晨痰和隨機痰在檢測抗酸桿菌中的差別分析

王 姝

江蘇省泰州市中醫院檢驗科 225300

結核病是由感染結核分枝桿菌引起的慢性傳染病。結核分枝桿菌主要侵染肺部與腦部，引起肺結核與腦結核。同時結核病也可累及多個器官，從而影響患者生活質量[1-2]。結核病傳染性比較強，很多患者通過噴嚏、談話、咳嗽就可進行傳染，給社會帶來沉重負擔。同時由于各種因素的影響，雖然公眾結核病知識知曉率較高，但是預防管理行為依從性卻較低。對結核病盡早診斷對于有效預防疾病傳播具有重要意義[3]。痰涂片檢查是一種早期發現結核病的重要途徑，對制定治療方案、觀察療效和進行預后判斷有著重要作用[4]。常用痰涂片檢查方法包括直接涂片法與羅氏培養法。羅氏培養法陽性率高，但其檢測周期較長，直接涂片法操作簡單、成本低，但檢測陽性率較低，敏感性也較低[5]。液基細胞學涂片法抗酸桿菌檢測技術是通過痰保存液液化痰液，然后收集細菌，可達到痰涂片的標準化，并結合液基細胞學技術，提高痰抗酸桿菌的檢出率[6]，但是其對于標本的來源性要求比較高。本文探討與分析了晨痰和隨機痰在檢測抗酸桿菌中的差別，以促進合理收集標本。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2016年8月—2021年9月在本院診治的70例擬診斷為肺結核患者作為觀察對象。納入標準：研究經醫院倫理委員會批準；患者自愿簽署知情同意書；具有肺結核的臨床特征，且具有肺結核病例的接觸史；年齡18～70歲。排除標準：調查期間死亡者；合并其他呼吸道疾病感染者；合并腫瘤者；臨床資料缺乏者。在70例患者中，男38例，女32例；年齡19～65歲，平均年齡(45.20±2.19)歲；肺結核密接者45例，次密接者25例；平均受教育年限(15.20±0.28)年；臨床癥狀(可合并)：咳嗽43例，咳痰52例，咳血43例；平均收縮壓(125.01±11.28)mmHg(1mmHg=0.133kPa)；平均舒張壓(73.10±7.19)mmHg；平均心率(87.15±5.19)次/min；平均空腹血糖(6.10±0.14)mmol/L。

1.2 標本采集與檢測 標本保存液購自宜興市潤迪醫療器械有限公司，抗酸菌染色液購自珠海貝索生物技術有限公司，抗酸桿菌藥敏羅氏培養管購自深圳晶美公司，薄層液基細胞制片機購自長沙英泰儀器有限公司，調速多用振蕩購自北京儀器總廠，恒溫水箱購自常州國宇儀器制造有限公司，KP-1型快速干片機購自上海器械公司。采集所有患者的晨痰和隨機痰各1份，每份5.0ml左右。都采用液基細胞學涂片法進行抗酸桿菌的檢測，使用竹簽挑取痰標本中0.05～0.10ml的膿樣、干酪樣物、血性物，置于玻片正面靠右大約2/3位置，均勻地涂抹成卵圓形痰膜(大小約為20mm×10mm)。在生物安全柜內使用紫外線燈對其照射15min，固定痰涂片火焰。在剩余痰標本中加入5.0%的次氯酸鈉溶液，混合后靜置30min后進行再液化、滅菌，再次混勻后在離心管內保留1ml沉渣，制成集菌痰涂片，然后進行染色與鏡檢。

同時所有樣本都進行羅氏培養法檢測，以羅氏培養法作為診斷的金標準。所有檢測都按照《結核病診斷細菌學檢驗規程》進行操作，質量控制按照《結核病防治規劃—痰涂片鏡檢質量保證手冊》進行嚴格管理[7-8]。

1.3 觀察指標 (1)觀察與記錄晨痰和隨機痰的檢測時間。(2)記錄與觀察晨痰和隨機痰的檢測陽性率。(3)以羅氏培養法檢測作為診斷的金標準，判斷晨痰和隨機痰診斷的敏感性與特異性。

1.4 統計學方法 采用SPSS21.00軟件處理數據，計量數據與計數數據分別采用均數±標準差、率(%)表示，兩兩對比方法為t檢驗與χ2檢驗，檢驗水準為α=0.05。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 檢測時間對比 在70例患者中，晨痰的液基細胞學涂片法檢測時間為(3.21±0.21)h，隨機痰的檢測時間為(3.31±0.18)h，隨機痰檢測時間多于晨痰，二者對比差異無統計學意義(t=0.872，P=0.218>0.05)。

2.2 抗酸桿菌液基細胞學涂片法檢測陽性率對比 在70例患者中，隨機痰的檢測陽性率為74.3%(52/70)，較晨痰的90.0%(63/70)低(t=10.360，P=0.001<0.05)。

