吳紫燕,糜 芳,干華磊,張瑩瑩,袁東華,吳家勝,毛偉力
一株具有促生溶磷功能的木霉菌Tr940的篩選及其在番茄上的應用
吳紫燕,糜芳,干華磊,張瑩瑩,袁東華,吳家勝,毛偉力
(上海萬力華生物科技有限公司,上海 201611)
【目的】旨在獲得具有促生、防病、溶磷等多功能應用潛力的木霉菌微生物肥料活性菌株。【方法】采用鉬銻抗比色法篩選156株木霉菌的溶磷活性,同時通過平板對峙試驗測定其拮抗性能,以及結合室內盆栽試驗測定溶磷活性最高的Tr940、Tr968、Tr1003B、Tr1077 4株木霉菌對番茄幼苗的促生作用。【結果】1)供試木霉菌均能不同程度地從磷酸三鈣中釋放出一定量的可溶性磷。其中溶磷活性在100 mg/L以上的木霉菌有14株,溶磷活性最高的木霉菌Tr940溶磷含量為485.45 mg/L。2)14株溶磷效果好的木霉菌對番茄灰霉病菌()、草莓炭疽病菌()、番茄早疫病菌()、番茄猝倒病菌()、水稻紋枯病菌()和玉蜀黍赤霉病菌()等植物病原菌均有不同程度的拮抗效果。3)4株溶磷木霉菌Tr940、Tr968、Tr1003B、Tr1077與空白對照相比較對番茄幼苗的根長、株高、地上鮮質量、地上干質量、地下干質量都有顯著性差異,其中溶磷木霉菌Tr940的促生效果最佳。4)4株木霉菌Tr940、Tr968、Tr1003B、Tr1077都能提高番茄產量,小區試驗30 d增產率分別達到24.02%、18.67%、19.32%、16.54%。Tr940還可以提高番茄的品質,包括可溶性固形物、含糖量、維生素C。【結論】木霉菌Tr940具有促進番茄幼苗生長,提高番茄產量和提升番茄品質的功效;同時其溶解有效磷含量為485.45 mg/L,符合開發溶磷微生物肥料的技術指標。
溶磷木霉菌;溶磷活性;促生作用
【研究意義】隨著人們對環保、能源問題的日益重視,生態、有機、綠色以及可持續農業迅速發展,研究新型微生物肥料代替化學肥料,因其能減少化肥用量、保護生態環境、活化土壤有機質、維持土壤生態平衡,并能提高產品品質和產量帶來經濟效益等優點,對我國農業可持續發展具有重要意義[1-3]。在農業生產過程中,磷作為植物生長發育過程中所必需的營養元素,參與植物體內絕大部分的新陳代謝過程,磷還存在于各類酶中參與其功能和活性調節,對植物生長起著十分重要的作用[4]。有研究表明,我國約74%的農田耕地都缺少磷元素,且土壤中95%以上的磷元素是不溶性磷,難以直接被植物吸收利用[5]。主要靠施用有機和化學磷肥作為土壤磷的主要來源,但由于土壤礦物質Ca2+、Fe3+、Fe2+、Al3+等會與磷元素結合,起到吸附和固定作用,往往會形成難溶性的無效磷酸鹽,導致施入的磷肥當季利用率只有5%~25%[6-7]。磷肥主要來自磷礦石,中國磷礦資源較多但磷礦質量較差,且磷礦粉是不可再生資源,將在100年內耗完[8]。因此,如何增加土壤中可溶性磷元素含量,提高磷肥利用率,是農業亟待解決的問題。【前人研究進展】早在1908年人們就開始了對溶磷菌的研究[9]。目前研究較多的溶解磷酸鹽的菌株有芽孢桿菌屬、埃希氏菌屬、假單胞屬、鏈霉菌屬、青霉屬、曲霉屬等[10-12]。1935年,前蘇聯學者蒙金娜從土壤中分離篩選的巨大芽孢桿菌(),1947年應用于生產后發現接種該菌株于土壤后,能增加15%以上的土壤可溶性磷含量[13]。梁艷瓊等[14]分離的溶磷菌株黑曲霉培養144 h溶磷量可達511.28 mg/L。王勇等[15]從土壤中分離了4株溶磷菌,其中紡錘形賴氨酸芽孢桿菌LW-3(lysini-bacllus fusiformis LW-3)溶磷效果最強,溶解無機磷量和有機磷含量分別為19.06 μg/mL、17.06 μg/mL。大量試驗證實,向土壤中施用溶磷菌,既能增加作物對磷元素的吸收,提高磷肥的利用率減少農業資源浪費,還能進一步提高作物產量。營麗萍等[16]研究已證實具有植物病害生防功能的木霉菌REMI轉化子在液體純培養條件下具有溶磷的功能,并初步分析木霉菌的解磷機質可能與代謝過程中分泌的質子有關。楊合同等[17]對244株木霉菌對峙培養發現其中114株木霉菌對棉花枯萎病具有拮抗能力,同時采用固體培養檢測木霉的解磷、鉀、固氮能力,其中有74株能夠水解磷酸鈣,該研究結果表明多數木霉在固體和液體培養條件下具有解磷作用。【本研究切入點】木霉菌()是一類普通存在于土壤中具有防病和促生效果的生防菌。因此,開發具有溶磷功能的木霉菌,不僅可以解決土壤磷元素不足的問題,同時能起到促生和防病的作用,達到“一菌三用”的效果。【擬解決的關鍵問題】論文通過篩選木霉菌的溶磷活性,結合平板拮抗試驗、盆栽試驗和小區試驗,以期篩選出溶磷活性高且有拮抗和促生效果的木霉菌株,為進一步開發微生物肥料提高理論基礎,也為微生物肥料的應用和推廣提供了理論實踐和指導意義。
