噻霉酮防治雙孢蘑菇細菌性褐斑病藥效試驗初報*

王家才，郭 蓓，黃海洋，田雨婷

（1.商丘市農林科學院，河南 商丘 476000；2.河南省農業科學院，河南 鄭州 450000）

雙孢蘑菇（Agaricus bisporus）屬真菌界（Fungi）擔子菌門（Basidiomycotina）層菌綱（Hymenomycetes）傘菌目（Agaricales） 蘑菇科（Agaricaceae），又稱蘑菇、雙孢菇等，享有“植物肉”“素中之葷”等美譽。其營養豐富，肉質細嫩，是著名的高蛋白、低脂肪食物，廣受消費者喜愛。目前，雙孢蘑菇在世界上栽培區域最廣，生產規模最大，且產量最高，因此還被稱為“世界菇”[1]。自2000年以來，我國雙孢蘑菇生產進入人工栽培和工廠化栽培并行發展階段。截至2008年，我國人工栽培雙孢蘑菇的產量已經名列世界第一[2]。據中國食用菌協會統計，2019年我國雙孢蘑菇總產量近231萬噸，工廠化栽培產量為24.63萬噸，人工栽培仍是雙孢蘑菇生產的主力軍，約占總產量的89%[3]。但在人工栽培過程中，由于技術水平的參差不齊，時常會有各種病蟲害發生，其中細菌性褐斑病就是雙孢蘑菇生產中的重要病害之一。

細菌性褐斑病又叫托拉斯假單孢桿菌病、銹斑病、細菌性斑點病等，分布廣泛，發生普遍。引發雙孢蘑菇細菌性褐斑病的病原菌為托拉斯假單孢桿菌（Pseudomonas tolaasii Paine）。病原菌通過侵染子實體表面組織引起病癥，主要集中在菌蓋上；菌柄上也偶爾發生，表現為縱向凹斑；菌褶很少感染；菌肉會發生色變，但變色部分一般很淺，很少超過表面向內3 mm。發病初期，雙孢蘑菇的菌蓋表面出現暗褐色小斑點；后逐漸擴大成圓形病斑，呈淡褐色至深褐色，略凹陷，水浸狀；嚴重時，菌蓋上布滿大小不一的褐色斑點，有時斑點連成片狀，產生褐色粘液。菌蓋發病部位往往積水嚴重，當病斑干燥后，菌蓋易畸形、開裂[4]。關于雙孢蘑菇細菌性褐斑病的研究，主要在國外報道得比較多，包括病原菌的分離、鑒定、分類學相關的研究以及致病機制方面的研究，而國內報道較少。目前對于該病以物理防治為主，化學防治仍然比較困難，較為常用的化學制劑主要是農用鏈霉素、春日霉素、漂白粉液等，稍有不當便會造成巨大損失，且這些制劑在實際應用中效果并不理想[5]。

食用菌子實體生長周期短，病蟲害防治時要求選擇高效、低毒、綠色環保、特異性強的藥劑，防止對人體和食用菌本身造成傷害。噻霉酮（benziothiazolinone） 是一種新型、高效、低毒、低殘留的廣譜殺菌劑，目前已經廣泛應用于農作物細菌性侵染病害的防治中，如黃瓜霜霉病、梨黑星病、蘋果瘡痂病、柑橘炭疽病、葡萄黑痘病等[6]。因此，通過在雙孢蘑菇出菇間期向菇床表面噴施噻霉酮，以觀察其對雙孢蘑菇子實體細菌性褐斑病的防治效果。

試驗中主要采用了噻霉酮的懸乳劑和微乳劑2種藥劑類型。懸浮劑是將不溶于水的固體原藥與潤濕分散劑、粘度調節劑及其他助劑和水混合，經濕法研磨，在水中形成高度分散的、粘稠且可流動的懸濁液體劑型，其最大優點是對環境安全。微乳劑是由油溶性原藥、乳化劑和水組成的均相液體劑型，觀感透明，是近年來發展迅速的安全劑型[7]。通過試驗，以期為噻霉酮應用于人工栽培食用菌的細菌性病害防治提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗藥劑

5%噻霉酮懸浮劑和3%噻霉酮微乳劑，陜西西大華特公司。噻霉酮的有效成份分子式為C7H5SON，其原藥的物理性狀表現為微黃色粉末，比重為0.8，熔點為（158±1）℃，在溶劑為水、溫度為20℃的條件下，其溶解度為4 g·L-1。噻霉酮制劑的外觀為微黃色穩定均相液體，比重為1.02，pH為6～8。其系列產品為水乳劑，劑型先進、散熱性好、環保、不污染環境，是無公害農業生產的首選殺菌劑，對真菌性病害具有預防和治療作用。

