飼料中添加抗菌肽對(duì)肉牛免疫機(jī)能的影響

摘要：本試驗(yàn)以肉牛犢牛為研究對(duì)象，探究其基礎(chǔ)飼料中添加不同水平的抗菌肽對(duì)其機(jī)體免疫功能的影響。試驗(yàn)選擇40頭健康、無病、體重相近、體況良好的肉牛，按照單因子隨機(jī)試驗(yàn)原則，將其均分為4個(gè)處理組，每組10頭肉牛。對(duì)照組肉牛飼喂基礎(chǔ)飼料，試驗(yàn)1組肉牛飼喂含有l(wèi)g/d的抗菌肽的基礎(chǔ)飼料，試驗(yàn)2組肉牛飼喂含有2g/d的抗菌肽的基礎(chǔ)飼料，試驗(yàn)3組肉牛飼喂含有4g/d的抗菌肽的基礎(chǔ)飼料。試驗(yàn)周期分為預(yù)試驗(yàn)7d和正式試驗(yàn)期60d。試驗(yàn)結(jié)束，采集肉牛的血液檢測(cè)血清中的免疫球蛋白和細(xì)胞因子的含量。結(jié)果顯示，試驗(yàn)2組和試驗(yàn)3組肉牛血清中的免疫球蛋白A含量顯著高于對(duì)照組（Plt;0.05），免疫球蛋白G含量顯著高于對(duì)照組和試驗(yàn)1組（Plt;0.05）．白細(xì)胞介素一6含量顯著低于對(duì)照組（Plt;0.05），白細(xì)胞介素-10含量顯著高于對(duì)照組（Plt;0.05），腫瘤壞死因子-a含量顯著低于對(duì)照組（Plt;0.05）。研究表明，在肉牛生產(chǎn)中使用2和4g/d的抗菌肽顯著增強(qiáng)了肉牛機(jī)體的體液免疫和細(xì)胞免疫功能，綜合各項(xiàng)指標(biāo)數(shù)據(jù)及養(yǎng)殖成本考慮，抗菌肽在肉牛養(yǎng)殖生產(chǎn)中的最適添加量為2g/d。

關(guān)鍵詞：抗菌肽：肉牛：免疫功能

隨著飼料端禁抗政策的實(shí)施，抗生素退出飼料添加劑的舞臺(tái)，大量替抗產(chǎn)品被廣泛研究。其中，抗菌肽也成為科研人員關(guān)注的熱點(diǎn)和重點(diǎn)方向。抗菌肽是一種疏水性小分子的多肽[1]，分子量約為4～10ku[2]。抗菌肽對(duì)細(xì)菌、真菌、病毒、寄生蟲均具有較好的抑制作用，抗菌譜較廣[3]?？咕某司哂休^好的抑菌作用外，還具有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力的作用[4]。目前，抗菌肽在畜禽、水生生物養(yǎng)殖生產(chǎn)中均具有很好的應(yīng)用效果，可以替代抗生素的使用，可以提高動(dòng)物的生長(zhǎng)性能，增強(qiáng)機(jī)體免疫力，提高抗氧化能力等[6-7]?？咕脑趧?dòng)物生產(chǎn)中的應(yīng)用研究主要集中在生豬、家禽、水產(chǎn)等方面[8-10]。對(duì)于抗菌肽在反芻動(dòng)物養(yǎng)殖生產(chǎn)中的應(yīng)用研究結(jié)果較少。因此，本研究以肉牛犢牛為受試對(duì)象，探究其基礎(chǔ)飼料中添加不同水平的抗菌肽，對(duì)其機(jī)體免疫球蛋白及細(xì)胞因子含量的影響，確定抗菌肽在肉牛養(yǎng)殖生產(chǎn)中的最適添加量，為抗菌肽在肉牛生產(chǎn)中的高效、合理應(yīng)用提供理論數(shù)據(jù)參考。

1 試驗(yàn)材料和試驗(yàn)方法

1.1試驗(yàn)抗菌肽

本研究使用的抗菌肽由四川某工程有限公司提供，其主要成分為豬防御素。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)選擇40頭健康、無病、體重相近、體況良好的肉牛，按照單因子隨機(jī)試驗(yàn)原則，將其均分為4個(gè)處理組，每組10頭肉牛。對(duì)照組肉牛飼喂基礎(chǔ)飼料，試驗(yàn)1組肉牛飼喂含有1g/d的抗菌肽的基礎(chǔ)飼料，試驗(yàn)2組肉牛飼喂含有2g/d的抗菌肽的基礎(chǔ)飼料，試驗(yàn)3組肉牛飼喂含有4g/d的抗菌肽的基礎(chǔ)飼料。試驗(yàn)周期分為預(yù)試驗(yàn)7d和正式試驗(yàn)期60d。試驗(yàn)結(jié)束，采集肉牛的血液檢測(cè)血清中的免疫球蛋白和細(xì)胞因子的含量。試驗(yàn)設(shè)計(jì)如下表1所示。