1.1.1 供試植株 番茄植株:浦粉1號。
1.1.2 供試藥劑 木霉菌發酵液:Tr940、Tr968、Tr1003B、Tr 1057、Tr1077、Tr1083、Tr1200、Tr1447B、Tr1454C、Tr1457、Tr1460B、Tr1467B、Tr1468C、Tr1490B,菌株保存在上海萬力華生物科技有限公司木霉菌菌種庫中。
1.1.3 供試土壤 基質土(m草炭﹕m蛭石﹕m珍珠巖=3﹕1﹕1)。
1.1.4 供試地點 穴盤育苗:上海萬力華生物科技有限公司溫室。小區試驗:上海浦東新區卉綠農場。
1.1.5 供試培養基 磷酸三鈣無機磷培養基(PKO培養基):葡萄糖10 g,硫酸銨0.5 g,氯化鈉0.3 g,氯化鉀0.3 g,硫酸鎂0.3 g,硫酸亞鐵0.03 g,四水硫酸錳0.03 g,磷酸三鈣10 g,瓊脂15~18 g,蒸餾水1 000 mL,pH 7.0~7.5。
馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基(PDA),取新鮮馬鈴薯200 g,洗凈去皮切成小塊,加水煮沸20~30 min(能被玻璃棒戳破即可),然后用4層紗布過濾,加入葡萄糖20 g、瓊脂20 g,蒸餾水1 000 mL。pH自然,用于接種木霉菌。0.05%脫氧膽酸鈉PDA,用于測定木霉菌定殖。
1.1.6 供試試驗器皿及儀器 燒杯、量筒、培養皿、接種針、打孔器、三角瓶、酒精燈、血球計數板、超凈工作臺、恒溫培養箱、PCR儀、搖床、恒溫水浴鍋、渦旋振蕩器等。
1.2.1 木霉菌株活化 從菌種庫中取出木霉菌的甘油管,38 ℃水浴中快速復蘇并適當快速搖動,直到甘油管全部溶解。在超凈工作臺上開啟凍存管,將菌種移至PDA上制成三明治平板并放置于28 ℃培養,待菌絲長出三明治后立刻轉接至PDA平板,28 ℃培養5 d后收獲平板備用。
1.2.2 溶磷木霉菌的篩選 將木霉菌接種在PDA培養皿培養5 d后,刮取培養皿上孢子并鏡檢調整至孢子量為1×108cfu/mL,接種2 mL至1 000 mL三角瓶中,每瓶中裝有200 mL 磷酸三鈣無機磷液體培養基,空白對照接種2 mL蒸餾水。置于28 ℃,200 r/min搖床培養7 d,根據鉬銻抗比色法測定上清液中有效磷含量,根據磷標準曲線計算出溶磷量,測定培養液的pH值。實驗設置3組重復。
1.2.3 溶磷木霉菌平板對峙試驗 采用對峙培養法,在靶標病原菌平板菌落邊緣用滅菌打孔器取直徑5 mm的菌塊,置于90 mm PDA平板一側20 mm處,另一側相同位置接種同樣大小的木霉菌菌塊。空白對照只將病原菌單獨接種在PDA平板上,將測試平板放置在適宜病原菌生長的溫度培養箱中進行培養,每個處理3次重復,96 h后測量病原菌菌落直徑,并根據以下公式計算抑菌率:
抑菌率=[(對照平均直徑-處理平均直徑)/對照平均直徑]×100%(1)
1.3.1 穴盤育苗試驗設計 育苗試驗于2019年11月14日至2019年12月31日,試驗共設計5個處理組:(1)Tr940發酵液處理組;(2)Tr968發酵液處理組;(3)Tr1003B發酵液處理組;(4)Tr1077發酵液處理組;(5)空白對照清水組。每個處理3次重復,每個平行1個育苗穴盤。具體參照表1。
將4種木霉菌發酵液調整為2×108cfu/mL,播種前將木霉菌與育苗基質按照1 L/300 kg的比例進行混合,并保持基質的濕度在80%以上。待種子長出2~3片葉子后,取2×108cfu/mL木霉菌發酵液稀釋300倍,噴淋一遍。
番茄種子,先用水浸泡4~5 h,使其充分吸收水分,以利于萌發;浸泡后的種子轉移放有基質土的育苗穴盤中,穴盤為18×9孔盤。穴盤放置在人工氣候培養箱中培養,設置12 h黑暗、溫度25 ℃、濕度95%和12 h光照4 000 lux、溫度25 ℃、濕度95%的培養條件循環往復,觀察番茄幼苗的發芽和發病情況。
在育苗10 d后,統計各處理的發芽率,育苗45 d后統計各處理發病率。育苗試驗過程中不施用植物生長調節劑和肥料,其余同一般農事管理。

表1 溶磷木霉菌促生效果穴盤育苗試驗設計
