梳唇石斛化學成分的研究

羅婉麗， 王名漁， 楊宗玉， 張茂生， 王 剛， 孫成新， 董敏健， 肖世基

(遵義醫科大學藥學院，貴州 遵義 563000)

石斛屬植物在我國有76種，分布于貴州、云南、廣西、廣東、海南等地，為附生草本[1]，其中五十多種被用作治療癌癥、慢性萎縮性胃炎、皮膚老化、發熱和心血管疾病的中藥[2]。梳唇石斛DendrobiumstrongylanthumRchb.f.又名梳帽石斛[3]、珍蟲石斛，為蘭科石斛屬草葉組植物，生于海拔1 000～2 100 m的山地林中樹干上，分布于云南景洪、勐海山坡常綠闊葉林中，附生樹上，是藥用石斛原植物之一[3]，但近年來由于生態環境破壞及人為毀滅性采挖，其野生資源遭到嚴重破壞[3]。石斛功效滋陰清熱、益味生津、止咳潤肺等作用[4]，具有抗氧化、抗腫瘤、抗血管生成等活性[5-8]，其化學成分較復雜，包括生物堿類，糖類，聯芐類等[5-12]。本實驗對梳唇石斛化學成分進行研究，以期為該植物后續開發利用提供參考。

1 材料

Agilent DD2400-MR型核磁共振儀(美國Agilent公司)；LC-3000型半制備HPLC色譜儀(北京創新通恒科技有限公司)；分析型高效液相色譜儀(大連依利特分析儀器有限公司)；SHB-ⅢA型循環水式多用真空泵(鄭州長城科工貿有限公司)；半制備C18色譜柱(10 mm×250 mm，5 μm，日本YMC 公司)；Finnigan LCQDECA型質譜儀(美國Thermo公司)；BiOTOF Q型質譜儀(德國Bruker公司)；RE-2000A型旋轉蒸發儀(上海亞榮儀器生化儀器廠)；Sepacore型中壓制備系統(瑞士Buchi公司)，MCI樹脂(日本Mitsubishi公司)；硅膠(中國青島海洋化工有限公司)；Sephadex LH-20凝膠(德國Merck公司)。梳唇石斛于2019年5月采自云南省保山市，經遵義醫科大學生藥學教研室吳發明副教授鑒定為梳唇石斛DendrobidiumstrongylanthumRchb.f.的干燥莖，標本(編號20190521)保存于遵義醫科大學天然產物化學研究室。甲醇、乙腈為色譜純(成都市科龍化工試劑廠)。

2 提取與分離

將新鮮的梳唇石斛全草洗凈，除去雜質，切片曬干后粉碎，得540 g干粉，90%甲醇浸泡后回流提取3次，每次3 h，提取液減壓濃縮得浸膏124.1 g，經中壓柱色譜(石油醚-乙酸乙酯)梯度洗脫得到Fr.1～Fr.12。Fr.8～Fr.10經TLC檢測后合并，與MCI凝膠拌樣，經半制備高效液相色譜分離(甲醇-水=30∶70，體積流量3.0 mL/min，檢測波長230 nm)得到Fr.8.1～Fr.8.17，Fr.8.9經半制備HPLC分離，得化合物1(8.5 mg)、3(12.8 mg)、4(15.5 mg)、7(11.6 mg)；Fr.8.6經半制備HPLC分離(甲醇-水，95∶5)，得化合物5(10.5 mg)、6(10.1 mg);Fr.8.7經半制備HPLC分離(甲醇-水，90∶10),得化合物2(9.5 mg)。

3 結構鑒定

化合物1：無色粉末，ESI-MSm/z: 239.1[M-H]-。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ：7.47(1H，s，H-9)，7.41～7.18(3H，m，H-7，8，10)，7.14(1H，s，H-6)，6.85(1H，s，H-1)，6.69(1H，s，H-3)，5.21(1H，s，2-OH)，3.85(3H，s，4-OCH3)；13C-NMR(100 MHz，CDCl3)δ：58.5(4-OCH3)，101.9(C-3)，107.7(C-1)，114.2(C-4a)，116.8(C-6)，119.0(C-10a)，121.1(C-8)，126.2(C-10)，127.2(C-7)，129.5(C-9)，134.3(C-8a)，136.3(C-4b)，153.7(C-2)，154.8(C-5)，155.5(C-4)。以上數據與文獻[13]報道基本一致，故鑒定為plicatol B。

化合物2：淡黃色油狀物，ESI-MSm/z: 329.2[M-H]-。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ：7.02(2H，d，J= 6.5 Hz，H-2′，6′)，6.80(1H，d，J= 6.6 Hz，H-5)，6.72(2H，d，J= 6.9 Hz，H-3′，5′)，6.62(1H，brs，H-2)，6.59(1H，brs，H-6)，4.05(2H，s，H-9)，3.84(3H，s，3-OCH3)，2.85(2H，d，J= 8.0 Hz，H-7′)，2.58(2H，dd，J= 23.7，15.3 Hz，H-8′)，2.49(2H，s，H-7)，1.87(2H，s，H-8)；13C-NMR(100 MHz，CDCl3)δ：30.1(C-7′)，30.3(C-8)，31.6(C-7)，36.3(C-8′)，55.7(3-OCH3)，63.9(C-9)，111.5(C-2)，114.8(C-5)，115.3(C-3′，5′)，120.8(C-6)，129.2(C-2′，6′)，131.3(C-1′)，132.8(C-1)，144.1(C-4)，147.1(C-3)，155.2(C-4′)，173.7(C-9′)。以上數據與文獻[14]報道基本一致，故鑒定為二氫松柏醇二氫對羥基桂皮酸酯。

