Nod樣受體蛋白3、酪氨酸激酶B受體與顱腦腫瘤術后伴抑郁的關系

趙運杰

長垣市中醫醫院外二科，河南 新鄉 453400

顱腦腫瘤是發生在顱腔內的神經腫瘤，顱腦腫瘤發病率約在7～10/10萬，且多數為惡性腫瘤，可出現在任何年齡階段［1］。目前，針對顱腦腫瘤的治療方法主要以手術為主，但顱腦腫瘤患者術后多數會出現焦慮、緊張、恐懼的心理，嚴重影響患者的治療效果以及術后恢復效果，因此對于顱腦腫瘤患者術后的抑郁預測是較為重要的［2］。酪氨酸激酶B受體（tyrosine kinase receptor B，TrkB）可與血清腦源性神經營養因子相結合，從而發揮生物學功能，對神經元發揮保護的作用［3］。Nod樣受體蛋白3（NOD-like receptor protein 3，NLRP3）是具有特征性的炎性體，能夠在被激活后介導組織的炎性反應［4］。有研究［5］發現炎癥反應是抑郁癥生理學的潛在促進因子。因此，本研究選取長垣市中醫醫院收治的60例行顱腦腫瘤術患者的臨床資料進行分析，以研究NLRP3、TrkB與顱腦腫瘤術后伴抑郁的關系，報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性選取2018年10月—2020年10月長垣市中醫醫院收治的60例行顱腦腫瘤術患者作為研究對象。術后采用漢密爾頓抑郁量表（hamilton depression scale，HAMD）評分進行分組，總共17項，總分為35分，＜8分為正常，8～20分為可能存在抑郁癥，20～35分為確定存在抑郁癥，將得分＜8分的患者列入對照組（n=26），得分8～20分的患者列入抑郁組（n=34）。對照組26例，男12例，女14例；年齡24～71歲，平均年齡（50.21±5.98）歲；BMI指數18～22 kg/m2，平均BMI指數（20.23±1.04）kg/m2。抑郁組34例，男18例，女16例；年齡24～72歲，平均年齡（50.32±5.07）歲；BMI指數18～22 kg/m2，平均BMI指數（20.21±1.11）kg/m2。兩組患者性別、年齡、BMI指數等一般資料具有可比性（P＞0.05）。本研究經醫院醫學倫理委員會審批通過。（1）納入標準：患者于樣本醫院接受顱腦腫瘤手術，患者精神意志正常可接受HAMD量表評分，患者年齡＞18歲。（2）排除標準：既往存在抑郁癥，患者家族存在抑郁癥病史，患者資料不完整。

1.2 方法

血清NLRP3、TrkB檢測方法：抽取患者空腹靜脈全血2.5 mL，高速離心分層，放入肝素抗凝管內，采用3 000 r/min離心機進行離心，10 min后分離血清，取上清液，送至檢驗科。血清NLRP3選取杭州艾森生物科技有限公司的ACEA NovoCyte系列流式細胞儀進行檢測。在5 mL流式管內加入適量細胞懸液，將細胞懸液內加入固定劑，在室溫孵育15 min，采用3 mL PBS洗滌1次，離心1 200～1 500 rpm 5 min，舍棄上清，震蕩，重新懸浮細胞。向細胞懸浮液內加入破膜劑，加入20～50μL濃度為1：50的NLRP3I抗，加入Santa cruz公司的山羊抗兔FITC-II抗50μL，振蕩2 s在室溫內孵育20 min，采用3 mL PBS洗滌，離心1 200～1 500 rpm 5 min，舍棄上清，重懸于BPS內。隨后立即分析于0.5 mL的多聚甲醛固定液內，在2～8℃內避光儲存，在24 h內分析。血清TrkB選取上海酶聯生物科技有限公司的ELISA試劑盒進行檢測，首先將試劑搖勻，避免出現大量泡沫，根據待測樣品數量加入標準品的數量決定板條數，標本采用標本稀釋液1∶1稀釋后滴入50μL反應孔內，加入稀釋好的標準品50μL，隨后加入50μL生物素標記的抗體，蓋上模板，37℃下溫育1 h，甩去孔內液體，每個孔加滿洗滌液，震蕩30 s，將洗滌液甩清并用吸水紙拍干，重復三次操作。每孔加入80μL親和鏈酶素-HRP，輕輕晃蕩搖勻，在37℃內溫育30 min，甩去孔內液體，每個孔加滿洗滌液，震蕩30 s，將洗滌液甩清并用吸水紙拍干，重復三次操作，每孔加入底物A和B50μL，輕輕晃勻，在37℃內溫育10 min，取出酶標板，并加入50μL終止液，隨后在450 nm波長對各個孔的OD值進行測量。兩種指標均為住院期間所測平均值。

1.3 觀察指標

對比兩組患者血清NLRP3、TrkB水平；對血清NLRP3、TrkB與HAMD評分進行相關性分析，同時采用ROC曲線分析血清NLRP3、TrkB對顱腦腫瘤患者合并抑郁的預測價值。

