自身免疫性肝病相關自身免疫性抗體檢測的臨床應用

喻娓

（武漢市第七醫院檢驗科，湖北 武漢 430071）

自身免疫性肝?。╝utoimmune liver disease）屬于一種慢性肝臟疾病，主要包括原發性硬化性膽管炎（PSC）、原發性膽汁性肝硬化（PBC）、自身免疫性肝炎（AIH）等[1，2]。目前，關于自身免疫性肝病的病因、病機尚未完全明確，普遍認為由自身免疫及肝膽損傷所引起[3]。臨床缺乏特異性表現，且如果不及時有效治療，可能會引發肝衰竭，嚴重威脅患者的生命安全[4]。同時不同分型臨床治療方法存在差異，因此早期發現、明確診斷具有重要的臨床價值[5]。有研究指出[6]，不同類型與病理特征的自身免疫性肝病具有各自的特點，自身免疫性抗體可能也存在差異[7]。本研究結合2019 年6 月-2020 年12 月我院傳染科接診的140 例肝炎患者臨床資料，觀察自身免疫性肝病相關自身免疫性抗體的臨床應用價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019 年6 月-2020 年12 月武漢市第七醫院傳染科接診的140 例肝病患者為研究對象，其中原發性膽汁性肝硬化（PBC）34 例、自身免疫性肝炎（AIH）60 例、丙肝6 例、血吸蟲肝病4 例、肝硬化24 例、肝功能不全10 例、藥物性肝炎2 例。年齡17～82 歲，平均年齡（49.55±32.58）歲；女82例，男58 例。本研究經過醫院倫理委員會批準，患者自愿參加本研究，并簽署知情同意書。

1.2 納入和排除標準 納入標準：①均符合臨床肝病診斷標準[8]；②均未合并肝腫瘤、酒精性肝硬化等肝臟疾病[9]。排除標準：①合并肝、腎、心、腦血管系統等嚴重疾病者；②認知障礙、合并嚴重惡性腫瘤；③依從性較差，不能配合者；④隨訪資料不完善者。

1.3 方法

1.3.1 儀器和試劑 采用熒光顯微鏡（BH-2 型，重慶澳浦），應用歐蒙（杭州）醫學診斷有限公司提供的抗核抗體IgG 檢測試劑盒，基質分別為人Hep-2 細胞（HEP-2 cell）、猴肝（HEPAR PRIM）。采用浩歐博全自化學發光免疫分析儀，應用江蘇浩歐博生物醫藥股份有限公司提供的自身免疫性抗體八項的檢測試劑盒。采用日立牌全自動生化分析儀（型號：7600）及其配套試劑（由四川邁克生產）進行血清肝功能ALT、AST、GGT、ALP 各指標檢測。

1.3.2 檢測方法 運用磁微?；瘜W發光法對抗CENPB 抗體（CENPB）、抗線粒體抗體（M2）、抗Ro52抗體（Ro52）、抗GP210 抗體（GP210）、抗Sp100 抗體（Sp100）、抗肝腎微粒體抗體（LKM-1）、抗肝胰抗體與抗可溶性肝抗原抗體（SLA/LP）、抗1 型肝細胞溶質抗原抗體（LC-1）進行測定；運用間接免疫熒光法對抗核抗體（ANA）進行稀釋度檢測，陽性評定標準為在不同的基質細胞里有特征性黃綠色熒光形態出現。血清丙氨酸轉氨酶（ALT）、天冬氨酸轉氨酶（AST）、谷氨酰轉肽酶（GGT）、堿性磷酸酶（ALP）檢測C 采用酶法，嚴格按照《WS/T 404.1-2012 臨床常用生化檢驗項目參考區間》[10]的相關標準進行操作。正常值：ALT 為5～40 U/L，AST 為8～40 U/L，GGT＜40 U/L，ALP 為40～110 U/L[11]。

1.4 觀察指標 比較患者的自身抗體（CENPB、M2、Ro52、GP210、Sp100、LKM-1、SLA/LP、LC-1）檢出情況、PBC 和AIH 患者肝功能（ALT、AST、GGT、ALP）水平以及ANA 熒光核型（均質型、顆粒型、核仁型、胞漿顆粒型）。

