原發(fā)性肝癌血清標志物的研究進展

朱旖清，張怡青

（東部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院秦淮醫(yī)療區(qū)檢驗科，江蘇 南京 210002）

原 發(fā) 性 肝 癌（primary liver cancer, PLC） 是 一種惡性程度極高的腫瘤，致死率居所有惡性腫瘤的第二位。PLC 中約85% 為肝細胞癌（hepatocellular caicinoma, HCC），少部分為肝內(nèi)膽管癌（intrahepatic cholangiocarcinoma, ICC）。每年全世界有超過60 萬人死于該疾病[1-2]。由于PLC 的發(fā)病隱匿而晚期患者往往缺乏有效的治療手段，預后較差，早發(fā)現(xiàn)和早診斷是提高患者生存率的關(guān)鍵[3]。由于PLC 易復發(fā)易轉(zhuǎn)移，患者的長期監(jiān)測和預后分析也顯得尤為重要。目前臨床上對PLC 的篩查主要通過影像學檢查和腫瘤標志物的檢測[4]，影像學檢查對儀器的敏感性和檢查醫(yī)師自身的經(jīng)驗判斷都有較高的要求，一方面很難發(fā)現(xiàn)直徑小于0.5 cm 的微小腫塊，另一方面對檢測出腫塊的鑒別診斷也比較困難。血清腫瘤標志物檢測具有無創(chuàng)、費用低廉等優(yōu)點，易于被患者接受，并且能早于影像學而顯示出異常表達，但目前特異性和敏感度還不夠，因此尋找特異敏感的PLC血清腫瘤標志物一直是近年來的研究熱點之一。本文分析和總結(jié)了三大類當前在應用和探索中的PLC 血清標志物，旨在為臨床工作中選用合適的檢測指標提供參考。

1 與PLC 相關(guān)的器官特異性較高的血清標志物

1.1 甲胎蛋白（Alphafetoprotein,AFP）及甲胎蛋白異質(zhì)體3（AFP-L3）

根據(jù)AFP 糖鏈結(jié)構(gòu)異質(zhì)性可將其分為三類：AFP-L1、AFP-L2、AFP-L3。其中AFP-L3 是巖藻糖基化型AFP，主要存在于PLC 患者血清中。有研究表明，AFP-L3 診斷PLC 的敏感度和特異性可達76% 和93%，特異性高, 對低濃度AFP 的患者具有顯著的診斷價值。當AFP-L3 百分比＞15% 時，可考慮診斷為肝癌。但也有研究發(fā)現(xiàn)，約有15% ～30% 的AFP 陽性肝癌患者的AFP-L3 百分比＜10%，可見AFP-L3 百分比低也不能排除肝癌的存在[5]。

1.2 異常凝血酶原（proteininducedbyvitaminKabsence-Ⅱ,PIVKA-Ⅱ）

PIVKA- Ⅱ在肝癌患者中會表現(xiàn)升高且具有較高的診斷特異性，目前已被《原發(fā)性肝癌診療規(guī)范（2017 年版）》推薦用于診斷PLC[6]。PIVKA- Ⅱ的升高與維生素K 的代謝異常密切相關(guān)，血清PIVKA- Ⅱ的水平不受肝炎活動的干擾，診斷敏感度和特異性可達到64.6% 和87.9%。

1.3 高爾基體跨膜糖蛋白73（golgiprotein73，GP73）

GP73 主要由膽管上皮細胞表達，肝細胞中表達很少或不表達，對肝癌的早期診斷有一定價值。GP73 在AFP 陰性的肝癌患者中也有一定的診斷敏感度，可與AFP 聯(lián)合使用提高肝癌檢出率[7]。

1.4 磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3

磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3（GPC-3）可結(jié)合肝素結(jié)合型蛋白如多種生長因子并調(diào)節(jié)其活性，影響多級生物效應，在細胞生長、增殖、分化、遷移及黏附方面發(fā)揮重要作用。GPC-3 在胎盤和胎肝中表達量較高，成人肝組織和良性肝病中幾乎不表達[8]。

1.5 α-L-巖藻糖苷酶（AFU）

AFU 大量存在于各實質(zhì)器官的溶酶體中，肝臟的含量最高，肝癌腫瘤細胞壞死后溶酶體內(nèi)的AFU 會被釋放出來，另外肝癌細胞在生長過程中也會刺激糖苷酶合成功能亢進和抑制清除糖苷酶的能力，因此會使血清AFU水平顯著升高[9]。

2 與PLC 相關(guān)的非特異性血清標志物

2.1 腫瘤特異性生長因子（tumorspecialgroupoffactor,TSGF）

TSGF 是一種可溶性的血管多肽內(nèi)皮生長因子，在腫瘤細胞和外周毛細血管持續(xù)生長時被釋放到外周血中，是一種廣譜腫瘤標記物。因其在腫瘤早期就會出現(xiàn)在血液中，其對腫瘤具有早期診斷價值。TSGF 增高在許多惡性腫瘤中均可出現(xiàn)，包括肝癌、肺癌、乳腺癌、胃癌等，目前臨床工作中不常將其作為診斷PLC 的重要指標，可以在聯(lián)合多指標檢測中使用[10]。