1.4.1 發芽率和發病率統計
發芽率=發芽數/播種總數×100%(2)
發病率=發病數/處理發芽總數×100%(3)
1.4.2 統計并測定穴盤番茄植株生理指標 植株育苗45 d后,對每個處理的植株測定根長、莖粗、株高、葉片數和地上、地下部分鮮質量。利用直尺測量地面至植株頂端距離為株高;植株清洗晾干后稱量的質量為鮮質量。植株清洗烘干后稱量的質量為干質量。
1.5 溶磷木霉菌促生效果小區試驗設計 試驗設5個處理,每處理重復3次,共15個小區,每小區面積(長×寬)=5 m×2 m=10 m2,約為20株左右,小區間設有1 m保護行,5個處理按區組隨機排列(表2)。小區產量:從采收開始起每6 d采收1次商品果,統計30 d(5次)小區產量。番茄品質測定:可溶性含糖量采用蒽酮試劑法[18]、可滴酸采用酸堿滴定法測定[18]、維生素C含量測定采用2,6-二氯酚靛酚滴定法及可溶性固形物[18]采用手持式折光儀測定法。

表2 溶磷木霉菌促生效果小區試驗設計
采用真菌DNA抽提試劑盒(生工生物工程(上海)股份有限公司)對待鑒定的木霉菌菌株基因組DNA進行抽提。DNA 的PCR 擴增采用真菌rDNA-ITS通用引物ITS4和ITS5同時采用Tef1α序列通用引物Ef728M和Tef1R。抽提出的菌株DNA產物交給生工生物工程(上海)股份有限公司進行測序,測序結果通過DNA SEQ軟件分析后導入NCBI 的GenBank中對所測定的菌株的種屬關系和小種名進行分析。選同源性較高的菌株的序列和OK284581.1作為外群,基于rDNA ITS序列利用MEGA6.0 軟件構建N-J 系統進化樹,其Bootstrap值設為1 000 次重復[19]。
2.1.1 磷標準曲線的繪制 以0,0.2,0.4,0.8,1.0,1.2,1.6,2.0 mg/L磷標準系列溶液,與空白對照在波長700 mm下同時比色,測定其吸光度。以測得的吸光度為縱坐標,磷標準濃度為橫坐標,繪制磷標準曲線(圖1),標準曲線方程為=0.287-0.004 8。

圖1 磷標準曲線
2.1.2 溶磷木霉菌的溶磷活性測定結果 為了測定木霉菌溶無機磷的能力,采用鉬銻抗比色法測定不同溶磷木霉菌的溶磷量。試驗采用磷酸三鈣作為無機磷的唯一磷源來測定木霉菌溶無機磷能力的多少。試驗測試了156株木霉菌的溶磷效果,其中14株溶磷木霉菌有機磷含量在100 mg/L以上的測定結果見表3,占比8.97%。結果表明,木霉菌株幾乎都具有溶磷活性,但不同的菌株之間溶磷效果有顯著性差異。其中菌株Tr940溶磷含量最高,為485.45 mg/L;其次為Tr1003B溶磷含量為420.11 mg/L,Tr1077溶磷含量為371.89 mg/L,Tr968溶磷含量334.98 mg/L。

表3 14株木霉菌的溶磷效果
同列數據后不同小寫字母表示差異顯著(<0.05,Ducan’s新復極差法)。
試驗結果見表4,14株解磷木霉菌對供試植物病原均有一定的拮抗作用,其中Tr940、Tr968、Tr1083的拮抗指數平均值最高在4,對6種病原菌均有明顯的拮抗作用。Tr1003B、Tr1077、Tr1200、Tr1447B、Tr1454C、Tr1457、Tr1460B、Tr1468C的拮抗指數平均值在3到3.83之間,對供試的6種病原菌其中4到5種有較好的拮抗效果。Tr1057、Tr1467B、Tr1490B的拮抗指數平均值在2點多,對供試病原菌的拮抗效果較差,只對其中2到3種病原菌具有拮抗作用。

表4 溶磷木霉菌對靶標病原菌的拮抗指數
每個穴盤總播種數172株,處理1~5對應的處理藥劑見表5。從表5中的數據可以看出,5種處理的番茄幼苗都沒有發病現象且發芽率沒有顯著性差異。

表5 木霉菌番茄幼苗出芽率和發病率的影響
同列數據后不同小寫字母表示差異顯著(<0.05,Ducan’s新復極差法)。
