全自動血型分析儀與微板法在ABO血型篩查中的應用效果

趙鼎銘 曲執

（葫蘆島市中心血站，遼寧 葫蘆島 125000）

輸血在臨床各種治療中是必不可少的一種治療方式。為了患者在治療過程中所輸入的血液吻合、安全、有效，在輸血之前須進行ABO血型、RhD血型的檢測。血型主要受所屬基因決定，通過血型抗原呈現出不同的遺傳多樣性。在血型鑒別時，由于常常受ABO亞型、抗體或抗原降低、不規則抗體等影響，使得ABO血型的正反定型檢測中會呈現出不一樣的結果，從而使一般的試劑檢測無法直接判斷出正確的血型[1]。以往，大多數血站均是通過微板法進行血型檢測，但由于其操作流程復雜、繁瑣，人為影響因素較多，且損耗多，而在近年逐漸向標準、自動、快速方向發展，由半自動化的微板法漸漸演變為全自動血型分析儀法。為此，本文針對本血站2018年10月至2019年10月的無償獻血者，探究在ABO血型篩查中分別采用全自動血型分析儀法與微板法的檢測效果。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本文的100例樣本數據均是選取于在本血站進行無償獻血者，所選時間區間為2018年10月至2019年10月。樣本采用乙二胺四乙酸二鉀抗凝，每份2 mL，于采集后的12 h后進行血型檢測篩查。

1.2 方法 將樣本以3 000 r/min的轉速進行15 min的離心處理后，分別進行全自動血型分析儀與微板法檢測。

對照組給予微板法檢測，根據臨床中的微孔板紅細胞凝聚法原理，主要采用U型微孔板，利用全自動式加樣儀器進行加樣處理，即將血清與4%濃度的紅細胞各50 μL注入至每個孔位中，作正定型處理；將ABO反定型的紅細胞與血清各50 μL注入至每個孔位中，作反定型處理。待加樣完成后，將U型微孔板放入醫用型的低速率離心器中，以每分鐘1 700 r的轉速進行3 min的離心處理，其次再放置于振蕩孵育儀器中，以每分鐘120次的速率進行4 min的震蕩處理，放置靜止3 min后，通過波長為620 nm的酶標儀器進行比色處理。若臨界值＜0.6，呈陰性，為不凝聚狀態；若臨界值＞0.8，呈陽性，為凝聚狀態；若臨界值在0.6～0.8之間，則是灰區[2]。

試驗組給予全自動血型分析儀檢測，根據臨床中的微孔板紅細胞凝聚法原理，并結合儀器所附的說明書進行試劑、樣本、梯形V字型的底微板等裝卸操作。全自動血型分析儀會自動式進行讀碼操作，在此基礎上進行加樣與孵育，并通過電腦數據傳輸、處理、CCD圖等分析后，進行試驗結果的分析處理、判定、傳送、打印等。主要的加樣過程與方式：將抗A、抗B、抗D、抗A細胞、抗B細胞、抗O細胞、鹽水加入至加樣儀器中，并將各25 μL容量的1.6%濃度紅細胞、抗A、抗B、抗D、鹽水注入至每個孔位中，作正定型處理；將ABO反定型的紅細胞30 μL的試劑與20 μL已進行2倍稀釋處理的血清，注入至每個孔位中，作反定型處理。待加樣結束后，放置于36～38 ℃的溫度下進行1 h的孵育，全自動血型分析儀根據參數SPC、LIA、P/C進行結果的分析、解讀。SPC作為主要參考參數，若SPC大于10，呈陰性，為不凝聚狀態；若SPC小于10，呈陽性，為凝聚狀態；若SPC等于10，則為臨界點，具有可疑[3]。

若兩組檢測出的正反定型的樣本結果不同，則通過試管法、微柱凝膠法、吸收放散法進一步進行檢測確認。

1.3 觀察指標 統計并對比兩種血型篩查方式的血型錯誤率、亞型漏檢率、O細胞凝聚率，并觀察ABO血型的正反定型現象、O細胞凝聚中不規則抗體的概率。

1.4 統計學處理 將本次研究中的100例樣本數據應用于SPSS19.0進行軟件處理，計數資料采用χ2檢驗，用率（%）表示兩組血型篩查方式的試驗結果、ABO血型的正反定型試驗結果、O細胞凝聚中不規則抗體的試驗結果，進行卡方檢驗，組間對比若P＜0.05，即可證實組間具有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組血型篩查方式的試驗結果對比 由表1可知，兩組篩查方式均無錯誤率，試驗組的亞型漏檢率稍低于對照組，而試驗組的O細胞凝聚率高于對照組，但組間差異無顯著性，P＞0.05，組間具有可比性。

