VEGF、HIF-1α 在乳腺癌患者組織中的表達及臨床意義

應利俠 尚玲 馮瑞雪

（淅川縣人民醫院病理科，河南 南陽 474450）

乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一。乳腺癌病因比較復雜，包括遺傳、激素、生殖、營養、環境等各個方面。乳腺癌早期癥狀不明顯，多數患者確診時已達到中晚期，發生遠處轉移，錯過手術最佳治療時機，影響治療效果，增加病死風險。腫瘤細胞浸潤深度、淋巴結轉移等病理特征與預后有關。因此，尋找可準確評估乳腺癌臨床特征的指標十分必要。

王陽等報道，新生血管的形成可為腫瘤細胞生長提供所需的營養物質，促進腫瘤形成、增殖、浸潤、轉移與復發，與腫瘤預后有關[1]。血管內皮生長因子（VEGF）是一種促血管內皮細胞生長因子，可促進血管內皮細胞增殖，誘導蛋白水解酶、組織因子等的形成，為血管新生創造良好的前提條件[2]。缺氧誘導因子-1α（HIF-1α）是具有轉錄活性的核蛋白，可調控VEGF 的合成與分泌，進而促進新生血管的形成[3]。

因此，推測VEGF、HIF-1α 可能與乳腺癌臨床病理特征有關。本研究主要分析VEGF、HIF-1α 蛋白在乳腺癌患者組織中的表達及臨床意義。現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2018 年9 月至2021 年3 月期間于本院經病理組織確診的78 例乳腺癌患者組織標本及其癌旁正常乳腺組織標本作為研究對象，研究內容符合醫院醫學倫理委員會相關規范，且病例資料查閱經患者及家屬知情同意。

納入標準：乳腺癌符合《中國抗癌協會乳腺癌診治指南與規范（2015 版）》[4]中相關規定，且經病理學檢查確診；術前未接受相關放化療、內分泌治療；病理組織保存完好；病例資料完整，包括本研究所需資料。排除標準：合并其他惡性腫瘤；合并乳腺炎、乳腺囊性增生等其他乳腺疾病；腫瘤復發。

1.2 方法

1.2.1 VEGF、HIF-1α 蛋白檢測與結果判定

收集患者手術切除的病灶組織及距病灶5 cm的正常乳腺組織標本，用10%的中性緩沖福爾馬林固定后，常規脫蠟至水、透明、包埋、切片（厚4 μm），采用免疫組化法對切片進行染色，檢測標本中VEGF、HIF-1α 蛋白表達情況，試劑盒選自上海長島生物技術有限公司，所有操作均嚴格按照試劑盒說明進行。

結果判定標準：免疫組化染色切片由2 名經驗豐富的檢驗科醫生獨立判讀，并綜合判斷得出一致結果；VEGF、HIF-1α 蛋白陽性判定標準：①染色強度計分：無著色計0 分，淺黃色計1 分，棕黃色計2 分，棕褐色計3 分；②染色數目計分：1%以下計0 分，1%-10%計1 分，11%-50%計2分，51%-75%計3 分，＞75%計4 分。將染色強度與染色數目計分乘積作為最后結果，≤2 分為陰性，＞2 分為陽性。

1.2.2 臨床特征資料搜集分析

查閱資料，收集患者年齡（≤50 歲、＞50歲）、分化程度（低、中/高）、腫瘤直徑（≥3 cm、＜3 cm）、病理組織類型（非浸潤性癌、浸潤性癌）、淋巴結轉移（有、無）等資料。

1.3 觀察指標

對比乳腺癌患者的病灶組織與癌旁正常乳腺組織中VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達率；分析對比不同臨床特征的乳腺癌患者病灶組織中VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達情況；病灶組織中VEGF、HIF-1α蛋白陽性表達對乳腺癌患者淋巴結轉移的評估價值。

1.4 統計學方法

采用SPSS24.0 軟件處理數據，計數資料用n（%）表示，采用χ2檢驗，若期望值＜5，采用連續校正卡方檢驗；繪制受試者工作特征曲線（ROC），并計算曲線下面積（AUC）值，以檢驗VEGF、HIF-1α 蛋白對乳腺癌患者淋巴結轉移的評估價值，AUC 值＞0.9 表示評估價值較高，0.71-0.9 表示有一定評估價值，0.5-0.7 表示評估價值較差，＜0.5 表示無評估價值；檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.1 病灶組織與癌旁正常乳腺組織中VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達率

病灶組織中VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達率均高于癌旁正常乳腺組織（P＜0.05）。見表1。

表1 病灶組織與癌旁正常乳腺組織中VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達率（n(%),總例數=78）

2.2 不同臨床特征的乳腺癌患者病灶組織中VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達情況

有淋巴結轉移的患者病灶組織中VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達率高于無淋巴結轉移的患者（P＜0.05）；其他不同臨床特征的患者VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達率對比，差異無統計學意義。見表2。

表2 不同臨床特征乳腺癌患者病灶組織中VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達情況

2.3 病灶組織中VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達對乳腺癌患者淋巴結轉移的評估價值

將乳腺癌患者淋巴結轉移情況（“1”=有，“0”=無）作為狀態變量，將病灶組織中VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達情況作為自變量并賦值（“1”=陽性，“0”=陰性），繪制ROC 曲線（見圖1），結果顯示，病灶組織中VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達對乳腺癌患者淋巴結轉移評估價值的AUC 分別為0.723、0.727，均有一定評估價值。見表3。

圖1 病灶組織中VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達對乳腺癌患者淋巴結轉移評估價值的ROC 曲線

表3 病灶組織中VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達對乳腺癌患者淋巴結轉移的評估價值

3 討論

隨著腫瘤細胞的不斷增殖及癌細胞對周圍正常組織的侵襲，乳腺癌患者可能會引發全身惡病質、呼吸困難、骨痛等嚴重并發癥，威脅患者生命安全。因此，盡早對乳腺癌病情做出準確診斷具有重要意義[4]。

本研究結果顯示，VEGF、HIF-1α 蛋白在乳腺癌患者組織中陽性表達率較高，且有淋巴結轉移的患者病灶組織中VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達率更高，進一步繪制ROC 曲線結果顯示，病灶組織中VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達對乳腺癌患者淋巴結轉移均有一定診斷價值，提示VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達情況可能對評估患者淋巴結轉移情況具有積極意義。分析原因為，VEGF 陽性表達可增加血漿酶原活化因子的mRNA表達，提高血漿酶原活化因子活性，促進細胞外基質水解，并能刺激非增殖血管內皮細胞增生，促進新生血管生成，為腫瘤發生、發展提供養分，從而促進腫瘤細胞增殖、侵襲與轉移，增加淋巴結轉移風險[5-6]。HIF-1α 蛋白可與細胞DNA 中的缺氧反應元件HIF-1α 蛋白結合位點相結合，促進VEGF、一氧化氮、糖酵解酶等下游基因的轉錄，促進新生血管網的形成，進而促進腫瘤細胞形成、增殖與轉移，增加淋巴結轉移發生風險[7-8]。

綜上所述，VEGF、HIF-1α 蛋白在乳腺癌患者組織中陽性表達率較高，檢測病灶組織中VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達有助于評估患者淋巴結轉移情況。