多重PCR 技術檢測兒童呼吸道病原的結果分析及臨床應用價值評估

袁青，史大偉，竇海偉，辛德莉

兒童急性呼吸道感染（acute respiratory tract infections，ARTIs）發病率高，是兒童常見的呼吸系統疾病。兒童呼吸道感染常見病原主要為細菌、病毒、非典型病原體，大部分感染是由病毒及非典型病原體引起[1]。明確感染病原有助于抗微生物藥物的合理使用及呼吸道傳染病的早發現、早隔離、早報告、早治療。因此，多病原檢測對于兒童急性呼吸道感染的診斷和治療非常重要[2]。本研究采用多重 PCR 技術對兒童 ARTIs 患者的咽拭子和支氣管肺泡灌洗液（BALF）進行檢測，了解兒童急性呼吸道感染病原分布情況，并評估多重 PCR 技術在診斷中的價值。

1 材料與方法

1.1 研究對象

選取 2018 年 1 月 -2019 年 1 月北京地區多家醫院（首都醫科大學附屬北京友誼醫院、北京大學第一醫院、首都醫科大學附屬北京朝陽醫院、北京民航總醫院、煤炭總醫院、北京市昌平中西醫結合醫院）因呼吸道感染就診的患兒咽拭子及BALF；入選標準：①年齡 6 月～14 歲；②發熱伴咳嗽或咽痛等呼吸道感染癥狀，病程在 1～7 d的門診和住院病人；③血常規白細胞總數（4.0～12.0）× 109/L；診斷標準參考《諸福棠實用兒科學》第八版[3]。

1.2 方法

1.2.1 咽拭子及 BALF 標本采集 咽拭子標本用尼龍材質植絨拭子采集，采集后置于裝轉運培養基的采樣管中，BALF 標本按照電子支氣管鏡操作規范留取[4]，分裝后于 -80 ℃ 冰箱中保存。

1.2.2 核酸提取 核酸提取采用康為世紀生物科技有限公司的通用基因組 DNA 提取試劑盒（批號20321），具體操作按照試劑盒說明書要求進行。

1.2.3 13 種呼吸道病原多重 PCR 檢測 應用13 種呼吸道病原多重檢測試劑盒（寧波海爾施基因科技有限公司，批號：109103001）進行 PCR 擴增，操作過程按說明書進行，將PCR 產物送至寧波海爾施基因科技有限公司進行毛細電泳片段分離。……