結直腸腺瘤合并Hp陽性者血清GAS、炎癥因子和腸道菌群分析

馮娟，王晶，陳安

1.西安鳳城醫院消化內科，陜西 西安 710018；2.空軍軍醫大學第二附屬醫院普通外科，陜西 西安 710038

結直腸腺瘤是指在結直腸表面向腸腔內突出的各類隆起性病變，屬于良性病變。結直腸腺瘤被公認為癌前病變，對于其發生發展過程及機制的研究是預防結直腸癌的重要途徑。近年來，多項研究顯示幽門螺桿菌(Hp)感染與結直腸腺瘤有較為密切的關系[1-2]。此外，相關研究指出腸道菌群與免疫反應參與了結直腸腫瘤的發生與發展[3-4]。因此，對Hp感染及炎癥因子水平和腸道菌群狀況進行分析，進而探討結直腸腺瘤發展成為結直腸癌的機制，成為臨床研究的重點[5]。本研究主要分析結直腸腺瘤合并Hp陽性者的血清胃泌素(GAS)、炎癥因子水平[白細胞介素-1(IL-1)、白細胞介素-6(IL-6)、白細胞介素-10(IL-10)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)]和腸道菌群的變化情況，現將結果報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇2019年6月至2021年12月西安鳳城醫院消化內科收治的125例結直腸腺瘤患者作為研究對象。納入標準：(1)臨床有完整的資料；(2)病理學診斷資料與檢測結果明確者；(3)通過胃鏡檢查確診為慢性胃炎者；(4)腫瘤部位在升結腸的高分化結腸癌Ⅱ期者；(5)手術前后均沒有使用過腸道微生態制劑與抗生素者；(6)無嚴重疾病者。排除標準：(1)年齡＜18歲者；(2)妊娠期或哺乳期的婦女；(3)存在自身免疫疾病者；(4)曾接受過Hp根除治療者；(5)克羅恩病癌變者；(6)近4周服用過H2受體拮抗劑等會對檢查結果產生影響者；(7)有胃腸道手術史者。按照是否伴有Hp感染分組，其中50例合并Hp陽性者納入研究組，75例未合并Hp陽性患者納入對照組。

1.2 檢測方法(1)Hp檢測：以14C尿素呼氣試驗結果為標準，其中結果為陽性時即為Hp感染。具體標準為：測量結果≥100 dpm/mmol為陽性，＜100 dpm/mmol為陰性。(2)各炎性細胞因子水平檢測：抽取患者5 mL外周靜脈血，不做抗凝處理，在3 h內在室溫下進行10 min的離心處理，收集血清，-80℃溫度設置下保存在冰箱中。采用ELISA法，以3 000 r/min的離心速度進行20 min，收集上清液，保存待測。選擇ELISA試劑盒進行操作，計算血清IL-6、IL-1、IL-10和TNF-α水平。(3)血清GAS水平檢測：CUSABIO的ELISA試劑盒檢測血清GAS水平。(4)糞便中菌群含量檢測：收集3～5 g糞便標本，保存在-80℃超低溫冰箱中。按照TIANampStool DNA Kit說明書通過Real-time PCR法檢測，提取菌株基因組DNA，結合乳酸桿菌、雙歧桿菌、大腸埃希菌基因序列對特異性PCR引物序列進行設定，通過Real-time PCR反應定量檢測乳酸桿菌等細菌水平。

1.3 統計學方法應用SPSS20.00統計軟件進行數據分析。計量資料以均數±標準差(±s)表示，組間比較采用t檢驗；計數資料比較采用χ2檢驗。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者的一般資料比較兩組患者的性別、體質量指數、糖尿病病史、年齡、飲酒率、高血壓病史、吸煙率等一般資料比較差異均無統計學意義(P＞0.05)，見表1。

表1 兩組患者的一般資料比較[±s，例(%)]

表1 兩組患者的一般資料比較[±s，例(%)]

組別研究組對照組χ2/t值P值例數50 75男/女21(42.00)/29(58.00)32(42.67)/43(57.33)0.301 0.614年齡(歲)60.12±13.75 59.64±14.15 0.625 0.243吸煙17(34.00)26(34.67)3.412 0.078飲酒15(30.00)23(30.67)3.605 0.056體質量指數(kg/m2)24.13±5.72 53.98±6.11 2.971 0.735高血壓22(44.00)30(40.00)3.537 0.068糖尿病12(24.00)15(20.00)3.659 0.061高血脂14(28.00)15(20.00)1.078 0.299結腸癌家族史9(18.00)8(10.67)1.373 0.241