1.4 統計學方法

采用SPSS 20.0軟件進行統計分析。計量資料以均數±標準差（±s）表示，組間比較采用t檢驗。計數資料以例數和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者血清NLRP3和TrkB水平情況

實驗組血清NLRP3顯著高于對照組，且實驗組的血清TrkB低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組患者血清NLRP3和TrkB水平情況（±s）

表1 兩組患者血清NLRP3和TrkB水平情況（±s）

組別實驗組（n=72）對照組（n=70）t值P值血清NLRP3（pg/mL）152.61±10.52 102.53±10.46 0.086 0.931血清TrkB（mg/mL）4.69±1.11 8.62±1.04 0.312 0.755

2.2 兩組患者HAMD評分情況

實驗組HAMD評分為（15.61±1.04）分，對照組的HAMD評分為（4.53±1.46）分，實驗組的評分高于對照組，差異有統計學意義（t=52.294，P＜0.05）。

2.3 血清NLRP3、TrkB與HAMD評分相關性分析

經過相關性分析得出：血清NLRP3與HAMD評分呈正相關（r=0.622，P＜0.001），血清TrkB與HAMD評分評分呈負相關（r=-0.587，P＜0.001）。

2.4 血清NLRP3、TrkB對顱腦腫瘤患者合并抑郁的預測價值

通過ROC曲線得出：血清NLRP3、TrkB對顱腦腫瘤患者合并抑郁的預測靈敏度和特異度均較高，差異有統計學意義（P＜0.05），見表2、圖1。

圖1 血清NLRP3、TrkB對顱腦腫瘤患者合并抑郁的預測價值

表2 血清NLRP3、TrkB對顱腦腫瘤患者合并抑郁的預測價值

3 討論

顱腦腫瘤是目前臨床上較為多見的腫瘤，由于去發病位置特殊，所以，治療難度較大［6］。目前，主要采取手術治療，但更多的是對腦組織進行保護，控制腦部或者脊髓血液失調的問題，但手術會對患者的精神狀況造成嚴重的影響，常常可伴有焦慮、抑郁的心理，對患者的術后效果造成嚴重的影響［7］。臨床上常采用HAMD量表進行診斷，雖然效果較高，但是診斷不夠及時，可導致嚴重焦慮抑郁情緒，所以尋找較為敏感的血清指標是較為重要的。近年來，尚無此方面的研究，本次研究首次研究血清NLRP3、TrkB與顱腦腫瘤術后伴抑郁的關系，為臨床的診治提供相關參考。

NLRP3是核苷酸結合寡聚化結構域樣受體的一種，具有自身固有免疫模式識別的受體，NLRP3炎癥體參與到人體免疫以及炎性反應，包括內、外源性多種信號均可激活NLRP3炎癥體，造成局部或者全身炎性反應下游通道被激活［8］。本研究表示，相比于對照組，實驗組血清NLRP3顯著更高，且血清NLRP3與HAMD評分呈正相關，表明血清NLRP3與患者抑郁程度呈明顯正相關。分析其原因：腦腫瘤患者術后因為抑郁的狀態，產生心理應激，而應激反應有可以誘導NLRP3炎癥體對糖皮質激素抵抗進行上調，加劇抑郁癥患者生物學異常，促進炎性反應。多項研究［9-10］表示，當機體出現慢性炎性反應時，可激活內源性損傷相關分子模式，激活NLRP3和凋亡相關半點樣蛋白相結合，進而加劇炎性反應，最終形成惡性循環。本研究表示，血清NLRP3對顱腦腫瘤患者合并抑郁的預測靈敏度和特異度均較高。TrkB是神經營養因子的高親和受體，能夠相結合進而起到營養神經的效果，但是也需要先與TrkB相結合，產生生化反應并啟動信息傳導［11］。Mao等［12］發現，腦卒中后抑郁組小鼠酪氨酸激酶受體B表達水平顯著高于正常組。本研究表示，相比于對照組，實驗組血清TrkB顯著更低。這說明腦腫瘤手術后合并抑郁的患者的血清TrkB同樣會降低。本研究表示，血清TrkB與HAMD評分呈負相關，血清TrkB對顱腦腫瘤患者合并抑郁的預測靈敏度和特異度均較高。這也進一步證明血清TrkB可以作為預測患者抑郁心理的標志物。本研究將血清學指標運用于顱腦腫瘤術后伴抑郁患者當中，并發現血清NLRP3、TrkB可以作為預測患者抑郁心理的標志物。但本研究可能因為病例收集較少以及并未進行動態監測的因素，導致實驗可能存在一定的偏差性，以后應擴大病例的收集以及增加對于血清的動態監測，以使研究更加充分。

綜上所述，顱腦腫瘤術后伴抑郁患者血清NLRP3明顯升高，血清TrkB明顯降低，同時血清NLPR3和TrkB與患者抑郁程度具有明顯相關性，并且對于顱腦腫瘤術后伴抑郁具有一定的預測價值。