1.5 統計學方法 采用統計軟件包SPSS 21.0 版本對本研究的數據進行統計學處理，采用（±s）表示符合正態分布的計量資料，組間比較采用t檢驗；計數資料采用[n（%）]表示，組間比較采用χ2檢驗；P＜0.05說明差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組患者自身免疫性抗體檢出率比較 PBC、AIH 患者的CENPB、M2、GP210、SP100、LKM-1 檢出率均高于丙肝、血吸蟲病、肝硬化、肝功能不全、藥物性肝炎，差異有統計學意義（P＜0.05）；而M2 抗體檢出陽性率高于CENPB、GP210、SP100、LKM-1 檢出率，差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 各組患者自身免疫性抗體檢出率比較[n（%）]

2.2 PBC、AIH 患者肝功能指標水平比較 AIH 組患者血清ALT、AST、GGT、ALP 水平高于PBC 組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 PBC、AIH 患者肝功能指標水平比較（±s，U/L）

表2 PBC、AIH 患者肝功能指標水平比較（±s，U/L）

2.3 PBC、AIH的ANA 熒光核型比較 AIH的ANA熒光核型中均質型比例高于PBC 組，顆粒型低于PBC，差異有統計學意義（P＜0.05）；二者核仁型、胞漿顆粒型比較，差異無統計學意義（P＞0.05），見表3。

表3 PBC、AIH的ANA 熒光核型比較[n（%）]

3 討論

隨著對自身免疫性肝病發病機制的不斷深入研究，其發病的診斷率越來越高[12，13]。目前，該病發病機制尚未明確，且無顯著特異性表現，多數患者肝功能異常，常常被誤診成為其他肝炎[14]。治療自身免疫性肝病通常使用激素類免疫抑制劑，如果診斷錯誤將嚴重影響臨床治療療效[15]。肝組織受到病毒感染后，肝細胞表層白細胞會大量活化，刺激自身B 細胞釋放自身抗體[16，17]。而自身抗體主要是器官、自身組織、細胞成分、細胞的抗體，在正常機體中呈較低水平表達。如果自身抗體表達水平超過正常水平，即提示機體肝功能受到一定損傷[18]。在不同種類慢性肝病均具有相似的臨床特征，即人體血清中具有肝臟疾病自身免疫性抗體，增加臨床診斷難度[19]。但是不同病型自身免疫性肝病對血清ANA 水平的影響各有差異，其中以AIH 造成的影響最為明顯。自身免疫性肝病相普遍存在特異性自身抗體，且自身抗體的滴度水平通常較高。因此，及時有效鑒別自身免疫性肝病對于患者的治療有重要意義[20]。

本研究中PBC、AIH 患者的CENPB、M2、GP210、SP100、LKM-1 檢出率均高于丙肝、血吸蟲病、肝硬化、肝功能不全、藥物性肝炎（P＜0.05），表明不同肝病患者以上各自身免疫抗體陽性率存在差異，但是PBC、AIH 患者各自身免疫抗體檢出陽性率較高，血清自身免疫抗體的高敏感性能夠用于篩查PBC、AIH，可作為檢測PBC、AIH的一個重要標志物。同時在PBC、AIH 患者中，M2 抗體檢出陽性率高于CENPB、GP210、SP100、LKM-1 檢出率（P＜0.05），該結論提示在自身抗體譜檢測中，血清M2 抗體的高敏感性能夠用于篩查自身免疫性肝病，可作為檢測自身免疫性肝病的一個重要標志物。AIH 患者ALT、AST、GGT、ALP 水平高于PBC（P＜0.05），表明AIH 患者肝功能ALT、AST、GGT、ALP 均高于PBC 患者，通過檢測肝功能指標，可較好的鑒別PBC 和AIH，進一步為AIH的診斷提供一定的指導意義，該結論與金巧菲等[21]的報道相似。此外，AIH 患者ANA 熒光核型中均質型比例高于PBC 患者，顆粒型低于PBC 患者（P＜0.05），二者核仁型、胞漿顆粒型比較，差異無統計學意義（P＞0.05），提示AIH 患者ANA 熒光核型主要表現為均質型，而PBC 主要表現為顆粒型，為鑒別AIH 提供一定有效的參考。核型特征在自身免疫性肝病中也具有一定的表現，對臨床的鑒別診斷也具有一定的臨床意義?？傊喂δ堋⒑诵洼o助協助自身免疫性抗體檢測，可進一步為自身免疫性肝病的鑒別診斷提供可靠依據。

綜上所述，自身免疫性肝病相關自身免疫性抗體的臨床中具有較高的應用價值高，但是為了進一步提高自身免疫性肝病的鑒別診斷，可輔以肝功能指標和核型檢測，以進一步提高自身免疫性肝病的臨床診斷水平。