高寒牧區蕨麻豬豬瘟、口蹄疫免疫抗體消漲規律研究

摘要：本試驗隨機篩選出60頭O型口蹄疫和豬瘟為陰性的45日齡蕨麻仔豬為試驗動物，隨機分成A、B、C3組，每組20頭豬，使用豬口蹄疫O型合成肽疫苗和豬瘟兩種疫苗同步兩點注射，并采用仔豬45日齡首免，首免后第155d進行第二次補免的免疫程序，在免疫后21、50、80、110、145和180d進行免疫抗體跟蹤監測，探索蕨麻豬口蹄疫O型合成肽疫苗和豬瘟免疫后免疫抗體的消長規律。結果表明：A、B、C組的群體保護率都較高，未見免疫副反應，效果較好。

關鍵詞：蕨麻豬：豬瘟疫苗：口蹄疫疫苗：同步分點免疫：抗體消漲

蕨麻豬生長在海拔2. 500m以上的高寒牧區，由于其終年采食草原植物“蕨麻”而得名。當地居民習慣稱之為“蕨麻豬”[1]。豬瘟是由豬瘟病毒引起的一種以高熱、出血等為特征的烈性、高度接觸性傳染病。該病是嚴重危害我國乃至全球養豬業的重大疫病之一，給養豬業造成很大的經濟損失，我國將其列為一類動物疫病[2-4]。目前甘肅省主要采取以免疫為主的綜合防控策略，養豬業也十分重視該病的免疫。但近年來由于非典型豬瘟、溫和性豬瘟造成的持續隱性感染，以及免疫程序不合理等因素的影響常常導致豬瘟疫苗免疫失敗，給養豬場帶來極大的風險[5]。豬0型口蹄疫是由0型口蹄疫病毒引起的豬的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病，該病傳播迅速，發病率高，我國將其列為一類動物疫病[6-8]。使用豬0型口蹄疫疫苗免疫接種是我國預防本病的重要措施[9]。為科學制定豬0型口蹄疫的免疫程序，合理使用豬口蹄疫0型滅活疫苗和合成肽疫苗。有效控制豬瘟在甘南州的發生與流行，確保豬瘟疫苗免疫效果，2019年10月至2021年6月“非洲豬瘟形勢下農牧村散養生豬程序化免疫新模式新技術研究與推廣應用”項目課題組，開展了蕨麻豬豬瘟、口蹄疫兩種疫苗同步分點注射后的抗體消漲規律研究，旨在探索一套合理的免疫程序，以指導全州蕨麻豬豬瘟和口蹄疫的防控工作。

1 材料與方法

1.1 材料

1）試驗動物：選擇合作勒秀鄉、迭部縣旺藏鄉、卓尼縣扎古錄鎮三鄉鎮的12戶5頭以上的合作蕨麻豬養殖戶家中，選擇散養的45日齡的斷奶蕨麻豬仔豬各20頭，選擇的試驗仔豬胎次、飼養狀況、環境條件相近，共計60頭。

2）接種疫苗：豬瘟活疫苗（細胞源）批號為（2021013）購自哈爾濱維科生物技術有限公司，豬口蹄疫0型合成肽疫苗批號為（20170710）購自申聯生物醫藥（上海）股份有限公司。

3）試驗試劑：豬瘟病毒間接ELISA抗體檢測試劑盒（批號：20200221，規格192孔／盒），購自青島立見診斷技術發展中心；口蹄疫0型抗體液相阻斷ELISA檢測試劑盒（批號：20200615，規格200孔／盒），購自蘭州獸醫研究所生物科技有限公司。

4）試驗儀器：酶標儀ONM-9606），北京普朗公司；自動洗板機（DNX-96），北京普朗公司；超純水儀（WP-UP-YJ-20），四川優普超純科技有限公司；超聲波清洗器（SB25-12DT），寧波新芝生物科技股份有限公司；臺式高速冷凍離心機（3H24RI），湖南湘儀；超低溫冰箱（DW-861338J），青島海爾醫療有限公司；自動高壓滅菌器（IDZM-80KCS-III），上海申安醫療器械廠；恒溫水浴鍋（HH-S8），常州國宇儀器制造有限公司。

1.2 方法

1）免疫注射方法：選取45日齡斷奶仔豬60頭，分為A、B、C共3組，頸部右側肌肉注射豬瘟活疫苗（細胞源）1mL，同時同步在左側耳根后肌肉注射口蹄疫0型滅活苗1mL進行試驗。