2.2 兩組患者的血清GAS及炎性細胞因子水平比較研究組患者的血清IL-1、IL-6和TNF-α水平明顯低于對照組，GAS、IL-10水平明顯高于對照組，差異均有統計學有意義(P＜0.05)，見表2。

表2 兩組患者的血清GAS及各炎性細胞因子水平比較(±s)

表2 兩組患者的血清GAS及各炎性細胞因子水平比較(±s)

組別研究組對照組t值P值例數50 75 GAS(pg/mL)65.87±9.32 51.05±4.94-11.432 0.014 IL-1(ng/L)206.17±54.98 315.09±87.24-2.597 0.012 IL-6(ng/L)40.56±11.94 101.72±31.84-2.701 0.004 IL-10(ng/L)110.93±25.78 86.74±18.51-2.931 0.005 TNF-α(pg/mL)403.65±104.96 527.59±139.87-2.804 0.006

2.3 兩組患者的腸道菌群含量比較兩組患者糞便中大腸埃希菌、嗜酸乳桿菌含量比較差異均無統計學意義(P＞0.05)；研究組患者糞便中長雙歧桿菌的含量明顯高于對照組，差異均有統計學意義(P＜0.05)，見表3。

表3 兩組患者的腸道菌群含量比較(±s，個/100 g)

表3 兩組患者的腸道菌群含量比較(±s，個/100 g)

組別研究組對照組t值P值例數50 75嗜酸乳桿菌11.72±2.96 9.24±0.73-2.107 0.054大腸埃希菌9.31±2.59 10.42±1.02-0.174 0.865長雙歧桿菌11.67±1.16 10.43±0.54-2.075 0.037

3 討論

近年來，隨著人民生活方式的變化、微生物的傳播、飲食方式的改變，我國結直腸癌發病率呈現逐年上升趨勢[6]。目前，腺瘤學說在臨床上廣為流傳，有部分學者的研究發現結直腸腺瘤可能與結直腸癌的發生有較為密切的聯系[7-9]。因此，研究結直腸腺瘤發生、發展的危險因素，對結直腸癌的早期預防與治療具有重要意義。

相關研究表明，腺瘤患者的Hp感染率明顯高于健康者，HP感染會不同程度上對患者腺瘤的大小與數量產生影響[10-11]。HP感染的發病率在很大程度上提高了結直腸腺瘤的發生率[12-13]。相關研究表明，結直腸腫瘤與血清高GAS水平有關，感染HP后患者的血清GAS水平會出現不同程度的升高，從而對結直腸腺瘤的發生發展產生影響[14]。此外，研究還發現腸道微生物與免疫反應在結直腸腺瘤的發生與發展中扮演著至關重要的角色[15]。本次通過對研究對象血清中炎性細胞因子、糞便中的腸道菌群含量進行測量，結果發現結直腸腺瘤合并Hp陽性患者的IL-10、嗜酸乳桿菌、長雙歧桿菌水平明顯偏低，IL-1、IL-6、TNF-α和大腸埃希菌的水平明顯升高，差異均有統計學意義(P＜0.05)，與以往相關研究的結果一致。表明Hp感染對結直腸腺瘤患者長雙歧桿菌、嗜酸乳桿菌、大腸埃希菌等糞便中腸道菌群和血清中IL-1、IL-6、IL-10及TNF-α等炎性細胞因子影響明顯。但本研究病例較少，病例來源單一，仍存在一定的局限性。因此，后期可通過擴大檢測細胞因子、增加樣本量、提高菌群的種類進一步探討Hp感染對結直腸腺瘤患者腸道菌群含量以及炎性細胞因子水平的影響，以進一步研究Hp感染在結直腸腺瘤發病機制中的作用。

綜上所述，結直腸腺瘤合并Hp陽性的血清GAS水平升高，IL-10、嗜酸乳桿菌、長雙歧桿菌水平明顯降低，IL-1、IL-6、TNF-α和大腸埃希菌的水平明顯升高，可為結直腸癌的早期預防和治療提供指導。