ABO血型不合新生兒溶血病與血液檢測(cè)指標(biāo)關(guān)系及其診斷價(jià)值

李 怡 任曉桃 郭 靜

四川省綿陽市婦幼保健院(621000)

新生兒溶血病(HDN)為母子血型不合溶血病，不僅可破壞胎兒紅細(xì)胞，引發(fā)溶血，還可伴隨肝脾腫大、貧血、黃疸等一系列病理損害[1]。需盡早診斷，為臨床提供防治依據(jù)[2]。產(chǎn)前免疫血液學(xué)是常用檢測(cè)方式，通過檢測(cè)母體血型抗體效價(jià)和致敏紅細(xì)胞，可預(yù)測(cè)HDN患病率，但兩種測(cè)定條件有限，無法在基層醫(yī)院推廣，延誤治療最佳時(shí)機(jī)[3]。而如何利用基本常規(guī)檢查正確判斷HDN是當(dāng)前研究熱點(diǎn)。血液檢查具有操作簡(jiǎn)便、性價(jià)比高、適應(yīng)性廣等優(yōu)勢(shì)，近年有學(xué)者[4]將其推廣在HDN檢測(cè)中，可預(yù)測(cè)HDN患病率，為臨床診治提供依據(jù)，但血液檢查與ABO血型不合新生兒溶血病相關(guān)性仍處于探索階段。本文分析了HDN血型分布情況，探索血液檢查指標(biāo)預(yù)測(cè)ABO血型不合新生兒溶血病效能和相關(guān)性。

1 資料和方法

1.1 資料

回顧性分析2016年4月-2021年4月本院分娩孕婦的2565例基本資料。孕婦年齡(27.9±3.6)歲，孕周(36.5±2.2)周，體重(65.4±5.5)kg；剖宮產(chǎn)1112例，順產(chǎn)1453例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①父親為非O型血，母親不規(guī)則抗體篩查為陰性；②新生兒出現(xiàn)黃疸等癥狀。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并嚴(yán)重腦缺氧、缺血性疾病；②存在先天性心功能不全。本研究符合《赫爾辛基宣言》的倫理審查。

1.2 檢測(cè)方法

抽取新生兒臍帶血和夫妻雙方抗凝血分離紅細(xì)胞和血清，進(jìn)行孕婦不規(guī)則抗體篩查和血型鑒定。新生兒溶血進(jìn)行血清紅細(xì)胞抗體稀釋實(shí)驗(yàn)、直接抗球蛋白實(shí)驗(yàn)、游離抗體測(cè)定，在檢測(cè)孕婦體內(nèi)IgG抗A(B)抗體效價(jià)時(shí)使用微柱凝膠抗球蛋白技術(shù)。血液指標(biāo)檢測(cè)：對(duì)新生兒進(jìn)行常規(guī)血常規(guī)、凝血功能監(jiān)測(cè)，使用XT-2000I型號(hào)全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀(Sysmex公司)、半自動(dòng)免疫比濁儀(Orion公司)檢測(cè)總膽紅素、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度、紅細(xì)胞和血小板體積、直接膽紅素、血小板、血紅蛋白、中性粒細(xì)胞。新生兒溶血病判定標(biāo)準(zhǔn)[5]：①抗體釋放試驗(yàn)陽性或直接Coombs試驗(yàn)陽性；②ABO系統(tǒng)母子血型不合；③血清膽紅素水平升高，部分人群出現(xiàn)蒼白、皮膚瘀斑、胸腔積液、全身水腫、腹水。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 HDN陽性率分布

2565例分娩孕婦，發(fā)生HDN 109例(溶血組)，4.2%；其中O-A-A型，3項(xiàng)陽性16例、2項(xiàng)陽性2例)；O-B-B型均為3項(xiàng)陽性；O-AB-A型3項(xiàng)陽性20例，2項(xiàng)陽性3例；O-AB-B型3項(xiàng)陽性17例，2項(xiàng)陽性2例。各血型組合檢測(cè)陽性率存在差異(χ2=7.531，P=0.0006)。見表1。

