江蘇恩華藥業(yè)股份有限公司，批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字H20040527，規(guī)格：0.1g）口服，0.1g/次，3 次/d[5]。聯(lián)合組在對照組基礎(chǔ)上加用溫陽通絡(luò)方進(jìn)行治療。方劑組成：黃芪、仙茅、仙靈脾、地龍、川芎、鬼箭羽、延胡索、桂枝各10g，水蛭3g，雞血藤15g。以上藥物由溫州市中醫(yī)院進(jìn)行統(tǒng)一煎制，每劑藥加水500ml，文火煎40min，濃煎后取藥汁200ml，1 劑/d，早、晚2 次分服[6]，加巴噴丁服用劑量同對照組。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 空腹血糖（fasting blood glucose，F(xiàn)BG）、糖化血紅蛋白（glycosylated hemoglobin，HbA1c）水平檢測 抽取兩組患者治療前、治療后清晨空腹靜脈血7ml，經(jīng)3000 轉(zhuǎn)/min 離心15min 后取上清液，置于-70℃低溫中備用。通過葡萄糖氧化酶法檢測FBG、HbA1c 水平，將采集的患者血清置于無菌試管中，待血清凝固后進(jìn)行分離、檢驗，記錄FBG、HbA1c 水平。

1.3.2 中醫(yī)證候評分 參照《糖尿病周圍神經(jīng)病變中醫(yī)臨床診療指南》[4]，主癥：①肢末刺痛；②肢軟無力；③手足麻木；次癥：①氣短乏力；②自汗畏風(fēng)；③腰膝酸軟。按照嚴(yán)重程度進(jìn)行評分，將每種中醫(yī)證分，分別為0、2、4、6 分，其中0 分為正常；2 分為輕度；4 分為中度；6 分為重癥。次癥總分為3 分，分別為0、1、2、3 分。其中0 分為正常；1分為輕度；2 分為中度；3 分為重癥。分值越高表示病情程度越嚴(yán)重。

1.3.3 神經(jīng)傳導(dǎo)速度檢測 采用美國生產(chǎn)的Keypoint-4 神經(jīng)生理檢測儀對患者感覺神經(jīng)傳導(dǎo)速度（sensory nerve conduction velocity，SNCV）進(jìn)行測試。患者前1 天清洗四肢，取平臥位后用細(xì)砂紙打磨，保持室溫在21℃～25℃。

1.3.4 血清腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、血清一氧化氮（serum nitric oxide,NO）檢測 采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測TNF-α、NO 水平，試劑盒由北京信生元生物醫(yī)學(xué)科技有限公司提供。按照試劑盒指南分別設(shè)置7 個標(biāo)準(zhǔn)孔，待測樣品孔為6個，空白對照孔1 個，分別向標(biāo)準(zhǔn)孔每孔加入100μl待測血清樣品，空白孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100μl，然后用酶標(biāo)板覆蓋膜進(jìn)行覆蓋，在室溫中孵育2h；向所有孔中加入稀釋液400μl，浸泡3min 后廢棄；洗滌各個孔，清洗完成后將孔內(nèi)廢棄液體甩干，加樣后使用酶標(biāo)板覆蓋膜進(jìn)行覆蓋；在避光環(huán)境中向每孔中迅速加入200μl 底物，在避光室內(nèi)孵育30min，顯色后加入終止液50μl，輕晃酶標(biāo)板使孔內(nèi)溶液得到充分混合，同時確保所有孔內(nèi)沒有液體溢出，讀取450nm 波長吸光度，記錄TNF-α、NO 水平。

1.3.5 PKC、hs-CRP 檢測 采用免疫透射比濁法進(jìn)行檢測。稀釋血清標(biāo)本，取3 支潔凈試管依次標(biāo)記為對照、標(biāo)準(zhǔn)、檢測管，均添加350μl 緩沖液，之后分別添加20μl 蒸餾水、標(biāo)準(zhǔn)液、血清標(biāo)本，震蕩均勻后，于37℃保溫箱保存15min 后取出比色，340nm、700nm 波長處測定免疫復(fù)合物濁度，根據(jù)吸光度計算PKC 活性和hs-CRP 水平。

1.3.6 總有效率 ①顯效：中醫(yī)證候評分下降70%以上，血糖水平、神經(jīng)傳導(dǎo)功能均得到顯著改善，其余相關(guān)指標(biāo)水平也均趨于正常值。②有效：中醫(yī)證候評分下降30%～70%，血糖水平、神經(jīng)傳導(dǎo)功能均得到一定程度改善，臨床相關(guān)指標(biāo)水平也均得到一定程度改善。③無效：患者整體癥狀未得到恢復(fù)，中醫(yī)證候評分下降30%以下，相關(guān)指標(biāo)水平均未得到任何改善。總有效率=（顯效+有效）例數(shù)/總例數(shù)×100%[8]。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 19.0 統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理分析，符合正態(tài)分布的計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，Levene 法進(jìn)行方差齊性檢驗，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗，組內(nèi)比較采用配對t檢驗；計數(shù)資料采用例數(shù)（百分比）[n（%）]表示，組間比較采用χ2檢驗，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血糖指標(biāo)比較

治療前，兩組血糖指標(biāo)比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。治療后，聯(lián)合組的FBG、HbA1c 水平低于單藥組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 兩組患者治療前后血糖指標(biāo)比較（）