1.2 試驗藥劑處理

設置4個不同噻霉酮有效成分量的處理，以噴施125 mL·m-2的清水作為空白對照。各處理的劑量詳見表1。

表1 供試藥劑處理Tab.1 Treatments of tested agents

如表1所示的各處理施藥劑量進行試驗，在雙孢蘑菇子實體發生前對菇床均勻噴霧。每組處理4次重復，每個小區面積為2 m2。

1.3 試驗對象與作物

試驗對象：雙孢蘑菇細菌性褐斑病，該病害為自然發生。

試驗作物：雙孢蘑菇，品種為W-192，播種方式為撒播。

1.4 試驗地點及環境條件

試驗地點：河南省商丘市農林科學院北地試驗田大棚 （115°43′8″E，34°32′21″N）。

環境條件：菇床土壤肥沃、平整；灌溉排水設施齊全，灌溉方式為噴灌。施藥時大棚溫度為20℃，相對濕度為60.7%。

1.5 施藥時間及方法

施藥時間：2020年4月1日，雙孢蘑菇出菇前進行施藥。

施藥方法：采用噴霧法進行施藥，電動噴霧器的用水量設置為1 250 L·hm-2。

1.6 調查方法

依據《農藥田間藥效試驗準則（第10部分）》[8]中關于殺菌劑防治蘑菇細菌性病害的要求，按照標準作業程序SOP（standard operating procedure） 及試驗委托方和承擔方簽定的試驗協議要求進行試驗。每個小區調查2 m2培養料上子實體受細菌性褐斑病感染的情況，記錄發病的子實體數量。

施藥12天后（2020年4月13日），進行藥劑防治效果調查1次。調查內容包括：藥物對雙孢蘑菇子實體的直接影響，觀察施藥區與對照區雙孢蘑菇的生長情況。

1.7 計算與分析方法

依據參考文獻[8]關于殺菌劑防治蘑菇細菌性病害的要求，以及本試驗機構相關SOP及試驗委托方和承擔方簽定的試驗協議要求進行。目測子實體菌蓋病斑面積占該子實體菌蓋面積的百分比值，以百分比值對感染細菌性褐斑病的雙孢蘑菇進行分級。各等級的劃分標準詳見表2。

表2 染病等級劃分標準Tab.2 Standard of infection grade

基于表2劃分的等級序數（j），雙孢蘑菇細菌性褐斑病病情指數（I，%）的計算公式為：

式中：j為等級序數；Nj為j等級下感染細菌性褐斑病的雙孢蘑菇子實體數量（個）；Mj為j等級子實體總數（個）。

噻霉酮防治率（E，%）的計算公式為：

式中：I0為空白對照區病情指數（%）；Ii為防治區病情指數（%）。

采用DPS軟件對試驗結果進行Duncan's新復極差法方差分析。

2 結果與分析

2.1 噻霉酮的防治效果

使用不同劑量5%噻霉酮懸浮劑和3%噻霉酮微乳劑處理后，對雙孢蘑菇細菌性褐斑病的防治效果見表3。

由表3可知，處理3（使用5%噻霉酮懸浮劑，有效成分用量為17.5 g·hm-2）對雙孢蘑菇細菌性褐斑病的防治效果最好，防治率為86.23%。其次是處理2（使用5%噻霉酮懸浮劑，有效成分的用量為12.5 g·hm-2）和處理4（使用3%噻霉酮微乳劑，有效成分用量為13.5 g·hm-2），防治率分別為75.76%和74.85%。上述3組處理的防治效果差異不顯著。處理1（使用5%噻霉酮懸浮劑，有效成分的用量為7.5 g·hm-2）的防治效果為65.07%，與處理3之間有顯著性差異（P<0.05）。

表3 噻霉酮不同處理對雙孢蘑菇細菌性褐斑病的防治效果Tab.3 Effects of different treatments with benziothiazolinone on control of bacterial brown spot of of Agaricus bisporus

2.2 噻霉酮對子實體的影響

與處理5（CK） 相比，處理1～處理4施藥區的雙孢菇子實體長勢良好，未出現畸形、纖細、瘦弱等現象；菌蓋大小無差別。施藥區的雙孢蘑菇菌蓋顏色潔白，菇形完整，外觀形態符合雙孢蘑菇W192品種的基本特征。因此，使用噻霉酮防治雙孢蘑菇細菌性褐斑病不會影響子實體生長及商品形態。

3 討論

雙孢蘑菇細菌性褐斑病的病原菌廣泛存在于自然界，在其人工栽培過程中，培養料、覆土、生產管理用水等，均可成為主要的初侵染源。研究發現，引起雙孢蘑菇細菌性褐斑病的假單孢桿菌常發生于高溫、高濕、通風不良的環境中，特別是在潮濕且有機質豐富的在栽培基質上可被大量檢測到[9]。因此，雙孢蘑菇細菌性褐斑病的防治仍應以物理防治為主，化學防治為輔。首先應加強人工栽培管理，嚴格把控菌種質量，重視培養料發酵滅菌、覆土材料消毒等環節操作規范，仔細完成菇棚場地的消毒清理。同時，在雙孢蘑菇的發菌期和出菇期嚴格保障溫度、濕度、氣體環境等條件。在管理到位、嚴格把關的基礎上，再使用化學防治手段控制病蟲害的發生。特別是在出菇關鍵時期，必須密切關注子實體的生長情況，適時噴施高效、低毒、無殘留的化學藥劑加以防治。

為了更加符合安全食品生產的要求，基于試驗結果并結合多方因素進行綜合分析，建議使用5%噻霉酮懸浮劑，于雙孢蘑菇出菇間期（轉潮期）向菇床噴霧以防治細菌性褐斑病的發生，推薦使用的噻霉酮有效成分用量為 12.5 g·hm-2～17.5 g·hm-2。