醫學院校加強生物實驗室安全教育的思考

裴 明，胡曉玥

（1.太原市衛生學校，山西 太原 030012；2.山西醫科大學，山西 晉中 030600）

實驗室生物安全是指實驗室的生物安全條件和狀態不低于容許水平，可避免實驗室人員、來訪人員、社區及環境受到不可接受的損害，符合相關法規、標準等對實驗室生物安全責任的要求。根據不同實驗室的操作內容和危害程度，應在不同等級的生物安全實驗室開展實驗活動[1]。作為一名從事病原生物學與免疫學基礎教學和科研的教師，在實驗室做實驗或課題研究過程中，如何加強學生實驗室安全意識培養，避免生物毒性因子的暴露、有毒化學藥品的泄露，有效阻止其向周圍環境和人群擴散，顯得尤為重要。因此，筆者擬從實驗前、實驗中、實驗結束后幾方面談談對加強實驗室生物安全教育的思考。

1 實驗前加強實驗安全意識教育

1.1 加強新生入學安全教育

為打造平安和諧的校園，每年新生入學教育的安全教育課程中，都將實驗室安全列入其中，這也是新生進入實驗室的第一課。教師通過介紹國內外高校發生的實驗室安全事故，使學生認識到出現事故的主要原因是違反實驗操作規程或實驗操作不當，應引起高度關注。實驗室安全事故中爆炸與火災占比最高，第二是化學有毒藥品的泄露，第三是生物安全，第四是中毒。這些事故離我們很近，時刻都有可能發生在我們身邊，因此學生要把實驗室安全意識扎根心中。

1.2 認真學習實驗室安全知識，嚴格實驗室準入制度

大多數學生進入實驗室前未經過系統的安全教育培訓，缺乏必要的實驗室安全知識。學生進入實驗室前，要了解國家的有關法律法規，如《國家危險廢物名錄》《醫療廢物管理條例》《病原微生物實驗室生物安全管理條例》《實驗室生物安全通用要求》《實驗室生物安全手冊》等，由于實驗課時的限制，這部分內容可在課前自學[2]。進入實驗室后，要認真學習相應實驗室的安全管理制度、實驗儀器設備的使用規定、實驗室的注意事項等。做實驗前組織考核，可以通過學習通App、問卷星等，以選擇題方式進行測試，合格者方可進入實驗室做實驗。通過學習和考核，學生的實驗室安全意識大大增強。

另外，嚴格實驗室準入制度。在儀容儀表上，首先要穿實驗服，摘除首飾，不留長指甲，長發應扎好，避免在實驗過程中長發遮蓋眼睛，用手整理時引發危險或使用酒精燈時燒著頭發；在實驗室不穿露腳趾的鞋，防止試劑直接滴灑在皮膚上；進行特殊實驗時要求學生穿隔離衣并戴口罩、護目鏡、防毒面具。在行為規范上，在實驗室不吸煙、不吃零食、不化妝打扮、不戴隱形眼鏡等；實驗臺上不放書包、衣服等與實驗無關的物品。

1.3 實驗教師要不斷提升個人素質

實驗教師作為實驗室的第一責任人，不僅要具備豐富的理論知識及熟練的操作技能，還要具有學習新知識的興趣和能力[3]。學校要鼓勵和組織實驗教師參加有關實驗室生物安全的交流、培訓活動，不斷更新實驗教師的實驗室安全知識，提高綜合業務素養。實驗教師在實驗室建設、管理、合理使用過程中發揮著關鍵作用，也是保證學生實驗安全的重要力量。

2 實驗中嚴格遵守實驗操作規范

2.1 根據實驗教學大綱合理安排實驗內容

學校根據實驗室和學生實際情況安排實驗教學，既要保證實驗課的開出率，又要考慮到學生實驗的安全性。教研室授課教師和實驗教師集體備課，對實驗教學內容進行調整，采取逐層遞進原則，首先設置一些基本的驗證性實驗，其次設置綜合性實驗，最后設置創新設計性實驗，在保證學生掌握實驗室基本操作技能和實驗規范的基礎上，注重培養其實踐能力和創新能力。

在病原微生物實驗室開設的驗證性實驗包括細菌的形態結構檢查法、培養基的配制、細菌的分離與培養、藥敏試驗等；綜合性實驗主要是細菌的生化實驗和鑒定；設計性實驗在實驗材料選擇上盡量選擇容易得到的、安全性能高的、學生感興趣的材料，讓學生自主設計實驗步驟、流程，不僅可以大大提高學生的實驗積極性，還能加強學生對理論知識的理解。如在人體天然防御功能實驗中，可選擇學生自己的唾液作為實驗材料，做唾液中溶菌酶的殺菌實驗。對一些操作時間長、難度大的實驗，可以選取部分內容對學生進行示范教學，這就要求教師在實驗前做更多準備工作和預實驗，也可選擇一些認真負責的學生參與進來和實驗教師共同完成，這對學生來說是一個很好的鍛煉機會，對實驗教師來說也減輕了工作量。對有可能造成學生感染的實驗，可以采用錄像教學或虛擬實驗方式，不但彌補了實驗課時的不足，還開闊了學生的視野。

