樸凱偉,趙玉龍,崔明禮,陳禹宏,顧鑫
(遼寧省撫順市現代農業及扶貧開發促進中心,遼寧 撫順 113006)
遼細辛又稱細參、東北細辛等,為馬兜鈴科,細辛屬多年生草本植物,為常用中藥,具有解表散寒、祛風止痛、通竅、溫肺化飲等功效,可用于治療風寒感冒、鼻塞流涕、痰飲喘咳、風冷頭痛、風濕痹痛等。
遼細辛生長周期較長,生長期病害發生嚴重,難以控制[1]。傳統繁育方式速度慢,無法滿足市場需求,可利用組培快繁技術,在較短時間內達到了高效誘導外植體分化增殖的目的,在保存母體優良性狀和遺傳性狀穩定的同時,提高了種苗的抗病性能和繁殖效率[2]。
撫順市園藝科學研究所組培快繁試驗室。
1.2.1 試驗材料選取。晴朗天氣,取遼細辛帶芽根狀莖,剪成2~3 cm 節段,洗去表面泥土后流水沖洗30 min,置于超凈工作臺中,用70%酒精消毒20 s 后,再用0.1%HgCl2消毒5~8 min,無菌水沖洗5 次后,將莖段兩端切除后接種于初代培養基中。
1.2.2 建立無菌系初代培養。初代培養基以MS 為基礎培養基,附加濃度為1.0~3.0 mg/L 的6-BA、濃度為0.3 mg/L的NAA、蔗糖30 g/L、瓊脂7 g/L,pH 值6.8,放置在光照培養室中培養[3]。每天光照14 h,照度2000 lx,溫度控制在24~26℃,觀察培養效果。
1.2.3 繼代培養及不定芽誘導。初代培養的遼細辛頂端長出新芽、基部膨脹生長出淺綠色愈傷組織后,切取愈傷組織接種到以MS 為基礎培養基,附加濃度為1.0~3.0 mg/L 的6-BA和濃度為0.3 mg/L 的NAA 進行繼代培養。培養到一定數量后再接種到以MS 為基礎培養基,附加濃度為0.5~1.5 mg/L 的6-BA 和濃度為0.1~0.2 mg/L 的NAA 的誘導培養基中誘導不定芽。……