雞鏈球菌的培養分離鑒定及藥敏試驗

王 宇，孫玉林

（1.官渡區動物疫病預防控制中心，云南 昆明 650201；2.昆明市技術合同認定登記站，云南 昆明 650201）

動物鏈球菌病常見于豬、牛、羊、馬、雞等。鏈球菌病的臨診表現多種多樣，可以引起各種化膿瘡和敗血癥，也可表現為局部感染[1]。藥物濫用導致的耐藥性，已經給疾病防治帶來了新問題，如何減少細菌耐藥性已經成為重點關注的問題。對患病雞病料采集、分離培養、染色鏡檢，生化實驗、病原鑒定及藥敏試驗，發現鏈球菌對環境適應能力強，易產生耐藥性，可根據藥敏結果為養殖場合理用藥提供依據，為診斷該疾病提供參考，減少養殖經濟損失。

1 材料與方法

1.1 試驗時間地點

材料病例來自昆明市某養殖場，試驗于2020年2月20日至3月20日在云南農業大學獸醫實驗室內開展。

1.2 臨床癥狀

該養殖場養雞1 000多只。主訴雞昏睡、消瘦、呼吸困難、有腹瀉，沒有任何異常情況下突然病死。死前食欲良好，沒有經過藥物治療。挑選癥狀較明顯病雞8只檢查，另外解剖病亡雞2只。

1.3 檢測方法

對病雞病變臟器取樣進行細菌分離培養、生化實驗、藥敏試驗等實驗室診斷。

2 檢測結果

2.1 細菌分離培養結果

分離培養得到的菌株在鮮血瓊脂平板上生長良好，未見明顯溶血，呈露滴狀，邊緣整齊，表面光滑、濕潤，有灰白色光澤，不透明，見輕微的α溶血環（見圖1）。

圖1 鮮血平板的菌落生長狀況

2.2 染色鏡檢結果

對所分離到的可疑菌株進行革蘭氏染色，并于10倍目鏡×100倍物鏡下鏡檢，觀察到紫色的短鏈狀（見圖2）。

圖2 分離菌株顯微鏡下形態

2.3 生化實驗結果（表1）

表1 細菌生化實驗結果

該生化指標符合鏈球菌屬生化特性。鏈球菌與乳糖、蔗糖、棉實糖、海藻糖的反應為陽性；與甘露醇、山梨醇的反應為陰性；與七葉苷反應緩慢；與水楊苷反應不明顯。從以下生化結果來看此菌為鏈球菌。

2.4 藥敏試驗結果（表2）

表2 藥敏試驗結果

按《抗菌藥物藥敏試驗判斷標準》抑菌圈≥20 mm為極敏、15（含）～20 mm為高敏、10（含）～15 mm為中敏、＜10 mm為低敏[2]。

7種藥物為極敏，藥物抑菌圈直徑分別為羧芐西林27 mm、頭孢氨芐22 mm、卡那霉素25 mm、頭孢哌酮21 mm、哌拉西林28 mm、頭孢曲松22 mm、頭孢拉定20 mm；2種高敏藥物為青霉素16 mm、新霉素18 mm；四環素14 mm為中敏。

3 討 論

3.1 結果分析討論

根據上述病死雞發病情況、臨床癥狀、細菌染色鏡檢及分離培養特性，結合生化實驗結果，判定從病料中所分離到的病原菌是鏈球菌。在雞腸道鏈球菌是正常菌群的組成部分之一，飼養環境中廣泛分布，屬于一種條件性的致病菌[3]，此次試驗沒有進行具體的分群。

3.2 發病原因與防治

此病發生與應激因素有關，如氣候變化、溫度偏低、潮濕擁擠、飼養不當、不清潔的飲水和劣質的墊料等都能導致鏈球菌病的發生[4]。因此，預防的關鍵要從減少應激因素、搞好雞舍環境衛生、抓好定期帶雞消毒、減少和消滅環境中的病原菌體，保持飲水器具清潔衛生幾方面著手[5]。

3.3 需鑒定的原因

鏈球菌病從發病季節及各種特征，臨床癥狀上與其他細菌性病極其相似，因此發病時僅靠臨床癥狀和病理變化不能準確判斷，必須通過細菌分離培養、鑒定，才能與其他易混的細菌病區別開來，并進行有效治療，才能減少相應的經濟損失。

4 結 論

通過對雞肺臟和心臟組織細菌的培養分離鑒定為鏈球菌；通過藥敏試驗得出羧芐西林、頭孢氨芐、卡那霉素、哌拉西林、頭孢哌酮、頭孢曲松、頭孢拉定對鏈球菌反應為極敏；青霉素、新霉素反應為高敏；四環素反應為中敏。