從表6中數據可知,番茄幼苗根長最長的為71.13 mm,處理1、2、3的根長(69.10,71.13,66.13 mm)長度接近,顯著高于處理4(64.63 mm)的根長,同時處理4顯著高于處理5(47.00 mm)的根長;番茄幼苗莖粗最粗為2.75 mm,處理1、3的莖粗(2.75,2.74 mm)接近,顯著大于處理2、4(2.63,2.61 mm),處理2、4莖粗又顯著大于處理5的莖粗(1.88 mm);番茄幼苗株高最高的為114.63 mm,處理1、2的株高(114.63,113.73 mm)高度接近,顯著高于處理3的株高(112.13 mm)且處理3的株高顯著高于處理4的株高(104.27 mm),處理4的株高顯著高于處理5的株高(63.53 mm);番茄幼苗地上鮮質量部分為7.68 g,處理3地上鮮質量(7.68 g)顯著高于處理1、2(7.16和7.19 g),處理1、2的地上鮮質量接近,顯著高于處理4(6.46 g)的地上鮮質量,處理4的地上鮮質量顯著高于處理5(2.08 g);番茄幼苗地下鮮質量最高為1.83 g,處理3的地下鮮質量(1.83 g)顯著高于處理4(1.53 g),處理4地下鮮質量顯著高于處理1(1.37 g)和處理2(1.39 g),處理1、2地下鮮質量接近,顯著高于處理5;番茄幼苗地上干質量部分最高為0.60 g,處理3地上干質量(0.60 g)顯著高于處理1、2(0.56和0.54 g),處理1、2的地上干質量接近,處理1地上干質量顯著高于處理4(0.50 g)的地上干質量,處理4的的地上干質量顯著高于處理5的地上干質量(0.16 g);番茄幼苗地下干質量最高為0.14 g,處理1、2、3、4的地下干質量(0.13,0.13,0.14,0.13 g)接近,顯著高于處理5(0.03 g)。

表6 穴盤育苗試驗中木霉菌對番茄幼苗的促生效果
同列數據后不同小寫字母表示差異顯著(<0.05,Ducan’s新復極差法)。
結果表明:溶磷木霉菌處理1、2、3、4的種子和幼苗,其苗長勢比較旺盛,根系發達,葉片顏色亮綠,根長、莖粗、株高、地上鮮質量、地上干質量和地下干質量等生物學性狀明顯優于處理5空白對照。綜合評估生物學指標可知,處理1 Tr940發酵液處理的番茄幼苗促生效果最佳。

表7 溶磷木霉菌對番茄產量的影響
同列數據后不同小寫字母表示差異顯著(<0.05,Ducan’s新復極差法)。

表8 溶磷木霉菌對番茄品質的影響
同列數據后不同小寫字母表示差異顯著(<0.05,Ducan’s新復極差法)。
從表7可知,溶磷木霉菌Tr940(處理1)可以提高番茄產量,小區試驗30 d增產率達到24.02%。Tr968(處理2)、Tr1003B(處理3)、Tr1077(處理4)也能提高番茄產量。增產率分別在18.67%、19.32%、16.54%。從表8可以看出Tr940(處理1)還可以提高番茄的品質,包括可溶性固形物、含糖量、維生素C。
溶磷木霉菌經ITS和Tef1α序列分子鑒定結果確定:篩選的14株木霉菌株,分屬于3種木霉。Tr940、Tr968、Tr1003B、Tr1447B、Tr1454C、Tr1457、Tr1490B為擬康寧木霉菌(),Tr1057、Tr1460B為深綠木霉菌(),Tr1200、Tr1467B、Tr1468C為棘孢木霉菌()。同時通過Blast將基因序列進行同源性比對,比對其種屬關系(圖2)。

圖2 基于rDNA ITS序列構建的14株木霉菌的系統發育樹
土壤中溶磷微生物種類繁多,目前研究溶磷微生物主要有青霉屬、曲霉屬以及放線菌和芽孢桿菌屬等。其中溶解磷酸三鈣的巨大芽孢桿菌是發現最早、解磷效果最好的、使用推廣面積最多的細菌[20]。溶磷真菌相比溶磷細菌,在種類和數量上占比都比較少,從同一土壤上分離的溶磷細菌數量可能是溶磷真菌的數倍、十倍甚至百倍之多[21]。但真菌的溶磷能力一般要大于細菌,據Kucey[22]報道,真菌的溶磷效果一般是細菌的10倍,許多細菌在純化過程中可能會丟失溶磷能力,而真菌則一直保持其溶磷的功能。黑曲霉和青霉菌具有很好溶磷效果是目前研究和報道比較多的溶磷真菌,但由于它們是多種植物的病原菌,在土壤和空氣中大量存在的情況下可導致果實霉爛、根系腐爛等[23-25]。因此黑曲霉和青霉菌不適宜作為溶磷菌在土壤中直接施用。
利用微生物對土壤磷元素的轉化和再利用,是一種低成本、低耗能的高效生物轉化方式。具有溶磷功能的木霉菌可以提高土壤中難溶磷的利用,使其進入生物再循環[26]。試驗以磷酸三鈣作為唯一磷源,在難溶性磷源的培養條件下,通過鉬銻比色法測定了接種溶磷木霉菌前后的培養基中可溶性磷的含量。從156株木霉菌中篩選出14株溶磷能力在100 mg/L的具有溶無機磷能力的木霉菌,并對其進行平板拮抗試驗和分子鑒定。進一步篩選4株溶磷效果最好的木霉菌測試其在番茄育苗期間施用后的功效,結果表明:4株溶磷木霉菌Tr940、Tr968、Tr1003B、Tr1447B都能夠有效促進番茄幼苗的生長,通過對番茄幼苗生物學性狀的研究,可知Tr940對番茄幼苗的促生效果最佳。其能有效提高番茄幼苗的根長、株高,增加番茄幼苗地上部分鮮質量、地上干質量和地下干質量。最后通過小區試驗測試了4株溶磷木霉菌對番茄品質和產量的影響,結果表明:4株溶磷木霉菌Tr940、Tr968、Tr1003B、Tr1447B都能夠有效促進番茄產量的提高,同時Tr940還可以提高番茄的品質,包括可溶性固形物、含糖量、維生素C。
