QuEChERS-氣相色譜-串聯質譜法測定雞蛋中擬除蟲菊酯類農藥殘留

黃錦殷

（佛山市食品藥品檢驗檢測中心，廣東佛山 528000）

我國是雞蛋生產和消費大國，雞蛋作為我國居民日常膳食的重要組成部分，其質量安全應當引起重視。作為動物源性食品，雞蛋中的獸藥殘留一直是其主要安全風險因素，但其農藥殘留狀況同樣不可忽視。例如，2019年歐洲“毒雞蛋”事件是雞蛋因受農藥氟蟲腈污染，致使大量蛋雞被宰殺[1]。雞蛋中的農藥殘留主要是由飼料原料帶入，蛋雞采食后農藥及代謝物在雞蛋內沉積[2]。此外，農藥和獸藥并無明顯的界限，一些常見的農藥如敵敵畏、馬拉硫磷、氟胺氰菊酯、溴氰菊酯等也作為獸藥納入《食品安全國家標準 食品中獸藥最大殘留限量》（GB 31650—2019）[3]的管理。若養殖戶使用不規范，可能導致蛋雞和雞蛋受到污染。本文對雞蛋中的15種擬除蟲菊酯類農藥殘留進行探索，結合QuEChERS前處理和氣相色譜-串聯質譜法，建立了一種蛋類中農藥多殘留的檢測方法，該方法簡便快捷，靈敏度高，定量準確，能滿足食品安全國家標準的檢測需求。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

雞蛋，于佛山市內超市及農貿市場分散采購。

標準品：外環氧七氯B（內標）；七氟菊酯；烯丙菊酯；聯苯菊酯；苯醚菊酯；胺菊酯；甲氰菊酯；氟丙菊酯；氯氟氰菊酯；氯菊酯；氟氯氰菊酯；氯氰菊酯；氟氰戊菊酯；氰戊菊酯；氟胺氰菊酯；溴氰菊酯。乙腈、乙酸乙酯，均為分析純；

QuEChERS萃 取 鹽 包（含4 g無 水 硫 酸 鎂、1 g氯化鈉、1 g檸檬酸鈉、1.5 g檸檬酸二鈉）；QuEChERS凈 化 管（含900 mg硫 酸 鎂 和150 mg PSA）；0.22 μm微孔有機濾膜。

1.2 儀器與設備

氣相色譜-三重四極桿串聯質譜儀；氮吹儀；電子天平；均質器；離心機；渦旋振蕩器。

1.3 實驗方法

1.3.1 標準溶液配制

準確稱取一定量的各農藥和外環氧七氯B，用乙酸乙酯分別配制成1 000 mg·L-1的農藥混合儲備液和100 mg·L-1的外環氧七氯B內標儲備液，再分別稀釋成10 mg·L-1的農藥混合工作液和5 mg·L-1的內標溶液，-18 ℃避光儲存。各農藥根據需要用空白樣品基質逐步稀釋配成基質標準曲線以供使用。

1.3.2 試樣制備

取約1 kg新鮮雞蛋洗凈去殼后用組織勻漿機充分攪拌均勻，放入聚乙烯瓶中冷藏保存。

1.3.3 樣品前處理

稱取10 g試樣于50 mL塑料離心管，加入 20 mL預先在4 ℃冷卻的乙腈，渦旋混合3 min。加1包萃取鹽包，蓋上離心管蓋，劇烈振蕩1 min， 5 000 r·min-1離 心5 min。吸 取10 mL上 清 液 到 一支凈化管中，渦旋混勻1 min，5 000 r·min-1離心 5 min，準確吸取2 mL上清液于10 mL試管中，40 ℃水浴氮吹至近干。加入20 μL內標溶液（5 mg·L-1），加入1 mL乙酸乙酯復溶，過微孔濾膜，用于測定。

1.3.4 儀器條件

色 譜 柱：VF-1701ms色 譜 柱（30 m×0.25 mm× 0.25 μm）；色譜升溫程序：40 ℃保持1 min，然后以40 ℃·min-1升至120 ℃，再以5 ℃·min-1升至 240 ℃，再以12 ℃·min-1升至300 ℃，保持6 min；載氣：氦氣（≥99.999%）；流速：1.0 mL·min-1；進樣口溫度：280 ℃；進樣量：1 μL；不分流進樣；電離能量：70 eV；離子源溫度：280 ℃；傳輸線溫度：280 ℃；掃描方式：多反應監測（MRM）；內標法定量。多反應監測條件見表1。

2 結果與分析

2.1 前處理選擇

傳統動物源性樣品檢測農藥殘留時多采用有機溶劑提取，凝膠滲透色譜凈化的方式，我國多個動物源性食品中農藥多殘留的檢測標準如GB/T 5009.19—2008[4]、GB/T 5009.162—2008[5]、GB/T 20772—2008[6]等也采用這一前處理方法。但凝膠滲透色譜一般來說普遍存在凈化時間長、溶劑用量大的缺點。QuEChERS法由于操作簡便、溶劑消耗少、速度快、效率高等優點，已越來越多地用于動物源性樣品前處理中[7-9]。

目前主流的QuEChERS前處理法主要包括EN 15662：2018法（乙腈提取，萃取鹽包含檸檬酸和檸檬酸鈉）[10]以及AOAC 2007.01法（乙酸-乙腈提取，萃取鹽包含乙酸鈉）[11]。本文對兩種方法均進行了實驗，結果表明兩者對擬除蟲菊酯類農藥的回收率、檢出限、精密度等的影響區別不大，沒有顯著 差異。

表1 多反應監測（MRM）條件

2.2 線性范圍、檢出限和定量限

用空白樣品基質配制成5.0～200.0 ng·mL-1系列標準溶液，結果表明各化合物在此范圍內線性均良好，線性系數R2均在0.997以上。15種化合物及內標的總離子流圖見圖1。以3倍信噪比法及10倍信噪比法確定各化合物的檢出限和定量限，各化合物的線性系數、檢出限與定量限結果見 表2。

圖1 擬除蟲菊酯類農藥總離子流圖

表2 線性系數、檢出限和定量限

目前《食品安全國家標準 食品中農藥最大殘留限量》（GB 2763—2021）[12]規定了蛋類的107項農藥最大殘留限量，其中多種擬除蟲菊酯類如甲氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯等最大殘留限量均設為 0.01 mg·kg-1（ 氯 菊 酯 為0.1 mg·kg-1）； 而 GB 31650—2019則規定溴氰菊酯在蛋類中的最大殘留限量為30 μg·kg-1[3]，本方法檢出限、定量限均能滿足上述檢測需求。

2.3 回收率和精密度

在不含上述農藥的雞蛋中添加混合標準溶液，在0.01 mg·kg-1、0.05 mg·kg-1、0.10 mg·kg-1這3個濃度水平下進行加標回收實驗，每個濃度平行測定6次，考察方法精密度。結果表明，各化合物回收率均在80%以上，相對標準偏差為2.5%～8.3%，詳見表3。

表3 加標回收率和精密度

2.4 實際樣品測定

運用本方法對本市超市和農貿市場售賣的10批次新鮮雞蛋進行檢測，均未發現上述農藥殘留。

3 結論

本文建立了QuEChERS前處理結合氣相色譜-串聯質譜法同時測定雞蛋中多種擬除蟲菊酯類農藥殘留的方法，與傳統凝膠滲透色譜的前處理方法相比，消耗溶劑更少，操作更便捷，效率更高，同時該方法靈敏度高，精密度和準確度好，適用于大批量蛋類樣品的快速檢測。