烏天麻二氯甲烷萃取部位化學成分及其膽堿酯酶抑制活性的研究

段曉燕，閻 慧，陳貽芳，羅吉鳳，丁培超，田孟華*，王躍虎*

烏天麻二氯甲烷萃取部位化學成分及其膽堿酯酶抑制活性的研究

段曉燕1，閻 慧1，陳貽芳1，羅吉鳳1，丁培超2，田孟華2*，王躍虎1*

1. 中國科學院昆明植物研究所 云南省真菌多樣性與綠色發展重點實驗室和植物化學與西部植物資源持續利用國家重點實驗室，云南 昆明 650201 2. 昭通市天麻研究院，云南 昭通 657000

研究烏天麻二氯甲烷萃取部位的化學成分及其膽堿酯酶抑制活性。采用Ellman法測定了二氯甲烷萃取部位對乙酰膽堿酯酶（acetyl cholinesterase，AChE）和丁酰膽堿酯酶（butyryl cholinesterase，BuChE）的抑制活性；利用硅膠柱色譜、Sephadex LH-20柱色譜、半制備高效液相色譜等方法進行分離純化；利用NMR、MS等技術鑒定化合物結構；測定所有單體化合物的膽堿酯酶抑制活性。烏天麻二氯甲烷萃取部位對AChE和BuChE均有顯著的抑制活性，半數抑制濃度（median inhibition concentration，IC50）分別為10.45、9.20 μg/mL；從中分離得到11個化合物，分別鑒定為環[甘氨酸-l--(4??-羥基苯基)半胱氨酸]（1）、5?-甲硫基腺苷（2）、對羥基芐胺（3）、對羥基苯甲醇（4）、對羥基苯甲醛（5）、2-甲基-3-羥基吡啶（6）、4-乙酰氧甲苯基-β--吡喃葡萄糖苷（7）、4-(乙氧基甲基)苯酚β--吡喃葡萄糖苷（8）、小檗堿（9）、(＋)-thalirugidine（10）和(＋)-海蘭地嗪（11）。化合物1～3和9～11為首次從天麻屬中分離得到。化合物9（IC50＝5.93 μmol/L）和10（IC50＝42.49 μmol/L）對AChE有抑制活性，化合物10（IC50＝21.20 μmol/L）對BuChE有抑制活性。

蘭科；烏天麻；生物堿；膽堿酯酶抑制活性；小檗堿；(＋)-thalirugidine；(＋)-海蘭地嗪

天麻又名赤箭、獨搖芝、定風草、合離草，為蘭科植物天麻Blume的干燥塊莖[1]，主產于貴州、云南、陜西、四川等省，是我國名貴中藥材之一[2]。根據天麻塊莖形狀、塊莖含水量、花及花莖的顏色特點，將天麻劃分為4個類型，即紅天麻Bl. f.、綠天麻Bl. f.Makino、烏天麻Bl. f.S. Chow和黃天麻Bl. f.S. Chow[3-4]。前人已對天麻的化學成分及其藥理作用進行了大量研究[5-7]，在治療神經系統疾病方面的研究尤其受到關注[8-9]。有研究報道，天麻醋酸乙酯部分對小鼠學習記憶獲得障礙有改善作用，還能降低腦膽堿酯酶的活力及保護腦缺氧，但是起作用的活性成分并不清楚[10]。另有研究表明，天麻超微粉能夠改善血管性癡呆大鼠的學習記憶障礙，其作用機制與上調膽堿乙酰轉移酶（choline acetyltransferase，ChAT）蛋白，抑制乙酰膽堿酯酶（acetyl cholinesterase，AChE）蛋白，提高腦內乙酰膽堿的作用密切相關[11]。