表1 不同AB0血型組合不同抗體檢測(cè)HDN陽性分布[例(%)]

2.2 抗價(jià)效價(jià)與HDN發(fā)生關(guān)系

IgG抗A(B)抗價(jià)效價(jià)≥1024者中檢測(cè)出的HDN陽性率高于其他抗價(jià)效價(jià)者(P<0.05)。見表2。

表2 不同ABO抗價(jià)效價(jià)孕婦HDN陽性分布

2.3 HDN與血液指標(biāo)

溶血組與非溶血組直接膽紅素、血小板、血小板平均體積、平均紅細(xì)胞體積、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量、血小板分布寬度比較無差異(P>0.05)，溶血組總膽紅素、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度、中性粒細(xì)胞均高于非溶血組，血紅蛋白低于非溶血組(均P<0.05)。見表3。

表3 兩組血液檢測(cè)指標(biāo)水平比較

2.4 HDN發(fā)生因素分析

以新生兒是否發(fā)生溶血為因變量，將單因素篩查有意義的指標(biāo)為自變量，采用二元logistic回歸分析。總膽紅素、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度、血紅蛋白、中性粒細(xì)胞異常為影響因素(P<0.05)。見表4。

表4 發(fā)生HDN時(shí)各血液指標(biāo)二元logistic分析

2.5 相關(guān)性分析

經(jīng)Spearman法分析，HDN與血紅蛋白含量呈負(fù)相關(guān)性(r=-0.166)，與中性粒細(xì)胞、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度、總膽紅素呈正相關(guān)性(r=0.297、0.255、0.349)(P<0.001)。

2.6 ROC曲線分析

經(jīng)ROC曲線分析，總膽紅素、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度、中性粒細(xì)胞、血紅蛋白早期預(yù)測(cè)HDN的AUC，將4項(xiàng)指標(biāo)納入logistic回歸分析，根據(jù)回歸系數(shù)值擬合4項(xiàng)聯(lián)合診斷的數(shù)值計(jì)算公式：4項(xiàng)聯(lián)合=總膽紅素+(-0.062)/-0.841)×平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度+(-0.416)/(-0.841)×中性粒細(xì)胞+0.176/(-0.841)×血紅蛋白，經(jīng)分析，4項(xiàng)聯(lián)合早期預(yù)測(cè)HDN的AUC為0.991。見表5。采用Z檢驗(yàn)各項(xiàng)檢測(cè)的AUC均有差異，4項(xiàng)聯(lián)合高于總膽紅素、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度、中性粒細(xì)胞、血紅蛋白單獨(dú)檢測(cè)(Z=1.687、6.261、3.966、10.244，P<0.05)。

表5 各指標(biāo)預(yù)測(cè)HDN的價(jià)值

3 討論

母嬰血型不合所致的HDN是發(fā)生在早期新生兒、胎兒中一種免疫溶血性疾病，大多是因母體血型抗體經(jīng)過胎盤進(jìn)入胎兒血循環(huán)，并作用于紅細(xì)胞引發(fā)的溶血，不僅可出現(xiàn)明顯膽紅素生成增多，還可在新生兒娩出后24h加重黃疸，常伴有肝脾腫大、水腫、貧血，嚴(yán)重時(shí)可誘發(fā)膽紅素腦病，造成不可逆神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥，甚至威脅新生兒生命安全。故需盡早診斷，從而控制疾病發(fā)展[6-7]。