2.2 在實驗中培養無菌操作意識

病原生物實驗室與其他生物實驗室有很大不同，有微生物培養，實驗過程中要嚴格按照無菌操作規范進行。如在進行細菌培養過程中，接種前要對接種環進行燒灼滅菌處理（有可能被環境中的微生物污染），接種過細菌的接種環一定要再次燒灼滅菌后再放回接種環架（避免接種環上殘留的細菌污染環境）。雖然實驗室一般選取的菌種標本是安全的，但學生在操作時可能由于不熟練導致菌種被污染，而實驗中的標本和培養物均有可能具有傳染性，要做好個人防護措施。實驗室所有用過的樣本、培養物和廢棄物應假定有傳染性，要以安全方式進行處理。任何使形成氣溶膠的危險性上升的操作都必須在生物安全柜里進行，盡可能使氣溶膠或氣霧的形成控制在最小限度，有害氣溶膠不得直接排放[4]。盡量避免使用尖銳物品（如一次性手術刀、針頭、玻璃等），使用后的利器應放入利器盒中，不能隨意丟棄。

2.3 培養嚴謹的實驗態度，養成良好的實驗習慣

良好的實驗習慣是實驗科研工作的重要組成部分，是減少實驗事故的有力保障[5]?？茖W實驗都是非常嚴謹細致的，容不得半點馬虎，實驗過程中要嚴格要求自己。

在使用水電的時候一定不要離開，萬一要離開，應請其他人幫忙照看；實驗過程中要按實驗步驟逐步完成，不要為了省時省事而同時進行幾項不可能完成的事情；隨身帶上記號筆，養成隨時做記錄的好習慣，每次記錄的數據不能隨意亂放，要及時分析；新配制好的試劑一定要及時做好標記，加入試劑前一定要混勻，以免放置時間過長試劑濃度不均，影響實驗結果；在使用天平進行測量時，不能直接把測量的藥品放在托盤里，應該在托盤里放上濾紙，再把藥品放在濾紙上；使用移液器移取溶液時要用洗耳球，禁止用口吹吸，不能甩移液管，防止移液管中的酸或堿等液體甩出傷到自己或他人；玻璃管冷凝管上套膠塞時一定要小心，不要用力過猛導致冷凝管破碎，扎傷皮膚。

使用有機高危溶劑或鹽酸等有刺激性氣味的物品時，一定要在通風櫥中進行，實驗期間要開排風扇或開窗通風；硫酸、硝酸等氧化性酸若不小心滴在身上，要用清水清洗，然后用碳酸氫鈉液洗滌，不要因為濃度低而忽視，因為隨著水分的蒸發硫酸的濃度會增高，會使原來的稀硫酸變成濃硫酸[6]。

加熱試管一定不能集中加熱，試管口不得對準人，嚴防液體過熱而沖出試管[7]；未經處理的有害微生物或有害化學品，不能直接向下水道排放，有可能污染周圍環境；用移液槍頭吸完后，應當及時取下來，以免忙亂時又用同一槍頭吸取其他試劑；移液槍千萬不能用于揮發性有機溶劑的吸取。

在進行革蘭氏染色過程中，每一步染色步驟都有嚴格的時間規定，時間不能延長也不能縮短，否則會出現錯誤的實驗結果。染色過程中使用的載玻片、蓋玻片要先放入消毒液里消毒處理，不能直接在水龍頭下沖洗，不能直接丟入生活垃圾中，防止有活的微生物存在污染環境。實驗中使用過的玻璃器皿要及時浸泡、清洗、晾干，為下次實驗做好準備。

實驗結束后，要將實驗臺上的實驗試劑統一放回原來的位置。對工作臺面進行清潔消毒，脫去手套后用液體肥皂和流動水按七步洗手法洗手，脫去實驗服，確保水、電、門窗全都關好后方可鎖門離開實驗室。這些看起來都微不足道，但一旦出現事故可能會造成不可估量的損失。良好實驗習慣的養成對于高素質人才培養非常重要，不僅可以避免很多意外事故的發生，還會對以后的生活、工作產生潛移默化的影響，使學生受益終身[8]。

2.4 實驗過程中突發事件的處理

（1）在生物實驗室中經常要注意水、火、電的安全，水龍頭不能有滴漏現象，不能用濕手碰觸電器。在明火周圍不能放易燃易爆物品，在使用電爐加熱配制培養基時燒杯、燒瓶一定要墊上石棉網，防止容器破碎液體外流引起火災，加熱容器中的液面不得超過2/3，防止液體噴出，電爐短路。使用過程中操作人員不得離開，直至加熱完畢關閉電源電爐絲冷卻后方可離開。冰箱中不能放置易揮發的溶劑，否則有爆炸的風險。實驗室突發火災（酒精燈里的酒精著火、電爐著火）的處理辦法，可以通過消防演練形式讓學生熟悉。在使用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌時，要檢查鍋內水量是否達到標準，防止燒干，加熱前檢查鍋蓋是否密封良好，還要定期檢查壓力閥門是否堵塞。干烤箱消完毒后一定要溫度降下來方可打開箱門，并帶上厚手套防止燙傷，取出所需物品后及時關好箱門。在使用離心機時，要選擇重量相等的離心管，對稱放置；離心的液體不得超過離心體積的2/3，防止液體泄漏腐蝕轉頭，發生危險；離心機工作過程中有異常聲響時立刻切斷電源，等離心機停止運轉后再靠近。這些常識可以小視頻或Flash動畫形式發送給學生，讓學生提前觀看，課堂上檢查學生掌握情況。

