湘西杜仲葉中六六六、滴滴涕的檢測

饒青青，歐陽位麒，王 然，張 慧，章發盛

（湘西土家族苗族自治州食品藥品檢驗所，湖南吉首 416000）

杜仲葉來源于杜仲科植物杜仲的葉片，有調血壓、降血糖、調血脂等功效，在湖南和河南等地區有作為食品原料使用的歷史。杜仲是我國特色植物資源，在我國分布廣泛，但資源利用率較低[1-3]。將杜仲葉與湘西黃金茶鮮葉混合加工，制成黃金杜仲茶，是湘西地區具有代表性的杜仲初加工產品，其成品既結合湘西黃金茶“高氨基酸、高茶多酚、高水浸出物”的品質特點，又能發揮杜仲產品的保健 作用[4]。

茶葉中的農藥殘留一直以來都受到國家的重視，從1982年農業部“農藥安全使用規定”至今陸續推出一系列針對茶葉農藥殘留的相關標準規定，然而這些標準及其限量指標與國際茶葉進口國家的標準之間還存在著一定的差距，需對我國茶葉農藥殘留的檢測及標準的更新制定進行進一步的研究與探索[5]。六氟環己烷（Hexachlorocyclohexane，HCH）俗稱“六六六”，是一種廣譜殺蟲劑，被用于果蔬、農作物的病蟲害控制，由于在全球范圍內被大規模使用，在環境介質中大量殘留[6]。雙對氯苯基三氯乙烷（Dichlorodiphenyltrichloroethane，DDT）俗稱“滴滴涕”，是1874年最早被合成的有機氯農藥，在農業生產上的使用歷程和六六六相似。六六六、滴滴涕具有親脂性、疏水性的特點，是一種難以被生物降解的持久性有機污染物[7]。此外，其還能沿食物鏈的蓄積從環境介質如水、土壤等中富集到高營養級的生物體中，從而危害其健康。有研究發現滴滴涕對鳴禽的腦部區域中含類固醇激素受體的發音系統等有影響[8]。除此之外，滴滴涕在影響人體生育、造成神經毒害等方面也有較多的研究[9]。因此，對湘西杜仲葉中六六六、滴滴涕的檢測有利于湘西杜仲黃金茶的生產以及湘西杜仲葉的開發利用。

1 材料與方法

1.1 樣品與試劑

樣品為湘西不同地區采摘的9批杜仲葉樣品。

乙腈、正己烷為色譜純；甲苯為優級純；固相萃取柱：Tea clean-up Column，1 g，6 mL；對照品：六六六、滴滴涕混合溶液，濃度均為50 μg·mL-1，農業部環境保護科研檢測所。

1.2 儀器與設備

7890B型氣相色譜儀（檢測器：μECD），安捷倫；色譜柱：DB-17（30 m×0.32 mm×0.25 μm）；AB135-S型電子天平，梅特勒-托利多；AH-30全自動均質器，銳科；5810R型離心機，艾本德。

1.3 實驗方法

1.3.1 儀器條件

氣相條件。氣相色譜設置：初始溫度150 ℃， 保 持2 min，以5 ℃·min-1升 溫 至280 ℃，保 持 4 min，再以120 ℃·min-1升溫至300 ℃，保持2 min； 進樣口溫度：280 ℃；檢測器溫度：300 ℃；載氣：高純氦氣；流速：1.0 mL·min-1；進樣量：1.0 μL；進樣方式：不分流進樣。

1.3.2 標準溶液配制

對照品溶液制備。取六六六、滴滴涕混標制成含量為40 μg·mL-1的使用液（注：含量計算以各同分異構體含量之和為其含量，即六六六含量為α-六六六、β-六六六、γ-六六六和δ-六六六之和，下文同）。準確量取使用液0.1 mL、0.5 mL、1.0 mL、5.0 mL和10.0 mL于100 mL容量瓶中，用正己烷定容并搖勻，制成含量為0.04 μg·mL-1、0.20 μg·mL-1、0.40 μg·mL-1、2.00 μg·mL-1以及4.00 μg·mL-1的系列標準曲線。

1.3.3 樣品處理

準確稱取樣品2 g于50 mL離心管中，加入20 mL 乙 腈，15 000 r·min-1均 質 提 取1 min，5 000 r·min-1離心5 min，待凈化。準確取10 mL提取液于用 10 mL乙腈-甲苯（3∶1）預洗過的固相萃取柱，下接雞心瓶，再用25 mL乙腈-甲苯洗滌小柱，40 ℃水浴中旋轉濃縮至約0.5 mL。加入5 mL正己烷進行溶劑交換，重復兩次，最后使樣液體積約為1 mL，待測。

圖1 六六六、滴滴涕對照色譜圖

表1 六六六、滴滴涕線性方程、相關系數及檢出限

2 結果與分析

2.1 線性關系

將配制好的系列標準溶液按1.3.1方法測定，得到的對照溶液圖譜如圖1所示，六六六和滴滴涕的各同分異構體的線性關系如表1所示。結果表明，本方法對六六六和滴滴涕的同分異構體有較好的分離效果，其線性關系也達到GB/T 27404—2008要求。經計算六六六檢出限為0.032 1 mg·kg-1，滴滴涕檢出限為0.072 5 mg·kg-1。

2.2 加標回收率實驗

按GB/T 27404—2008中檢驗方法確認技術要求，進行2倍檢出限、5倍檢出限和10倍檢出限 的3水 平 加 標 回 收 實 驗，即 按 照0.16 μg·g-1、 0.33 μg·g-1、0.80 μg·g-1的濃度加入對照溶液，結果見表2。由表2可知，六六六、滴滴涕加標回收率均達到標準要求（60%～120%），RSD也滿足標準要 求（＜30%）。

表2 加標回收率實驗結果

2.3 樣品檢測

按1.3.3處理9批次的樣品并上機檢測。結果表明，9批次樣品均未檢出六六六、滴滴涕，即六六六＜0.032 1 mg·kg-1，滴滴涕＜0.072 5 mg·kg-1。

3 結論與討論

現階段有關茶葉中六六六和滴滴涕的檢測方法主要有氣相色譜法、氣質聯用法等[10]。本文選用的氣相色譜法是農藥殘留檢測中的常用方法，而電子俘獲檢測器對六六六、滴滴涕具有較高的靈敏度。

近年來，世界各國對茶葉農藥殘留的檢測項目和限量值要求日趨嚴格，如日本的肯定列表Positive List System、歐盟標準EC 149/2008中對六六六、滴滴涕限量值均為≤0.2 mg·kg-1，我國標準NY/T 288—2018中滴滴涕限量值要求為≤0.05 mg·kg-1，日益嚴格的標準也使茶葉的生產及檢驗都將面對更大的挑戰。通過檢測，湘西地區的杜仲葉中均未檢出六六六和滴滴涕，這對湘西杜仲黃金茶的生產具有參考價值。