試驗篩選的溶磷木霉菌有效磷含量最高為Tr940達485.45 mg/L,試驗中選用Tr940、Tr968、Tr1003B、Tr1447B的4株木霉菌有效磷含量分別為485.45,420.11,371.89,334.98 mg/L。參照NY/T 1847—2010《微生物肥料生產菌株質量評價通用技術要求》,溶磷菌其溶磷能力為可溶性磷含量增加70 mg/L以上,本文所篩選的4株溶磷木霉菌的有效磷含量皆滿足其溶磷技術指標要求。符合開發溶磷微生物肥料的技術指標。
近年來,人們越來越重視木霉菌的促生抗病作用,利用功能微生物已成為農業產業可持續發展的有效措施。研究表明,一些菌株具有促生、提產的作用,但田間施用仍然受限效果不佳,究其原因可能是室內環境溫度比較適宜,有利于菌群的定殖和促生活性物質的作用,而田間土壤溫度、濕度、營養成分、pH值、微生物種群數量、植被種類等因素都有可能影響生防菌的定殖。所以大田促生效果不理想、不穩定。本文由于篇幅有限,僅研究了溶磷木霉菌在搖瓶條件下的溶磷效果、以及對番茄幼苗的促生作用和小區試驗對番茄品質和產量的影響。下一步應深入研究在田間施用溶磷木霉菌后促生增產作用和施用前后土壤有效磷、有機質等營養性狀改善情況。
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Screening of aTr940 with the Function of Promoting Growth and Phosphorus-solubilizing as Well as Its Application in Tomatoes
WU Ziyan, MI Fang, GAN Hualei, ZHANG Yingying, YUAN Donghua, WU Jiasheng, MAO Weili
(Shanghai Wanlihua Biotechnology Co., Ltd, Shanghai 201611, China)
This study was conducted to obtain the active strains ofmicrobial fertilizers with the potential to dissolve phosphorus, prevention of plant diseases andpromoting growth.156 strains ofwere screened by the molybdenum-antimony anti-colorimetric method to get their phosphorus-dissolving activity, and an antagonistic screening test was conducted on petri dishes with PDA. Thirdly, the growth promoting effects of four strains of Trichoderma Tr940, Tr968, Tr1003B and Tr1077 with the highest phosphorus dissolving activity on tomato seedlings were determined by indoor pot experiments.1) The phosphorus-dissolving activity of 156 strains ofwas determined by the molybdenum-antimony anti-colorimetric method. The results showed that all testedcould release a certain amount of soluble phosphorus from Ca3(PO4)2to varying degrees.Among them, there were 