主產于我國云南省昭通市彝良縣小草壩地區的烏天麻，具有較高的藥用價值和食用價值[12-13]。目前對烏天麻的生物堿類成分還缺乏系統的研究。本研究在制備烏天麻總生物堿，即二氯甲烷萃取部位后，評價了其對AChE和丁酰膽堿酯酶（butyryl cholinesterase，BuChE）的抑制活性，結果顯示，二氯甲烷萃取部位對AChE和BuChE均有顯著的抑制活性，半數抑制濃度（median inhibition concentration，IC50）分別為10.45、9.20 μg/mL。因此開展了二氯甲烷萃取部位的化學成分研究，分離得到11個化合物（圖1），分別鑒定為環[甘氨酸-l-- (4??-羥基苯基)半胱氨酸] {cyclo[glycine-l--(4?- hydroxybenzyl)cysteine]，1}、5?-甲硫基腺苷（5′--methyl-5′-thioadenosine，2）、對羥基芐胺[4-(aminomethyl)phenol，3]、對羥基苯甲醇[4-(hydroxymethyl)phenol，4]、對羥基苯甲醛（4-hydroxybenzaldehyde，5）、2-甲基-3-羥基吡啶（2-methylpyridin-3-ol，6）、4-乙酰氧甲苯基-β--吡喃葡萄糖苷{4-[(acetyloxy)methyl] phenyl β-- glucopyranoside，7}、4-(乙氧基甲基)苯酚β--吡喃葡萄糖苷[4-(ethoxymethyl)phenol β--glucopyra- nosid，8]、小檗堿（berberine，9）、(＋)-thalirugidine（10）和（＋）-海蘭地嗪[(＋)-hernandezine，11]。其中，化合物1～3和9～11為首次從天麻屬中分離得到。膽堿酯酶抑制活性測試結果顯示，化合物9（IC50＝5.93 μmol/L）和10（IC50＝42.49 μmol/L）對AChE有抑制活性，化合物10（IC50＝21.20 μmol/L）對BuChE有抑制活性。

圖1 化合物1～11的化學結構

1 材料與儀器

薄層色譜硅膠板和柱色譜硅膠（80～100、200～300、300～400目）為青島海洋化工廠生產；中性氧化鋁（100～200目）為上海五四化學試劑有限公司生產；反相（RP）C18硅膠（40～63 μm）、色譜級甲醇、乙腈為德國Merck公司生產；分析純石油醚、甲醇等為北京化工生產；高效液相色譜儀為Agilent 1200型，檢測器為二極管陣列檢測器（DAD），半制備柱為Welch Ultimate AQ-C18（250 mm×7.8 mm，5.0 μm），Agilent ZORBAX RX-C8（250 mm×9.4 mm，5.0 μm），YMC-Pack SIL（250 mm×10.0 mm，5.0 μm）；凝膠色譜為Sephadex LH-20（GE Healthcare Bio-Xciences AB）；1D和2D NMR用AVANCE III 500 MHz和AV 600 MHz型核磁共振儀測定，內標為TMS；電噴霧電離質譜（ESI-MS）UPLC-IT-TOF型質譜儀（日本島津公司）；高分辨電噴霧電離質譜（HR-ESI-MS）Agilent G6230質譜、Agilent Applied Photophysics型數字式圓二色光譜儀（美國安捷倫公司）；Shimadzu UV2401PC型紫外可見分光光度計（日本島津公司）；Jasco P-1020型全自動數字旋光儀（日本Jasco公司）；酶標儀Multiskan FC（美國Thermo公司）；人AChE（≥1000單位/毫克蛋白質）、人BuChE（≥50單位/毫克蛋白質）、碘化硫代乙酰膽堿、二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）、陰性對照溶劑二甲基亞砜（DMSO）和陽性對照藥物他克林均購自Sigma公司。

烏天麻產自云南省昭通市彝良縣小草壩鎮小草壩村海子組，于2019年12月采收后加工儲存；由中國科學院昆明植物研究所周鉉研究員鑒定為烏天麻Bl. f.S. Chow，憑證標本（YJ2021040）存放于中國科學院昆明植物研究所資源植物與生物技術重點實驗室。

2 提取與分離

烏天麻干燥塊莖20 kg粉碎，用95%乙醇加熱到60 ℃超聲提取30 min，減壓濃縮得到粗提物（1.8 kg）。將其混懸于3 L水中，用等體積石油醚萃取3次，有機相經減壓蒸餾回收溶劑后，得到石油醚萃取部分（142.2 g）。剩余水相用1.5% HCl將pH值調至2左右，用等體積醋酸乙酯萃取3次，有機相經減壓蒸餾回收溶劑后，得到醋酸乙酯萃取部分（104.4 g）。剩余酸性水相溶液用5% NaOH將pH值調至9左右，用等體積二氯甲烷萃取3次，有機相經減壓蒸餾回收溶劑后，得到二氯甲烷萃取部位，即總生物堿（14.1 g）。