2.2 同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)

因為肝臟是同型半胱氨酸的主要合成和代謝器官，一旦肝臟遭到實質(zhì)性損害會直接引起Hcy 的代謝障礙，因此其在PLC 的輔助診斷方面具有一定的臨床價值。Hcy 可反映肝臟的受損情況，但其在慢性肝炎、肝硬化與肝癌中的不同表現(xiàn)目前文獻報道較少。Hcy 診斷PLC的特異性和敏感度分別為65%、32.6%，但是相關(guān)文獻數(shù)量和病人資料數(shù)均較少，還有待進一步的研究。Hcy在消化系統(tǒng)腫瘤、白血病和卵巢癌等中均有異常表達，在臨床使用該指標時需注意甄別。

2.3 癌胚抗原（Carcino-embryonicantigen,CEA）

CEA 對胃癌、肝癌、肺癌和結(jié)直腸癌等均有一定的診斷價值，屬于非器官特異性腫瘤相關(guān)抗原，CEA 在癌癥診斷中的敏感度與腫瘤是否侵犯淋巴結(jié)、腫瘤大小及是否轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[11]。

2.4 糖類抗原199

糖類抗原199(Carbohydrate antigen 199) 主要與消化道腫瘤和腺癌高度相關(guān)，廣泛用于膽管癌、結(jié)直腸癌和胰腺癌的診斷。血清CA199 水平與肝細胞再生水平高度相關(guān)。肝細胞的活性再生水平會增加細胞膜上的大分子糖肽和糖蛋白的量，而在PLC 細胞中，癌細胞出現(xiàn)增生活躍，因此血清CA199 顯著升高，并且遠高于慢性肝病患者和正常人。

2.5 血清鐵蛋白（SF）

SF 是一種可溶性蛋白質(zhì)，在人體內(nèi)的主要作用是儲存鐵。SF 異常升高也與肝臟疾病，尤其是PLC 密切相關(guān)。SF 含量增高的原因是一方面腫瘤細胞合成SF 增加，另一方面正常肝組織被破壞時釋放大量SF 入血。但有研究表明，許多惡性腫瘤如肺癌、胰腺癌等，腫瘤細胞均可以合成和分泌SF，SF 對肝癌的診斷并非是特異性的，因此常在AFP 陰性時作為一個補充指標使用，或是與其他肝癌血清指標聯(lián)合使用來提高特異性。還有一些非特異性指標如D- 二聚體、GGT、血管內(nèi)皮細胞生長因子、SCCA 等，均可應用在PLC 診斷的聯(lián)合指標中，對PLC 的輔助診斷具有一定的指導意義。

3 與PLC 相關(guān)的分子診斷腫瘤標志物

3.1 環(huán)狀RNA（circularRNA，circRNA）

circRNA 可以靶向多個miRNA 發(fā)揮作用，也可與特異性蛋白質(zhì)結(jié)合發(fā)揮調(diào)節(jié)細胞周期的功能，一些circRNA 還可以翻譯成蛋白質(zhì)產(chǎn)物[12]。目前circRNA 在肝癌中的作用機制尚不明確, 隨著circRNA 提取、檢測技術(shù)的成熟, 其有望成為早期診斷肝癌的標志和治療的新靶標。

3.2 微小RNA（MicroRNA，miRNA）

腫瘤環(huán)境下miRNA 起到類似抑癌基因或癌基因的作用，對腫瘤有抑制性的miRNA 有miR-26a、miR-11122、miR-184、miR-337 等， 致 腫 瘤 性 的miRNA有miR-115、miR-21、miR-234、miR-116、miR-146等[13]。由于miRNA 特異性強，在大小及豐度上都比較穩(wěn)定，其在PLC 的治療效果監(jiān)測和預后評估方面都有重要的應用價值。

3.3 長鏈非編碼RNA（lncRNA）

lncRNA 一般長度超過200 nt，不能編碼蛋白質(zhì)，但可以參與胞內(nèi)的遺傳變化、細胞周期調(diào)控、miRNA 調(diào)控、信號通路等多種生物進程。其過去曾被認為是基因轉(zhuǎn)錄過程中的“暗物質(zhì)”，但是隨著基因測序技術(shù)的發(fā)展，越來越多的證據(jù)表明lncRNA 在肝癌病程進展中起著重要作用。

4 結(jié)語

單一標記物在早期肝癌診斷中仍存在各種不足，多個血清標志物的聯(lián)合使用能有效彌補單一項目缺乏的特異性和敏感性。不過在臨床工作中腫瘤標志物聯(lián)合使用并不是越多越好，其目的在于最大限度提高敏感度和特異性，減少漏診，同時也要考慮過多的指標聯(lián)合使用會增加假陽性率、臨床醫(yī)務人員的工作量和患者的經(jīng)濟負擔。本文總結(jié)了目前較常用的PLC 血清標志物，期望對臨床診療工作起到一定的借鑒和指導意義。