QuEChERS法檢測植物提取類化妝品中有機氯農藥殘留

宋嚴豪，肖新榮，周牧艷，羅芝伊，李思進，丁瑤

(1.南華大學 化學化工學院，湖南 衡陽 421001；2.浙江華才檢測技術有限公司，浙江 諸暨 311800)

有機氯農藥是一類被廣泛應用的殺蟲劑。生活中常見的有機氯農藥有六六六、滴滴涕、艾氏劑和狄氏劑等[1-5]，性質較穩定，不易被生物酶分解，農藥脂溶性比較強，易溶于有機溶劑中，不溶于水，可殘留在農作物、土壤、河流中很長時間，對人體造成很大的危害[6-12]。

植物提取類化妝品是以植物為原料，經提取、分離制備植物提取物或單體，再與其他原料復配而成的化妝品[13-15]。植物提取類化妝品相對于化學合成類化妝品而言，安全性較高、皮膚吸收較好、功能性更突出，但在種植過程和提取過程中的農藥殘留問題也不可忽視[16-19]。本研究建立檢測植物提取類化妝品中有機氯農藥殘留的方法。

1 實驗部分

1.1 試劑與儀器

乙腈,色譜純;丙酮、正己烷、氯化鈉、無水硫酸鎂(250 ℃烘4 h)、N-丙基乙二胺(PSA)、十八烷基硅烷鍵合硅膠(C18)、檸檬酸鈉、三水合二檸檬酸二鈉 均為分析純。六六六(α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC)、滴滴涕(o,p′-DDD、p,p′-DDD、o,p′-DDE、p,p′-DDE、o,p′-DDT、p,p′-DDT)、 艾氏劑、百菌清、環氧七氯、氟硅唑、狄氏劑、七氯,標準品均為檢測公司購買，質量濃度為1 000 mg/L。

MS-GP2010型氣相色譜-質譜聯用儀;RD-50AT2 型多管架自動平衡離心機;TG16-WS型臺式高速離心機;SPX222ZH型電子天平;UMV-2型多管漩渦混合器;XW-80A型漩渦混合器;KQ-600DE型數控超聲波清洗器;HP-5016S型水浴式氮氣吹干儀。

1.2 植物提取類化妝品

X公司所生產化妝品。

2 結果與討論

2.1 氣相色譜質譜條件

色譜柱：HP-5 ms(30 m×0.25 μm×0.25 m)檢測器：EI源，載氣：高純氮，進樣量：1 μL；柱流速：1.2 mL/min；進樣方式：不分流。內標物質：環氧七氯；進樣口溫度：280 ℃；檢測器溫度：300 ℃，程序升溫；初始溫度40 ℃(保持1 min)，再以20 ℃/min升到130 ℃，然后以5 ℃/min升高到250 ℃(保持5 min)， 再以10 ℃/min升高到300 ℃(保持10 min)。 電子轟擊源：75 eV；離子源溫度：230 ℃；GC-MS接口溫度：280 ℃；碰撞氣：氬氣；掃描方式：多反應監測方式(MRM)。

2.2 所需溶液的制備

2.2.1 標準溶液 標準儲備溶液的配制：分別準確稱取10 mg(精確至0.1 mg)農藥標準品置于10 mL容量瓶中，用丙酮溶解定容至刻度線，振蕩使其充分混勻轉移至棕色標品瓶中，在4 ℃下避光保存。混合標準溶液的配制：從每個標準儲備溶液中分別移取一定量的標準溶液在10 mL容量瓶中，用丙酮定容至刻度線，配成混合標準溶液，振蕩使其充分混勻轉移至棕色標品瓶中，在4 ℃下避光保存。根據實驗需要進行稀釋，配制為0.05,0.1,0.2,0.3,0.5 mg/L 的梯度混合標液，現配現用。

2.2.2 待測樣品溶液的制備 提取：稱取5.00 g樣品(精確至0.01 g)，在50 mL離心管中。加入10 mL 乙腈溶液，在多管渦旋混合器中渦旋5 min，靜置等乙腈層與水層分離后，再稱取3 g無水硫酸鎂和2 g氯化鈉，1.00 g檸檬酸鈉，0.50 g檸檬酸氫二鈉搖勻，在渦旋混合器中渦旋5 min，超聲30 min， 放入離心機中4 000 r/min離心5 min。