2）免疫副反應觀察：免疫接種的試驗豬在注射疫苗后的1～3d內，觀察并記錄每頭豬的免疫副反應情況，檢查豬只精神、食欲、行為、體溫等臨床特征。

3）免疫抗體檢測：試驗豬注射疫苗后21、50、80、110、145和180d分別測定豬瘟、0型口蹄疫兩種疫苗的免疫抗體水平，按照中國農科院蘭州獸醫研究所改進型口蹄疫病毒0型抗體液相阻斷ELISA檢測試劑盒使用說明以及豬瘟病毒ELISA抗體檢測試劑盒使用說明進行操作及判斷結果，觀察其抗體消漲規律。

2 結果與分析

2.1 疫苗副反應調查結果

結果見表1，試驗組60頭中共有10頭蕨麻豬出現了不同程度的免疫副反應，表現為體溫升高、精神沉郁、食欲不振和腹瀉，10頭豬均在72h內自愈，表現為一般副反應，呈一過性。

2.2 0型口蹄疫抗體消長動態測定結果 結果見表2，3個試驗組在免疫豬口蹄疫0型合成肽疫苗后產生抗體，從2ld開始監測一直持續到180d，其中50～145d群體保護率一直維持在較高水平，均達到農業農村部規定的70%以上的標準，110d開始有所下降，在試驗中使用了疫苗使用說明書推薦劑量免疫，可以獲得較好的保護力。

2.3 豬瘟抗體消長動態測定結果

結果見表3，3個試驗組在免疫豬瘟活疫苗（細胞源）后產生豬瘟抗體，從21d開始監測一直到180d，一直維持在較高水平，由此推斷“同步分點注射”口蹄疫和豬瘟2種疫苗，豬瘟抗體效價不會受到影響。

3 討論與小結

3.1 兩種疫苗同步分點接種副反應較小

同步分點接種豬瘟疫苗、豬口蹄疫0型合成肽疫苗72h內，試驗組出現免疫副反應的頭數是：A組7頭、B組5頭、C組4頭，分別占免疫數的35%、25%和10%，均未出現嚴重免疫副反應和死亡副反應，而且基本上呈一過性反應，這說明蕨麻豬本身的抵抗力強，疫苗副反應小，在臨床上可以進行“同步分點”免疫注射方法。

3.2 同步分點免疫豬瘟和口蹄疫兩種疫苗，試驗組均得到了很好的免疫保護

首免刺激的免疫應答迅速有效，但抗體效價和群體保護率隨著時間的延長有所降低。豬瘟疫苗在免疫后各個檢測階段均在要求的保護率以上，在免疫后110d（豬已經達到155日齡左右）其抗體水平依然維持較高水平，保護率達到100%，效果顯著。口蹄疫的抗體水平在免疫后50d達到峰值，125日齡左右保護率達到100%。運用“同步分點”這種新的免疫方法，安全有效，免疫副反應小，可以有效地保證和提高口蹄疫、豬瘟的免疫抗體水平和質量。這種新的免疫程序進行免疫可以減少防疫人員工作量，同時能降低反復抓豬而造成的應激反應。

鑒于口蹄疫免疫1次其抗體水平產生有限。建議在運用此方法的同時，對口蹄疫在155日齡左右再實施1次強化免疫，以保證口蹄疫的免疫效果。通過蕨麻豬口蹄疫0型合成肽疫苗免疫抗體消漲變化的研究表明，豬口蹄疫0型合成肽疫苗免疫一次，即可確保高效價抗體維持至155d。豬口蹄疫0型合成肽疫苗具備免疫原性高，生物安全性好，免疫副反應小等優點，接種口蹄疫0型合成肽疫苗后豬群的群體保護率均較好，且抗體水平和群體保護率的時間較穩定，說明接種該疫苗效果好。在生產實踐中值得普及推廣。

3.3 通過對試驗數據進行分析，建議蕨麻豬免疫程序如下

仔豬45日齡首免0型口蹄疫疫苗，同步另一側注射豬瘟，在155日齡左右再實施1次0型口蹄疫和豬瘟強化免疫。此外，口蹄疫和豬瘟的防控還應該加強豬群的飼養與管理、疫苗的質量與操作等因素有關，只有這樣才能有效減少蕨麻豬口蹄疫和豬瘟的發生，從而提高農牧民的收入。

參考文獻：

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