表2 兩組患者治療前后血糖指標(biāo)比較（）

2.2 中醫(yī)證候評分比較

治療前，兩組的主癥、次癥評分比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。治療后，聯(lián)合組的中醫(yī)證候評分值均低于單藥組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表3。

表3 兩組患者治療前后中醫(yī)證候評分比較（，分）

表3 兩組患者治療前后中醫(yī)證候評分比較（，分）

2.3 SNCV 比較

治療前，兩組的SNCV 比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。治療后，聯(lián)合組的SNCV 高于單藥組，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見表4。

表4 兩組患者治療前后SNCV 比較（，m/s）

表4 兩組患者治療前后SNCV 比較（，m/s）

2.4 TNF-α、NO 水平比較

治療前，兩組的TNF-α、NO 比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。治療后，聯(lián)合組TNF-α 低于單藥組，NO 高于單藥組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表5。

表5 兩組患者治療前后TNF-α、NO 比較（ ）

表5 兩組患者治療前后TNF-α、NO 比較（ ）

2.5 PKC、hs-CRP 水平比較

治療前，兩組患者PKC、hs-CRP 水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。治療后，聯(lián)合組PKC、hs-CRP 水平低于單藥組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表6。

表6 兩組患者治療前后PKC、hs-CRP 水平比較（ ）

表6 兩組患者治療前后PKC、hs-CRP 水平比較（ ）

2.6 治療總有效率比較

聯(lián)合組患者治療總有效率高于單藥組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=4.32，P=0.037）。見表7。

表7 兩組患者治療總有效率比較[n（%）]

3 討論

中醫(yī)理論中，DPN 歸屬于“麻木”“血痹”“絡(luò)病”等范疇，該病是由消渴病發(fā)展而來，在中醫(yī)中表現(xiàn)為腎陽衰微、氣虛血瘀，痰瘀即成，相互膠著，阻于經(jīng)絡(luò)，瘀血久滯，造成血堵于體內(nèi)[9,10]。溫陽通絡(luò)方由黃芪、仙茅、仙靈脾、地龍、川芎、鬼箭羽、延胡索、桂枝、水蛭、雞血藤等中草藥組成，其中黃芪、仙靈脾為君藥，可以補(bǔ)氣溫陽，防治痰淤；仙茅、地龍、川芎、桂枝四味藥為臣藥，可以通脈絡(luò)，達(dá)陽氣；鬼箭羽、延胡索、水蛭、雞血藤等中草藥為佐藥，可以祛除血脈淤滯[11]。加巴噴丁在臨床中屬于抗癲癇的藥物，能夠?qū)颊咦陨硭a(chǎn)生的疼痛感進(jìn)行緩解，通過調(diào)節(jié)神經(jīng)上的蛋白偶聯(lián)發(fā)揮作用[12]。

FBG、HbA1c 為檢測血糖水平的常用指標(biāo)，能夠?qū)ρ撬绞欠裉幱谡顟B(tài)進(jìn)行反應(yīng)[13]。相關(guān)研究證實，DPN 患者的空腹血糖及相關(guān)指標(biāo)水平均處于異常狀態(tài)，病情嚴(yán)重程度會隨著相關(guān)指標(biāo)的變化而變化[14]。本研究結(jié)果顯示，DPN 患者的FBG、HbA1c 水平異常升高，這一結(jié)果與上述相關(guān)研究結(jié)果一致。采用本研究聯(lián)合方案進(jìn)行治療，能夠顯著降低患者空腹血糖水平，改善臨床癥狀。

TNF-α 屬于炎癥因子，在疾病發(fā)展過程中能夠與其他相關(guān)炎癥因子之間相互作用，以此導(dǎo)致患者病情進(jìn)一步發(fā)展[15,16]。NO 在機(jī)體內(nèi)以分子形態(tài)存在，當(dāng)機(jī)體內(nèi)NO 水平驟降造成血管出現(xiàn)異常且強(qiáng)烈的收縮，可導(dǎo)致機(jī)體冠狀動脈血流量異常偏低[17,18]。本研究結(jié)果顯示，采用該聯(lián)合方案對DPN 患者進(jìn)行治療，能夠降低TNF-α，升高NO 水平，從而顯著改善患者臨床癥狀。

PKC 存在于機(jī)體內(nèi)多器官、組織及細(xì)胞內(nèi)，需要依靠磷脂以及鈣離子的加持[19]。hs-CRP 是一種炎癥因子，能夠體現(xiàn)出機(jī)體內(nèi)的炎癥情況[20]。相關(guān)研究證實，DPN 患者的PKC、hs-CRP 水平均為異常升高狀態(tài)，并且與疾病的進(jìn)一步發(fā)展呈正相關(guān)性。本研究中，治療前兩組患者的PKC、hs-CRP 水平均異常升高，這一結(jié)果與上述相關(guān)研究結(jié)果一致，而采用本研究聯(lián)合方案進(jìn)行治療，能夠降低PKC、hs-CRP水平，減輕機(jī)體炎癥，抑制疾病的進(jìn)一步發(fā)展。

綜上所述，經(jīng)溫陽通絡(luò)方、加巴噴丁聯(lián)合治療后，DPN 患者的血糖水平得到顯著降低，SNCV 得到進(jìn)一步改善，機(jī)體炎癥也得到顯著減輕，臨床應(yīng)用價值較高。但因樣本量較少，數(shù)據(jù)統(tǒng)計時可能存在一定的偏倚，存在一定的局限性，因此后續(xù)還需以多樣本研究為中心繼續(xù)對其進(jìn)行分析。