14 strains ofwith phosphorus dissolving activity above 100 mg/L, and the phosphorus dissolving content ofTr940 had the highest phosphorus dissolving activity, 485.45 mg/L. 2) 14strains with good phosphorus-dissolving effects had varying degrees of antagonistic effects on plant pathogens such asetc. 3) The growth promoting effects of Tr940, Tr968, Tr1003B and Tr1077 on tomato seedlings were determined by pot experiments. The results showed that the root length, plant height, aboveground fresh weight, aboveground dry weight and underground dry weight of tomato seedlings were significantly different among the four strains of phosphorus dissolving Trichoderma and blank control. Among them, the growth promoting effect of phosphorus dissolving Trichoderma Tr940 was the best. 4) The effects of Tr940, Tr968, Tr1003B and Tr1077 on tomato yield and quality were determined by plot tests. The results showed that: Tr940 (Treatment 1), Tr968 (Treatment 2), Tr1003B (Treatment 3), and Tr1077 (Treatment 4) could increase the yield of tomatoes, and the yield increase rate in the 30-day plot test reached 24.02%, 18.67%, 19.32% and 16.54%, respectively. Besides, Tr940 (treatment 1) could improve the tomato quality, including soluble solids, sugar content and vitamin C.Trichoderma tr940 can promote the growth of tomato seedlings, improve the yield and quality of tomatoes. At the same time, the content of dissolved available phosphorus is 485.45 mg/L, which is in line with the technical index of developing phosphorus dissolving microbial fertilizer.
phosphorus-solubilizingspp.; phosphorus solubilizing activity; growth promotion
S154.3
A
2095-3704(2022)02-156-09
吳紫燕, 糜芳, 干華磊, 等. 一株具有促生溶磷功能的木霉菌Tr940的篩選及其在番茄上的應用[J]. 生物災害科學, 2022, 45(2): 156-164.
10.3969/j.issn.2095-3704.2022.02.28
2022-01-10
2022-03-18
上海市科技支撐項目(16391902400)
吳紫燕(1989—),女,碩士生,主要從事生物防治研究,522960292@qq.com。