二氯甲烷萃取部位用硅膠柱色譜以CH2Cl2/MeOH（1∶0→0∶1）進行梯度洗脫，經TLC檢查后合并得6個流分（Frs. 1～6）。Fr. 1（1.4 g）經RP C18硅膠柱色譜（30%→100%甲醇）和Sephadex LH-20柱色譜（甲醇）純化，得到化合物3（66.0 mg）和5（120.0 mg）。Fr. 2（0.7 g）經硅膠柱色譜（石油醚-丙酮8∶1→0∶1）梯度洗脫得化合物6（26.0 mg）、Fr. 2-2和Fr. 2-3。Fr. 2-3（0.3 g）經Sephadex LH-20柱色譜（三氯甲烷-甲醇1∶1）和半制備HPLC（Ultimate AQ-C18，體積流量3 mL/min，乙腈-水25∶75）得到化合物4（5.5 mg，R＝6.998 min）。Fr. 5（0.4 g）經RP C18硅膠柱色譜（20%→100%甲醇）得到Frs. 5-1～5-4，Fr. 5-1經Sephadex LH-20柱色譜（甲醇）純化，得到化合物1（16.0 mg）和2（14.0 mg）；Fr. 5-3（116.0 mg）經半制備HPLC（Ultimate AQ-C18），體積流量2 mL/min，甲醇-水80∶20）得到化合物10（4.1 mg，R＝15.405 min）；Fr. 5-4經半制備HPLC（Agilent RX-C8，體積流量2 mL/min，甲醇-水78∶22）得到化合物11（2.4 mg，R＝9.761 min）。Fr. 6（0.9 g）經RP C18硅膠柱色譜（20%→100%甲醇）得到Fr. 6-1～6-4，Fr. 6-1經半制備HPLC（YMC-Pack SIL，體積流量2 mL/min，正己烷-異丙醇40∶60）得到化合物8（1.6 mg，R＝19.127 min）和7（2.8 mg，R＝21.907 min）；Fr. 6-4經氧化鋁柱色譜（石油醚-醋酸乙酯2∶1）和半制備HPLC（Agilent RX-C8，體積流量2 mL/min，甲醇-水30∶70）得到化合物9（2.4 mg，R＝12.592 min）。

3 結構鑒定

化合物2：白色無定形粉末，分子式C11H15N5O3S；[α]20 D＋1.9 (0.26, MeOH)；ESI-MS (＋)/: 320 [M＋Na]+。1H-NMR (500 MHz, methanol-4): 8.32 (1H, s, H-8), 8.20 (1H, s, H-2), 6.00 (1H, d,= 5.1 Hz, H-1?), 4.77 (1H, t,= 5.1 Hz, H-2?), 4.32 (1H, dd,= 5.1, 4.8 Hz, H-3?), 4.21 (1H, m, H-4?), 2.94 (1H, dd,= 14.1, 5.7 Hz, H-5?a), 2.86 (1H, dd,= 14.2, 6.1 Hz, H-5?b), 2.11 (3H, s, 5?- SCH3)；13C-NMR (125 MHz, methanol-4): 157.3 (C-6), 153.9 (C-2), 150.7 (C-4), 141.4 (C-8), 120.5 (C-5), 89.9 (C-1?), 85.5 (C-4?), 74.9 (C-2?), 74.0 (C-3?), 37.4 (C-5?), 16.5 (5?-SCH3)。以上數據與文獻報道數據[15]比較，鑒定化合物2為5?-甲硫基腺苷。

化合物3：無色片狀晶體（甲醇），mp 115～118 ℃，分子式C7H9NO；ESI-MS (＋)/:124 [M＋H]+。1H-NMR (500 MHz, methanol-4): 7.05 (2H, brd,= 8.5 Hz, H-2, 6), 6.72 (2H, brd,= 8.5 Hz, H-3, 5), 3.53 (2H, s, H2-7)；13C-NMR (125 MHz, methanol-4): 158.0 (C-1), 131.7 (C-3, 5), 129.6 (C-4), 116.1 (C-2, 6), 43.6 (C-7)。以上數據與文獻報道數據[16]比較，鑒定化合物3為對羥基芐胺。

化合物4：白色無定形粉末，分子式C7H8O2；ESI-MS (-)/123 [M－H]?。1H-NMR (500 MHz, methanol-4): 7.16 (2H, brd,= 8.5 Hz, H-2, 6), 6.74 (2H, brd,= 8.5 Hz, H-3, 5), 4.47 (2H, s, H2-7)；13C-NMR (125 MHz, methanol-4): 157.9 (C-1), 133.4 (C-4), 129.8 (C-3, 5), 116.0 (C-2, 6), 65.1 (C-7)。以上數據與文獻報道數據[17]比較，鑒定化合物4為對羥基苯甲醇。