1.3 試驗(yàn)飼料

試驗(yàn)肉牛的基礎(chǔ)飼料參考肉牛飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)配制，其原料組成和營(yíng)養(yǎng)成分含量如下表2所示。

1.4 日常飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)開始前，對(duì)試驗(yàn)肉牛統(tǒng)一驅(qū)蟲，免疫程序按照養(yǎng)殖場(chǎng)日常管理進(jìn)行。試驗(yàn)期間保證牛舍的環(huán)境衛(wèi)生。試驗(yàn)肉牛自由采食和飲水。

1.5 檢測(cè)項(xiàng)目

試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天，試驗(yàn)牛晨飼前，采集各組肉牛的血液約10mL，經(jīng)離心機(jī)離心后收集血清樣品，用于檢測(cè)各組肉牛血清中的免疫球蛋白和細(xì)胞因子含量，試驗(yàn)方法按照試劑盒說明操作，試劑盒由南京建成生物工程研究所生產(chǎn)。

1.6 數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)免疫指標(biāo)數(shù)據(jù)由SPSS26統(tǒng)計(jì)分析，采用單因子方差方法分析顯著性，LSD方法組間多重分析，Plt;0. 05表示此組數(shù)據(jù)具有顯著性差異。

2 試驗(yàn)結(jié)果

不同水平的抗菌肽對(duì)肉牛機(jī)體免疫功能的影響如下表3所示。由表3可見，在肉牛養(yǎng)殖生產(chǎn)中使用不同水平的抗菌肽對(duì)其機(jī)體免疫指標(biāo)產(chǎn)生了顯著性影響。其中，試驗(yàn)2組和試驗(yàn)3組肉牛血清中的免疫球蛋白A含量顯著高于對(duì)照組（Plt;0.05），免疫球蛋白G含量顯著高于對(duì)照組和試驗(yàn)1組（Plt;0.05），白細(xì)胞介素-6含量顯著低于對(duì)照組（Plt;0.05），白細(xì)胞介素-10含量顯著高于對(duì)照組（Plt;0.05），腫瘤壞死因子-a含量顯著低于對(duì)照組（Plt;0.05）。研究表明，在肉牛生產(chǎn)中使用2和4g/d的抗菌肽顯著增強(qiáng)了肉牛機(jī)體的體液免疫和細(xì)胞免疫功能。

3 討論與分析

機(jī)體內(nèi)的免疫球蛋白和細(xì)胞因子在動(dòng)物體液免疫和細(xì)胞免疫方面發(fā)揮著重要的作用。本研究中，使用2和4g/d的抗菌肽顯著提高了免疫球蛋白A和免疫球蛋白G含量，顯著降低了促炎因子白細(xì)胞介素-6和腫瘤壞死因子-a含量，顯著提高了抗炎因子白細(xì)胞介素-10含量，表明2g/d的抗菌肽就可以有效提高肉牛機(jī)體的免疫功能。楊顏銥等[11]在黑山羊生產(chǎn)中，在其基礎(chǔ)日糧中添加3g/d的抗菌肽可以顯著提高黑山羊血清中的免疫球蛋白（A、G、M）含量、細(xì)胞因子含量（IL-2、IL-6、l L-10、IL-12、IFN-Y、TNF-a）及補(bǔ)體C3和補(bǔ)體C4含量?？紫橛闧12]在麻羊養(yǎng)殖生產(chǎn)中，使用2g/d的抗菌肽可以顯著提高麻羊血清中免疫球蛋白A和免疫球蛋白M含量，對(duì)免疫球蛋白G和細(xì)胞因子含量具有改善作用，但未達(dá)到顯著水平。以上研究結(jié)果表明，適量的抗菌肽可以顯著提高反芻動(dòng)物機(jī)體的免疫力，可能是因?yàn)榭咕木哂休^強(qiáng)的抗菌、抑菌功能，增強(qiáng)了機(jī)體對(duì)外界病原微生物的抵抗力，進(jìn)而提高機(jī)體的免疫功能，促進(jìn)機(jī)體健康。

4 結(jié)論

本研究結(jié)果表明，在肉牛生產(chǎn)中使用2和4g/d的抗菌肽顯著提高了免疫球蛋白A和免疫球蛋白G含量，顯著降低了促炎因子白細(xì)胞介素-6和腫瘤壞死因子-a含量，顯著提高了抗炎因子白細(xì)胞介素-10含量，增強(qiáng)了肉牛機(jī)體的體液免疫和細(xì)胞免疫功能；綜合各項(xiàng)指標(biāo)數(shù)據(jù)及養(yǎng)殖成本考慮，抗菌肽在肉牛養(yǎng)殖生產(chǎn)中的最適添加量為2g/d。

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