太行雞大腸桿菌、銅綠假單胞菌和奇異變形桿菌混合感染的診治

張慶如，劉士萌，周佳雪，郝鎰涵，鄭金環，周曙光，許利軍★，王學靜，陳立功,4★，劉聚祥，4

（1.河北農業大學動物醫學院，河北保定 071001；2.保定市畜牧工作站，河北保定 071051；3.河北省畜牧獸醫研究所，河北保定 071000；4.河北省太行雞產業技術研究院，河北贊皇 051230）

大腸桿菌呈全球性分布，存在于多種哺乳動物和禽類，是人和動物腸道內的定居菌群，正常的雛雞體內，腸道中10%～15%的大腸桿菌屬于潛在致病菌。銅綠假單胞菌又稱綠膿桿菌，常分布于潮濕環境中，也可存在于人和動物的皮膚、呼吸道和腸道等部位，是引起創傷感染最常見的病原。據報道，銅綠假單胞菌與雞和火雞的多病因呼吸道病有關。變形桿菌屬的奇異變形桿菌可引起感染雞表現呼吸道癥狀、腹瀉、癱瘓、蜂窩織炎甚至死亡。表現為食欲減退、嘔吐和腹瀉等。2021年9月，河北保定某雞場飼養的太行雞發病，主要表現為呼吸道癥狀及面部腫脹。根據病理學和實驗室檢測結果，初步判定該場雞發生了大腸桿菌、銅綠假單胞菌和奇異變形桿菌的混合感染，并根據藥敏試驗結果對該雞群疾病進行了治療。本文對太行雞大腸桿菌、銅綠假單胞菌和奇異變形桿菌混合感染的發病情況、病理變化、實驗室診斷及防治措施進行了介紹，以為相關從業人員提供參考。

1 發病情況

2021年9月，保定某養殖場飼養的72日齡太行雞發病，據養殖場負責人描述，病雞最先出現打噴嚏、呼嚕、咳嗽等呼吸道癥狀，鼻腔流出少量水樣黏液，發病3天后有的病雞面部腫脹，眶下竇尤為明顯，雞群呼吸道癥狀加重，夜間尤為明顯，并開始零星死亡，每天死亡雞只10只左右。

2 剖檢病變

對病死雞進行病理剖檢，可見鼻腔積有黏液或少許干酪物（2/6）；病雞面部腫脹（3/6）：腦部皮下、頸部皮下或眶下竇呈膠凍樣浸潤或呈黃色干酪樣（5/6）。心外膜附有黃色或白色纖維素樣分泌物（4/6）；局部肺臟呈灰綠或暗紅色（2/6）；肝臟附有黃色或白色纖維素樣分泌物（3/6）；氣囊附有泡沫樣分泌物或黃白色干酪物（6/6）；氣管黏膜附有黏液或干酪物（2/6）；脾臟瘀血、輕度腫脹（2/6）；腎臟瘀血、輕度腫脹（2/6）；十二指腸和空腸黏膜出血（1/6）。其余臟器未見肉眼病變。

3 實驗室診斷

3.1 病毒分子生物學診斷

按有關文獻報道方法進行病料的研磨、除菌、RNA提取及RT-PCR檢測，瓊脂糖凝膠電泳結果表明病料均呈禽偏肺病毒、傳染性支氣管炎病毒、禽流感病毒和新城疫病毒陰性。

3.2 細菌分離鑒定

無菌操作取病雞皮下分泌物、肝臟、氣囊等病料，分別接種于TSA平板、麥康凱瓊脂平板和十六烷基三甲基溴化銨瓊脂平板上，按常規進行細菌分離培養與純化。結果表明自收集病料共純化到3種細菌。第一種純化細菌接種在麥康凱瓊脂平板上呈邊緣整齊、稍隆起、表面光滑濕潤，圓形、紅色菌落；第二種純化細菌在十六烷三甲基溴化銨瓊脂上呈扁平無定型，向周邊擴散或略有蔓延趨勢，呈灰白色，周圍有水溶性色素菌落；第三種純化細菌在TSA平板上呈同心環均勻擴展的薄膜狀生長，形成以細菌接種部位為中心的厚薄交替、同心圓型的層層波狀菌苔。選取3種純化細菌的單菌落進行革蘭氏染色、鏡檢，結果顯示：3種細菌均為革蘭氏陰性、無芽孢桿菌。

參照細菌基因組DNA小量純化試劑盒說明書提取3種分離細菌代表菌株的基因組DNA。按文獻方法進行細菌的16S rRNA基因PCR檢測，陽性PCR產物送生工生物工程（上海）股份有限公司進行雙向測序。測序結果經拼接后分別經BLAST比對，結果顯示，3種分離細菌代表菌株的16S rRNA基因分別與大腸桿菌、銅綠假單胞菌和奇異變形桿菌的同源性最高。根據上述結果，初步判斷上述3種細菌分別為大腸桿菌、銅綠假單胞菌和奇異變形桿菌。

3.3 藥敏試驗

采用紙片擴散（K-B）法檢測3.2中3種細菌對阿莫西林、林可霉素、阿米卡星、四環素、頭孢噻肟、強力霉素、多粘菌素、恩諾沙星和諾氟沙星等9種抗菌藥物的敏感性。結果表明，大腸桿菌對頭孢噻肟、阿米卡星、諾氟沙星和恩諾沙星極敏，對其他5種藥物均耐藥；銅綠假單胞菌對頭孢噻肟、阿米卡星、諾氟沙星和恩諾沙星均極敏，對四環素和強力霉素均低敏，對其余3種藥物均耐藥；變形桿菌對頭孢噻肟和諾氟沙星均極敏，對阿米卡星和恩諾沙星均高敏，對阿莫西林低敏，對其余4種均耐藥。

4 防治

根據發病雞的臨床癥狀觀察、病理學剖檢、腫頭綜合征相關病毒分子生物學檢測和細菌學診斷結果，初步判定該雞場太行雞發生了3種細菌的混合感染。建議采取措施如下：

4.1 加強雞群飼養管理

管理上應注意雞只飼養密度，避免擁擠。注意環境溫度和濕度，避免過冷、過熱、過于干燥或過于潮濕。夜晚做好雞只棲息環境的通風換氣，減少有害氣體帶來的不良應激。雞只放養后，及時徹底清除棲息環境中糞便，并做好環境、用具的消毒工作，減少雞場細菌的載量。

4.2 治療方法

發病早期，盡早進行藥敏試驗，根據藥敏結果選用表現為高敏及以上的抗菌藥物進行治療。同時添加適量維生素C，增強雞只的抗病力。

4.3 及時總結發病原因

雞只抵抗力強時，自身攜帶的條件致病菌可能不引發疾病；但在各種應激因素刺激下，細菌可以通過黏膜定植或皮膚傷口進入宿主體內，從而誘發疾病。據調查，雞群發病前1周曾注射過新流腺疫苗，免疫接種過程中使用少數針頭，棲息環境中雞只密度過大。因此該場雞細菌混感的發生可能與免疫應激、密度過大及免疫過程中不勤換針頭有關。為了防止接種疫苗時造成細菌的擴散污染，建議管理人員嚴格規范接種操作，對注射器、針頭和注射部位要進行充分消毒，并勤換針頭。