表1 兩組血型篩查方式的試驗結果對比[n（%）]

2.2 兩組ABO血型的正反定型試驗結果對比 試驗組的ABO亞型、正反定型不符、抗體降低的概率均稍高于對照組，而正常性血型的概率略低于對照組，組間差異性不大（P＞0.05）。見表2。

表2 兩組ABO血型的正反定型試驗結果對比[n（%）]

2.3 兩組O細胞凝聚中不規則抗體的試驗結果對比 試驗組出現不規則抗體的概率明顯高于對照組，組間具有統計學意義（P＜0.05）。見表3。

表3 兩組O細胞凝聚中不規則抗體的試驗結果對比[n（%）]

3 討論

輸血治療在各種疾病的救治與急救中具有重要作用，而給患者進行輸血前，有效、準確的血型檢測是保障治療的基礎與根本。據臨床統計，在健康的人群中有0.3%～2%的人群存在不規則抗體，而不規則抗體較容易引發溶血性輸血反應[4]。因此，準確的血型匹配以及對不規則抗體的篩查對于患者輸血治療具有重要影響。

在臨床中，對于血型的鑒定主要采用試管法、微板法、全自動血型分析儀法等方式。以往在臨床中多使用試管法進行ABO血型、RhD血型檢測，該檢測方式的結果雖然具有較高的精準性，但若進行大批量的樣本鑒定，則難以實現操作的迅速化、規范化，且在篩查過程中存在人為因素，也可能導致出現錯誤或漏檢現象[5]。微板法也稱作半自動檢測法，其可進行樣本的大批量檢測，但由于反應中使用鹽水為介質，在常規室溫下，容易產生較弱的凝聚現象或抗體難以檢測的現象，從而影響血型的最終鑒定結果[6]。

全自動血型分析儀法，其鑒定的全過程均在血型儀的自動化模式下進行完成，無須過多的人員處理、操作，所有流程、環節均在血型儀的監控下進行，且其反定型的溫度設定在36～38 ℃左右，最大程度地防止了免疫球蛋白M型冷抗體發生不同正反定型現象。該鑒定方式不僅能夠大批量地進行樣本的快速處理，對ABO血型、RhD血型、不規則抗體能有效、快速的進行篩查、判定，實現了流程上的自動化、簡便化、規范化、標準化，也有效避免了人為因素的干擾，降低了血型檢測的錯誤率、漏檢率[7]；該檢測方式從加樣、分配試劑、離心震蕩處理、結果及圖像的分析、處理、掃描、輸出等，使流程實現了一體化模式，也有效防止了在鑒定過程中的交叉污染影響，在減少工作強度的同時，提高了鑒定、篩查工作的效率。此外，其在檢測中所用到的容量，也僅是試管法與微板法的檢測試劑的一半，極大地減少了檢測的成本[8-16]。

由本次試驗可知，全自動血型分析儀與微板法在血型檢測中的錯誤率均為0，但應用對照組在檢測中的亞型漏檢率稍微多于試驗組，而試驗組的O細胞凝聚率相比對照組較高，但均無太大差異；在ABO血型的正反定型試驗對比中，對照組的ABO亞型、正反定型不符、抗體降低概率均低于試驗組，但組間差異無顯著性（P＞0.05）；在O細胞凝聚中出現不規則抗體對比中，試驗組能有效篩查出不規則抗體，其效果顯著高于對照組，P＜0.05。究其原因為，微板法即使能夠大批量實施標本檢測，但是鹽水為其反應介質，在室溫條件下能夠進行試驗，會導致稀有抗體以及弱凝集無法被檢測到。而對于全自動血型分析儀而言，（37±1）℃為反定型溫度，對于免疫球蛋白M型冷抗體導致的正反定性不一致可以充分避免，獲得上述理想結果，由此可說明，全自動血型分析儀對于血型的檢測具有較高的安全性、精準性，且能有效對不規則抗體進行篩查。

綜上所述，在ABO血型檢測中應用全自動血型分析儀，不僅能實現血型鑒定的標準化、規范化、快速化，還能安全、有效地進行ABO血型的篩查。