經(jīng)調(diào)查[8]，ABO系統(tǒng)引起的HDN多發(fā)生于O型母親，多是因O型血清中含有免疫性抗B和抗A成分，可生成IgG 7S-r球蛋白，此種蛋白可通過胎盤引起HDN。對(duì)此，本研究將0型母親作為調(diào)查對(duì)象，分析HDN血型分布情況。結(jié)果顯示，HDN發(fā)生率為4.25%，其中HDN患病率最高，其次O-AB-A型，推測(cè)是因胎兒紅細(xì)胞中的抗原決定簇A位點(diǎn)較B位點(diǎn)多，故發(fā)生溶血A型較B型多，相應(yīng)的O-AB-A型患病率也高于O-AB-B型者[9]。同時(shí)IgG抗A(B)抗價(jià)效價(jià)≥1024者HDN發(fā)生率高于其他階段抗價(jià)效價(jià)，原因是母體內(nèi)存在破壞胎兒紅細(xì)胞的血型抗體，雖然新生兒不一定會(huì)患有HDN，但當(dāng)抗體效價(jià)超過1024時(shí)可造成AB0 HDN。李菁[10]學(xué)者研究證明血清IgG抗A(B)抗價(jià)效價(jià)≥1024，可增加HDN患病率。即便血清IgG抗A(B)抗價(jià)效價(jià)靈敏性較高，但須在標(biāo)準(zhǔn)條件下完成檢測(cè)，故限制了該項(xiàng)方法在基層使用[11]。

經(jīng)二元logistic分析，臨床多種血液指標(biāo)可作為影響HDN患病率的獨(dú)立因素，其中紅細(xì)胞血紅蛋白濃度、中性粒細(xì)胞、總膽紅素、血紅蛋白4項(xiàng)指標(biāo)無論經(jīng)二元回歸分析還是Spearman法分析，均呈現(xiàn)相關(guān)狀態(tài)。推測(cè)原因是HDN大部分因溶血引起，短時(shí)間內(nèi)可導(dǎo)致紅細(xì)胞大量被破壞，使得血紅蛋白下降，紅細(xì)胞血紅蛋白濃度、總膽紅素、中心粒細(xì)胞升高[12]。一方面中心粒細(xì)胞增高是因大量血細(xì)胞被破壞，導(dǎo)致應(yīng)激反應(yīng)邊緣池內(nèi)大量細(xì)胞進(jìn)入血液循環(huán)，使得中性粒細(xì)胞增高，由于此項(xiàng)反應(yīng)發(fā)生在血紅蛋白凝聚前，故周圍紅細(xì)胞數(shù)和血紅蛋白含量呈下降趨勢(shì)，中心粒細(xì)胞卻明顯增多，因此可將其作為內(nèi)出血重要依據(jù)[13]；另一方面胎兒出現(xiàn)溶血性貧血后，可因血漿容量、紅細(xì)胞容積減少或擴(kuò)張，導(dǎo)致血容量穩(wěn)定性受到影響，干擾血漿容量代償，使得總膽紅素和紅細(xì)胞血紅蛋白濃度增高[14-15]。而直接膽紅素作為黃疸重要評(píng)價(jià)依據(jù)之一，本次研究顯示，兩組新生兒直接膽紅素未見差異性，可能是因本次檢測(cè)的新生兒未結(jié)束溶血過程，未出現(xiàn)膽汁淤積，故不會(huì)引起直接膽紅素明顯升高[16]。從預(yù)測(cè)角度分析，4項(xiàng)聯(lián)合預(yù)測(cè)HDN效能最高，證明血液指標(biāo)在早期預(yù)測(cè)HDN患病率有臨床價(jià)值。提示臨床盡早開展相關(guān)檢測(cè)，為治療HDN提供指導(dǎo)依據(jù)，以降低或避免HDN發(fā)生[17]。

綜上所述，AB0血型不合的HDN血型主要以0-A-A型為主。而總膽紅素、血紅蛋白、紅細(xì)胞血紅蛋白濃度、中性粒細(xì)胞等血液指標(biāo)與HDN存在相關(guān)性，具有一定預(yù)測(cè)價(jià)值，可為臨床早期診斷提供參考依據(jù)。但本次研究仍存在不足之處，首先HDN病例量較少，其次血液指標(biāo)僅分析了常用幾類，未探索其與其他血液指標(biāo)的相關(guān)性，故需擴(kuò)大樣本深入研究。