2.3 診斷價值 在70例患者中，羅氏培養法診斷為抗酸桿菌陽性64例，為此隨機痰、晨痰的抗酸桿菌液基細胞學涂片法檢測敏感性與特異性分別為100.0%(6/6)、100.0%(6/6)和81.3%(52/64)、98.4%(63/64)。晨痰的抗酸桿菌液基細胞學涂片法檢測敏感性與隨機痰對比差異無統計學意義(χ2=0.000，P=1.000>0.05)，檢測特異性高于隨機痰(χ2=10.360，P=0.001<0.05)。見表1。

表1 晨痰和隨機痰液基細胞學涂片法檢測抗酸桿菌的敏感性與特異性(n=70)

3 討論

結核病是由結核分枝桿菌引起的一種傳染病，嚴重危害患者健康[9]。早期診斷結核病主要通過檢測，為此加強臨床檢測具有重要價值。抗酸桿菌是結核病患者體內的一種傳染性病菌，基本存在于患者肺部病灶的壞死組織內，可通過排痰將抗酸桿菌排至外界空氣中，因此患者痰液內可檢測到抗酸桿菌，也為臨床診斷提供了基礎[10]。抗酸染色冷染法是抗酸桿菌檢驗的常用手段，但其診斷特異性與敏感性有所差異，導致其應用受限。熒光金胺O法具有染色明顯、操作簡易等特點，適合于檢測排菌量少結核病，就某一方面而言，有利于結核病患者病灶組織中抗酸桿菌檢出率的提高，但是檢測成本比較高[11]。聚合酶鏈反應具有很高敏感性和特異性，但對于技術操作的要求較高，不利于很多醫院開展。

本文結果顯示，在70例患者中，隨機痰與晨痰的液基細胞學涂片法檢測時間對比差異無統計學意義，表明抗酸桿菌液基細胞學涂片法檢測具有很好的快速性。分析可知：晨痰檢測多為批量次檢測，而隨機痰檢測多為單個檢測，從而可增加一定的檢測時間。但是抗酸桿菌液基細胞學涂片法為一個既省時又低成本的方法，且在操作中的人為因素影響比較少，有很好的生物安全性，同時其操作易標準化，在單個檢測與批量檢測時間的耗時都較少[12]。

本文結果顯示，在70例患者中，隨機痰的檢測陽性率低于晨痰。分析可知：晨痰為持續8h左右產生的痰液，累計的物質相對較多，能有效反映機體抗酸桿菌的感染情況。隨機痰多為水樣痰，主要是一些來自上呼吸道或口腔的分泌物產生的痰，故檢測陽性率較低。痰結核桿菌抗酸桿菌檢查對結核病診斷以及早期預防管理傳染源有著決定性作用，但對于標本質量的要求比較高[13]。患者在清晨時易于咳出黏液痰、干酪痰、血性痰，其均由患者肺部病灶壞死組織與氣管內分泌物產生，黏度相對較高，在檢測時可檢出大量的抗酸桿菌，從而具有較高的陽性檢出率。同時在檢測結核病患者痰涂片抗酸桿菌時，需留取足夠痰液量的晨痰，進而有利于痰涂片抗酸桿菌檢出率的提高。并且晨痰的標本采集質量比較高，隨機痰的標本采集質量有待提高，為此需重視標本采集前質量控制，需由醫務人員在采集痰液標本前向患者介紹的各種注意事項，以留取最佳且合格的痰液檢測標本。

當前結核病防控主要問題是缺乏及時有效可靠的診斷方法，傳統的結核病診斷方法均存在一定的局限性。抗酸桿菌液基細胞學涂片法檢測是開展結核病控制項目符合成本效益原則的一種細菌學試驗技術，具有可靠、快速等優勢。本文結果顯示，羅氏培養法診斷為抗酸桿菌陽性64例，為此隨機痰、晨痰的抗酸桿菌液基細胞學涂片法檢測敏感性與特異性分別為100.0%、100.0%和81.3%、98.4%；晨痰的抗酸桿菌液基細胞學涂片法檢測敏感性與隨機痰對比差異無統計學意義(P>0.05)，而檢測特異性高于隨機痰(P<0.05)，說明晨痰在檢測抗酸桿菌中具有更高的特異性。分析可知：晨痰在分泌過程中具有均勻性和不間斷性，從而可提高檢測的陽性率。同時很多隨機痰的采樣方法不適宜，在分布中多為水痰，標本質量比較差，在操作中有一定的誤差。且液基細胞學涂片法在檢測中需要比較高的生物安全性，隨機痰的采樣也有一定的生物安全危險，為此在檢測中需要及時保障檢測人員的安全[14]。不過本研究存在一定不足，未納入其他更多的方法進行對比分析，調查人數也比較少，未納入健康人群進行探討，將在后續研究中分析。

總之，抗酸桿菌液基細胞學涂片法檢測結核病的檢測時間比較短，同時相對于隨機痰，晨痰在檢測抗酸桿菌中具有更高的檢測特異性，值得臨床借鑒。