濃縮：取上清液2 mL于15 mL離心管中，40 ℃水浴氮吹至近干，用2 mL丙酮復溶，再置于裝有(150 mg MgSO4,50 mg PSA,80 mg C18)的凈化離心管中，渦旋振蕩1 min，在9 000 r/min下離心2 min，準確吸取1 mL到進樣瓶中，渦旋混合后用于GCMS的測定。

3 方法驗證

3.1 方法的線性關系和檢出限

在優化后的前處理條件下，用面膜空白的樣品基質提取液分別配制質量濃度為0.05,0.1,0.2,0.3,0.5 mg/L的5組混合基質標準溶液。各目標化合物的定量離子峰面積和內標物定量離子峰面積的比值為縱坐標，各目標化合物標準溶液的質量濃度和內標物質量濃度的比值為橫坐標，繪制標準曲線。取信噪比S/N=3的空白樣品添加濃度確定檢出限，取信噪比S/N=10的空白樣品添加濃度確定定量限。18種有機氯農藥在化妝品基質中的響應值和含量均呈良好的線性關系，結果見表。線性相關系數R均≥0.995，線性范圍為0.05～0.5 mg/kg，檢出限為0.006～0.059 mg/kg。定量限為0.018～0.190 mg/kg。該方法滿足多農殘檢測要求。

表1 面膜基質中18種有機氯農藥的線性方程、相關系數、檢出限Table 1 Linear equations,correlation coefficients and detection limits of 18 organochlorine pesticides in the mask matrix

3.2 方法加標回收率和精密度

實驗在面膜空白基質中加入18種有機氯農藥混標進行回收率實驗。添加水平分別為0.1，0.2，0.5 mg/L的濃度。每個樣品加標后靜置20 min，保證樣品與農藥混標充分混合。采用優化后的方法進行前處理，每個添加水平重復測定6次,經過儀器分析后，得到以下數據。面膜基質回收率在75.23%～107.49%之間，相對標準偏差2.37%～6.31%，從實驗結果看，加標回收率在70%～120%之間，相對標準偏差均低于7%，可以滿足農藥多殘留檢測的需求。

表2 18種有機氯農藥在面膜中3個添加水平下的平均回收率及精密度Table 2 Average recovery rate and precision of 18 kinds of organochlorine pesticides at three levels of addition in the mask

4 討論

(1)本實驗采用QuEChERS法，優化有機氯農藥殘留檢測的前處理方法，并將其用于植物提取類化妝品中的有機氯農藥殘留檢測，該方法有快速、簡便、經濟、高效、耐用和安全等優點。采用乙腈作為溶劑，加入2 g氯化鈉、3 g無水硫酸鎂、1 g檸檬酸鈉、0.5 g檸檬酸氫二鈉進行提取，凈化劑：150 mg MgSO4、50 mg PSA、80 mg C18。結果18種有機氯農藥的線性范圍為0.05～0.5 mg/kg，線性相關系數均≥0.995，檢出限為0.006～0.059 mg/kg，定量限為0.018～0.190 mg/kg。在0.1,0.2,0.5 mg/L三個濃度下加標回收率在75.23%～107.49%之間，相對標準偏差RSD在2.37%～6.31%之間。實驗結果也符合檢測相關標準的要求，證明此實驗方案有一定的可行性和創新性。

(2)從當前來看，以植物為原料的化妝品符合人們的消費需要，也迎合了市場發展趨勢，不過植物的成分復雜，本身有一些有害成分存在，同時生長過程中使用農藥的植物中也含有部分農藥殘留，這就會影響植物提取類化妝品在市場上的使用安全問題。在報道的農藥殘留檢測中，色譜-質譜聯用技術有靈敏度高、重復性好、定量檢測能力強等特點，是目前最常用的檢測手段。相信隨著科技和分析技術的發展，出現更加簡便、準確、高效的檢測技術，市場上也會研發出更加綠色、安全的植物提取類化妝品，為消費者的安全提供保障。