化合物5：白色無定形粉末，分子式C7H6O2；ESI-MS (-)/: 121 [M－H]?；1H-NMR (500 MHz, methanol-4): 9.75 (1H, s, H-7), 7.76 (2H, brd,= 8.5 Hz, H-2, 6), 6.91 (2H, brd,= 8.5 Hz, H-3, 5)；13C-NMR (125 MHz, methanol-4): 192.8 (C-7), 165.2 (C-1), 133.4 (C-3, 5), 130.3 (C-4), 116.9 (C-2, 6)。以上數據與文獻報道數據[17]比較，鑒定化合物5為對羥基苯甲醛。

化合物6：黃色油狀物，分子式C6H7NO；ESI-MS (-)/: 108 [M－H]?。1H-NMR (500 MHz, methanol-4): 7.84 (1H, dd,= 4.6, 1.3 Hz, H-6), 7.13 (1H, dd,= 8.0, 1.3 Hz, H-4), 7.07 (1H, dd,= 8.0, 4.6 Hz, H-5), 2.39 (3H, s, CH3-7)；13C-NMR (125 MHz, methanol-4): 153.8 (C-3), 147.6 (C-2), 139.4 (C-6), 123.6 (C-5), 123.1 (C-4), 18.4 (C-7)。以上數據與文獻報道數據[18]比較，鑒定化合物6為2-甲基-3-羥基吡啶。

化合物7：白色無定形粉末，分子式C15H20O8；[α]20 D-27.2 (0.27, MeOH)；ESI-MS (＋)/: 351 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, methanol-4): 7.29 (2H, brd,= 8.6 Hz, H-3, 5), 7.07 (2H, brd,= 8.6 Hz, H-2, 6), 5.03 (2H, s, H2-7), 4.91 (1H, d,= 7.5 Hz, H-1?), 3.89 (1H, dd,= 12.1, 2.0 Hz, H-6?a), 3.69 (1H, dd,= 12.1, 5.4 Hz, H-6?b), 2.04 (3H, s, H3-9)；13C-NMR (150 MHz, methanol-4): 172.7 (C-8), 159.1 (C-1), 131.5 (C-4), 130.9 (C-3), 130.3 (C-5), 117.7 (C-2), 117.6 (C-6), 102.2 (C-1?), 78.2 (C-3?), 78.0 (C-5?), 74.9 (C-2?), 71.4 (C-4?), 67.0 (C-7), 62.5 (C-6?), 20.9 (C-9)。以上數據與文獻報道數據[19]比較，鑒定化合物7為4-乙酰氧甲苯基-β--吡喃葡萄糖苷。

化合物8：白色無定形粉末，分子式C15H22O7；[α]20 D-59.4 (0.16, MeOH)；ESI-MS (＋)/: 337 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, methanol-4): 7.26 (2H, brd,= 8.4 Hz, H-2, 6), 7.07 (2H, brd,= 8.4 Hz, H-3, 5), 4.88 (1H, d,= 7.2 Hz, H-1?), 4.43 (2H, s, H2-7), 3.88 (1H, dd,= 12.1, 2.2, H-6?a), 3.69 (1H, dd,= 12.1, 5.5 Hz, H-6?b), 3.51 (2H, q,= 7.1 Hz, H2-8), 1.19 (3H, t,= 7.1 Hz, H3-9)；13C-NMR (150 MHz, methanol-4): 158.8 (C-1), 133.6 (C-4), 130.3 (C-3, 5), 117.6 (C-2, 6), 102.3 (C-1?), 78.2 (C-3?), 78.0 (C-5?), 74.9 (C-2?), 73, 3 (C-7), 71.4 (C-4?), 66.5 (C-8). 62.5 (C-6?), 15.4 (C-9)。以上數據與文獻報道數據[20]比較，鑒定化合物8為4-(乙氧基甲基)苯酚β--吡喃葡萄糖苷。