化合物3：白色粉末，ESI-MSm/z: 243.1[M-H]-。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ：7.11(1H，t，J= 7.6 Hz，H-5′)，6.72(1H，d，J= 7.4 Hz，H-6′)，6.64(1H，d，J= 8.2 Hz，H-4′)，6.62(1H，s，H-2′)，6.29(1H，s，H-6)，6.24(2H，s，H-2，4)，3.86(2H，brs，3，3′-OH),3.70(3H，s，5-OCH3)，2.76(4H，m，-CH2CH2-)；13C-NMR(100 MHz，CDCl3)δ：37.2(-CH2-)，37.5(-CH2-)，55.3(5-OCH3)，99.1(C-4)，106.7(C-6)，108.2(C-2)，112.9(C-4′)，115.5(C-2′)，120.9(C-6′)，129.5(C-5′)，143.6(C-1′)，144.4(C-1)，155.4(C-3′)，156.5(C-3)，160.9(C-5)。以上數據與文獻[14]報道基本一致，故鑒定為山藥素Ⅲ。

化合物4：白色無定形粉末。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ：7.11(1H，t，J= 7.6 Hz，H-7)，6.93(1H，d，J= 7.8 Hz，H-6)，6.83(1H，d，J= 7.6 Hz，H-8)，6.47(2H，s，H-1，3)，3.83(3H，s，4-OCH3)，2.58(4H，m，H-9，10)；13C-NMR(100 MHz，CDCl3)δ：30.9(C-9)，31.2(C-10)，56.9(4-OCH3)，99.4(C-3)，109.6(C-1)，113.6(C-5)，117.5(C-8)，120.0(C-6)，121.0(C-4b)，127.5(C-7)，140.7(C-8a)，143.5(C-10a)，152.8(C-4a)，155.1(C-4)，157.8(C-2)。以上數據與文獻[15]報道基本一致，故鑒定為2,5-二羥基-4-甲氧基-9,10-二氫菲。

化合物5：紅色無定形固體，ESI-MSm/z: 271.1[M+H]+。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ：9.29(1H，d，J= 9.1 Hz，H-5)，7.54(1H，d，J= 8.8 Hz，H-10)，7.45(1H，d，J= 8.8 Hz，H-9)，7.18(1H，m，H-8)，7.16(1H，dd，J=9.2，2.7 Hz，H-6)，7.04(1H，s，H-1)，4.01(3H，s，3-OCH3)，3.92(3H，s，4-OCH3)；13C-NMR(100 MHz，CD3OD)δ：60.3(4-OCH3)，61.4(2-OCH3)，110.3(C-1)，112.6(C-8)，117.6(C-6)，119.3(C-4a)，124.6(C-4b)，127.2(C-9)，127.7(C-10)，129.0(C-5)，130.8(C-10a)，134.9(C-8a)，143.4(C-3)，150.5(C-2)，152.6(C-4)，156.1(C-7)。以上數據與文獻[16]報道基本一致，故鑒定為2,7-二羥基-3,4-二甲氧基菲。

化合物6：黃棕色粉末，ESI-MSm/z: 271.1[M-H]-。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ：8.13(1H，d，J= 8.4 Hz，5-OH)，6.71(1H，dd，J= 8.4，2.6 Hz，H-6)，6.69(1H，s，H-8)，6.54(1H，s，H-1)，3.88(3H，s，3-OCH3)，3.66(3H，s，4-OCH3)，2.73～2.61(4H，m，H-9，10)；13C-NMR(100 MHz，CD3OD)δ：31.1(C-9)，31.2(C-10)，60.5(4-OCH3)，61.3(3-OCH3)，112.2(C-1)，114.2(C-6)，115.3(C-8)，121.0(C-4a)，125.7(C-4b)，129.3(C-5)，135.7(C-10a)，140.6(C-8a)，141.3(C-3)，150.0(C-2)，152.5(C-4)，156.7(C-7)。以上數據與文獻[15]報道基本一致，故鑒定為2,7-二羥基-3,4-二甲氧基-9,10-二氫菲。

化合物7：黃棕色粉末，ESI-MSm/z: 269.3[M-H]-。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ：7.81(1H，d，J= 8.0 Hz，H-8)，7.38～7.31(1H，m，H-7)，7.10(1H，d，J= 7.6 Hz，H-6)，6.92(1H，d，J= 6.8 Hz，H-1)，6.81(1H，d，J= 15.6 Hz，H-3)，6.76(1H，d，J= 15.6 Hz，H-10)，3.90(3H，s，2-OCH3)，3.90(3H，s，5-OCH3)；13C-NMR(100 MHz，CDCl3)δ：55.4(-OCH3)，58.2(-OCH3)，100.6(C-3)，102.0(C-10)，106.9(C-1)，109.0(C-4a)，114.2(C-8)，116.8(C-6)，120.8(C-4b)，126.3(C-7)，128.2(C-8a)，136.9(C-10a)，153.1(C-5)，154.0(C-9)，155.2(C-4)，157.2(C-2)。以上數據與文獻[17]報道基本一致，故鑒定為phoimbrtol A。

4 討論

本實驗從梳唇石斛中分離鑒定出7個化合物，包括1個聯芐、1個苯丙素、5個菲類，均為首次從梳唇石斛中分離，其中化合物7為首次從石斛屬植物中發現。上述結果豐富了梳唇石斛化學信息，從一定程度上揭示了該植物與其他品種石斛在藥效物質基礎方面存在的區別，可為其更好的開發利用提供理論依據。