（2）實驗過程中如有試劑濺出、有明顯或潛在的暴露感染性材料，應及時報告實驗教師，不要擅作主張自行處理，根據實際情況進行消毒或立即按照意外事故應急預案的程序處理。

2.5 大型實驗儀器設備的使用規范化

實驗室大型儀器設備必須有專人管理，儀器負責人在使用前需經專門培訓，考核合格方可操作使用，未經允許任何人不準私自操作運行。儀器使用過程中不得私自離開，當儀器出現報警時能熟練處理，能做到安全斷電、斷水、斷氣，徹底消除因儀器故障出現的安全隱患。儀器使用完要按正確操作關機，切斷電源。實驗結束后將實驗儀器恢復到實驗前的狀態，將儀器內的樣品及時取出進行安全處理，嚴禁在儀器內存留實驗樣品。定期對實驗儀器進行安全檢查和維護，保證實驗的正常進行。教師以演示方式邊操作邊講解，學生操作時一定要有教師在旁邊指導。

3 實驗結束后廢棄物的處理

實驗室工作人員要牢固樹立環保意識，熟悉國家有關環境保護的法律法規，對醫療廢物可按《醫療廢物分類目錄（2021年版）》處理。嚴格執行國家環保制度，對進入實驗室的工作人員必須進行環保方面的安全教育，使其熟悉廢棄物處理的原則和規定[9]。每次實驗結束后，根據實驗室廢棄物的特點，做到分類收集、存放，集中處理，處理方法應簡單、易操作，處理效率高，不需要很多投資。

（1）廢棄的消毒液，有毒、有害、有腐蝕性的試劑，過期或廢棄的藥品等，不能隨意倒入水池中，應放在指定的地點分類進行無害化處理，對于含有高濃度有機溶劑的廢液應回收再用。對于某些數量較少、濃度較高的有毒有機物，可通入燃燒爐中供給充分的氧氣，使其完全燃燒，生成二氧化碳和水。對高濃度廢酸、廢堿液要經中和至中性時排放。少量有毒氣體可通過通風設備排出室外，通風管道應有一定的高度，使排出的氣體能讓空氣稀釋。產生毒氣量大時，必須經過吸收處理才能排出。如氮、硫、磷等酸性氧化物氣體可用導管通入堿液中，使其被吸收后排出[10]。自己處理不了的廢棄物可收集后交由具備相應資質的醫療廢物處置單位或危險廢物處置單位進行處置。

（2）感染性廢物，如廢棄的細菌病毒標本、培養使用后的細菌、細胞、病毒，病原體培養基和污染的試管，菌種和毒種保存液及其容器，應及時使用壓力蒸汽滅菌鍋進行消毒滅菌處理，然后按感染性廢物收集于符合環保規定的醫療廢物包裝袋中，運送至專門的處理地進行焚燒或深埋。

（3）實驗動物嚴禁帶出實驗室，如狗、兔子等不能作為寵物被領養，堅決制止實驗人員食用經無害化實驗的實驗動物，活體動物如小白鼠、青蛙、蟾蜍等實驗后要妥善保管組織標本，廢棄的動物尸體、組織器官必須統一收集、集中存放、統一及時進行處理，不得積壓在室內亂放。不得將動物尸體或器官隨意丟棄，應由專人負責收集于符合國家標準的醫療廢物包裝袋中，作為醫療廢棄物交由具有相關資質的環保部門統一處理。

（4）損傷性廢物指能夠刺傷或割傷人體的廢棄的醫用銳器，如廢棄的金屬類銳器針頭、探針、解剖刀、手術刀，玻璃類的載玻片、蓋玻片，應收集于符合《醫療廢物專用包裝袋、容器和警示標志標準》（HJ421）的利器盒中，利器盒達到3/4滿時，應當封閉嚴密，按流程運送、貯存[11]。

習近平總書記在指導抗擊新冠肺炎疫情的戰斗中強調，必須從保護人民健康、保障國家安全、維護國家長治久安的高度，把生物安全納入國家安全體系[12]。突如其來的疫情使我們深刻認識到實驗室安全的重要性，要將實驗室安全教育貫穿于實驗教學的全過程，加強培養學生實驗室生物安全意識，養成良好的實驗室安全操作習慣，不斷提高自身的生物安全素養[13]，從而更好地服務社會、服務患者。