化合物9：黃色粉末，分子式C20H18NO4；ESI-MS (＋)/336 [M]+。1H-NMR (500 MHz, methanol-4): 9.76 (1H, s, H-8), 8.70 (1H, s, H-13), 8.11 (1H, d,= 9.1 Hz, H-11), 7.99 (1H, d,= 9.1 Hz, H-12), 7.66 (1H, s, H-1), 6.96 (1H, s, H-4), 6.10 (2H, s, OCH2O), 4.91 (2H, t,= 6.4 Hz, H2-6), 4.19, 4.10 (各3H, s, 2×OMe), 3.25 (2H, t,= 6.4 Hz, H2-5)；13C-NMR (125 MHz, methanol-4): 152.2 (C-3), 152.0 (C-9), 149.9 (C-2), 146.4 (C-8), 145.8 (C-10), 139.7 (C-14), 135.2 (C-12a), 131.9 (C-4a), 128.1 (C-13), 124.5 (C-12), 123.3 (C-14a), 121.9 (C-8a), 121.5 (C-11), 109.4 (C-4), 106.5 (C-1), 103.7 (OCH2O), 62.5 (9-OCH3), 57.6 (10-OCH3), 57.2 (C-6), 28.2 (C-5)。以上數據與文獻報道數據[21]比較，鑒定化合物9為小檗堿。

化合物10：白色無定形粉末，分子式C39H46N2O8；[α]20 D＋88.1 (0.10, MeOH)；ESI-MS (＋)/671 [M＋H]+；ECD (0.01, MeOH)max(Δ) 230 (＋10.13) nm。1H-NMR(500 MHz, methanol-4) 和13C-NMR (125 MHz, methanol-4) 數據見表1。光譜數據與文獻報道數[22]據比較，鑒定化合物10為(＋)-thalirugidine。該化合物的參考文獻中只給出了氫譜數據，沒有碳譜數據，本研究根據它的2D NMR相關，對其1D NMR數據進行了完整的歸屬。

化合物11：白色無定形粉末，分子式C39H44N2O7；[α]20 D＋75.1 (0.14, MeOH)；ESI-MS (＋)/653 ([M＋H]+)；UV (MeOH)max(log) 282 (3.61) nm；ECD (0.01, MeOH)max(Δ) 218 (＋17.24) nm；1H-NMR (500 MHz, methanol-4) 和13C-NMR (126 MHz, methanol-4) 數據見表1。光譜數據與文獻報道[23]數據比較，鑒定化合物11為（＋）-海蘭地嗪。該化合物的參考文獻中只給出了氫譜數據，沒有碳譜數據，本實驗根據它的2D NMR相關，對其1D NMR數據進行了完整的歸屬。

表1 化合物10和11的1H-NMR和13C-NMR數據

續表1

4 膽堿酯酶抑制活性研究

采用Ellman法測定所分離化合物的AChE和BuChE抑制活性[24]。樣品溶解在DMSO中；取150 μL磷酸鹽緩沖液（pH 8.0）、10 μL測試樣品和40 μL AChE（0.1 U/mL）或80 μL BuChE（0.04 U/mL）于96孔板中，37 ℃放置10 min后，分別加入10 μL DTNB（0.625 mmol/L）和40 μL乙酰基碘化硫代膽堿（0.625 mmol/L）或丁基碘化硫代膽堿（0.625 mmol/L）充分混勻，每隔30 s在405 nm下監測乙酰/丁酰硫代膽堿的水解情況，持續1 h。陽性對照組為他克林，終濃度為0.333 μmol/L；對照組為DMSO溶劑，終濃度為0.1%；所有反應均進行了3個重復。測定吸光度（）值并按公式計算各濃度下的抑制率，并計算得到樣品對AChE和BuChE的IC50值。

抑制率＝1－樣品/對照

實驗結果（表2）顯示，化合物9和10具較好的AChE抑制活性；化合物10具較好的BuChE抑制活性；其他化合物均未表現出明顯活性。

5 討論

云南省昭通市彝良縣小草壩擁有獨特的氣候和地理條件，該地區主產的烏天麻天麻素平均含量為1.42%[25]，多糖含量為26.53%[26]，具有較高的藥用和食用價值。為了充分挖掘其潛在利用價值并提供科學的理論依據，本研究對烏天麻二氯甲烷萃取部位進行膽堿酯酶抑制活性測定，結果顯示該部位有較好的膽堿酯酶抑制活性；并對二氯甲烷萃取部位的化學成分進行系統研究，共分離鑒定了11個化合物，其中化合物1～3和9～11為首次從天麻屬中分離得到。化合物9～11為異喹啉生物堿，異喹啉生物堿主要分布于罌粟科（Papaveraceae）、巴比特科（Berbidaceae）、毛茛科（Ranunculaceae）和防己科（Menispermaceae）中[27]，其結構類型復雜，藥用價值大，具有鎮痛、抗心律失常、降血壓、抗腫瘤、抗抑郁等多方面的生理活性；本研究首次從天麻屬中分離出異喹啉生物堿。

表2 化合物9、10對膽堿酯酶的抑制活性a

a其余化合物在50 μmol/L或100 μg/mL時，對AChE和BuChE抑制率低于50%

ainhibitory rates of other compounds on AChE and BuChE were lower than 50% at 50 μmol/L or 100 μg/mL

膽堿酯酶是參與中樞神經系統的一種關鍵酶，阿爾茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）等神經退行性疾病與大腦內乙酰膽堿的缺失有關，膽堿酯酶抑制劑能有效緩解AD的癥狀。所有單體化合物均進行了膽堿酯酶抑制活性測試，結果顯示化合物9和10有較好的AChE抑制活性，化合物10還有較強的BuChE抑制活性。化合物9、10均為異喹啉類生物堿，此類生物堿的膽堿酯酶抑制活性值得關注。

本研究初步揭示了烏天麻二氯甲烷萃取部位及其化學成分的膽堿酯酶抑制活性，為從烏天麻中發現具有神經保護活性的先導分子提供了新的思路。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Chemical constituents and cholinesterase inhibitory activity of dichloromethane-soluble fraction fromf.

DUAN Xiao-yan1, YAN Hui1, CHEN Yi-fang1, LUO Ji-feng1, DING Pei-chao2, TIAN Meng-hua2, WANG Yue-hu1

1. Yunnan Key Laboratory for Fungal Diversity and Green Development and State Key Laboratory of Phytochemistry and Plant Resources Sustainable Use in West China, Kunming Institute of Botany, Chinese Academy of Sciences, Kunming 650201, China 2. Zhaotong Tianma Research Institute, Zhaotong 657000, China

To study the chemical constituents and cholinesterase inhibitory activity of the dichloromethane (CH2Cl2)-soluble fraction fromf.(Orchidaceae).The Ellman method was used to determine the inhibitory activity of CH2Cl2-soluble fraction on acetylcholinesterase (AChE) and butyrylcholinesterase (BuChE). Silica gel column chromatography, Sephadex LH-20, semi-preparative HPLC and other methods were used for separation and purification. NMR and MS were used to identify the structures of the compounds. The cholinesterase inhibitory activity of all compounds was determined.The CH2Cl2-soluble fraction off.showed significant inhibitory activities on AChE (IC50= 10.45 μg/mL) and BuChE (IC50= 9.20 μg/mL). Eleven compounds were isolated from the CH2Cl2-soluble fraction by chromatography and identified as cyclo[glycine-l--(4?-hydroxybenzyl)cysteine] (1), 5′--methyl-5′-thioadenosine (2), 4-(aminomethyl)phenol (3), 4-(hydroxymethyl)phenol (4), 4-hydroxybenzaldehyde (5), 2-methylpyridin-3-ol (6), 4-[(acetyloxy)methyl] phenyl β--glucopyranoside (7), 4-(ethoxymethyl)phenol β--glucopyranoside (8), berberine (9), (＋)-thalirugidine (10) and (＋)-hernandezine (11) by spectroscopic methods.Compounds 1—3 and 9—11 are isolated fromf.for the first time. Compounds 9 (IC50= 5.93 μmol/L) and 10 (IC50= 42.49 μmol/L) showed AChE-inhibitory activity, while 10 (IC50= 21.20 μmol/L) also showed inhibitory activity against BuChE.

Orchidaceae;Bl. f.S. Chow; alkaloids; cholinesterase-inhibitory activity; berberine; (＋)-thalirugidine; (＋)-hernandezine

R284.1

A

0253 - 2670(2022)23 - 7324 - 07

10.7501/j.issn.0253-2670.2022.23.002

2022-06-12

中國科學院科技扶貧項目（KFJ-FP-201905）；云南省科技入滇項目（202003AD150005）

段曉燕，女，助理研究員，研究方向為藥用植物化學。E-mail: duanxiaoyan@mail.kib.ac.cn

王躍虎，男，副研究員，研究方向為民族藥物學和民族植物學。E-mail: wangyuehu@mail.kib.ac.cn

田孟華，男，高級工程師，研究方向為天麻栽培、質量評價及天麻健康產品研發。E-mail: tianmenghua@126.com

[責任編輯 王文倩]