健康老年人群尿液NAG及NAG/Crea參考范圍建立的探討

燕文敬，龔美亮，陳 瑞，焦 嬌，李玉茹，王 坤

解放軍總醫院第二醫學中心 檢驗科，國家老年疾病臨床研究中心，北京 100853

N-乙酰-β-氨基葡萄糖酶(N-acetyl- β- glucosaminase，NAG)是細胞溶酶體內的一種酸性水解酶，在腎單位近曲小管上皮細胞內含量豐富，正常情況下尿液中NAG含量較低，腎小管受損時，會導致大量NAG釋放入尿液，引起尿液中NAG升高。研究已證實尿NAG升高是腎早期損傷的敏感指標[1-3]。因尿液稀釋和濃縮的影響，隨機尿中成分濃度或活性檢測結果重復性較差，尿肌酐(creatinine，Crea)每日排除量較為穩定，隨機尿液中肌酐的濃度可以反映尿液的濃縮程度，臨床上常用尿肌酐作為其他排泄物的校正因子，計算隨機尿液中NAG/Crea的比值，即可及時反映腎小管受損情況，也能減少因隨機尿液濃縮程度差異帶來的影響，臨床上得到廣泛應用[4-5]。目前并沒有已達成共識的老年人群尿液NAG/Crea參考范圍，為了給臨床診療提供更加完善的輔診依據，本研究旨在探討老年群體尿液NAG、NAG/Crea的參考范圍。

資料與方法

1 資料 選擇解放軍總醫院第二醫學中心2021年4 - 7月健康查體人員體檢資料。排除標準：臨床診斷為糖尿病、高血壓、腎功能異常、腫瘤或其他惡性疾病。

2 NAG和尿肌酐檢測 采用西門子全自動生化分析儀Dimension EXL(德國，西門子醫療器械公司)，NAG檢測試劑盒(京械注準20152400968)及相應校準品、質控品(北京九強生物技術股份有限公司)；尿肌酐檢測試劑為西門子廠家原裝試劑。

3 分組和分析指標 世界衛生組織將≥60歲人群定義為老年群體[6]。本組依此將實驗對象分為青壯年組(＜60歲)和老年組(≥60歲)，比較兩組人員尿液標本NAG、NAG/Crea差異性。NAG/Crea=尿NAG活性/尿肌酐濃度。

4 統計學分析 統計學處理使用SPSS19.0軟件完成。符合正態分布的計量資料以±s表示，非正態分布的計量數據以Md(IQR)表示。計數資料以例數(百分比)表示，組間差異比較采用χ2檢驗。尿液NAG、NAG/Crea參考范圍制定為2.5 ～ 97.5分位數(P2.5～P97.5)；確定參考范圍制定是否需要區分性別和年齡采用Z檢驗，若Z＞Z*則需要分組建立各自的參考范圍[7]。P＜0.05為差異有統計學意義。

結 果

1 兩組尿液NAG/Crea等指標年齡比較 共納入915例體檢者，年齡分布在21 ～ 98歲，男性525例(57.4%)，女性390例(42.6%)。青壯年組419例，老年組496例。受限于單中心樣本來源的局限性，兩組性別組成差異有統計學意義(χ2=163，P＜0.001)，但本實驗納入對象標準和數量完全符合《WS/T 402-2012 臨床實驗室檢驗項目參考區間的制定》文件要求。尿NAG參考范圍的制定不需考慮年齡因素(Z＜Z*)，尿NAG/Crea參考范圍的制定需要區分年齡差異(Z＞Z*)。由表1知，兩年齡段數據Z檢驗統計量Z明顯小于臨界Z*(即無統計學差異)，符合相應的定義/要求。兩年齡段數據Z檢驗統計量Z已大于臨界Z*(即有統計學差異)，佐證了相應的定義/要求。

2 兩組尿液NAG/Crea等指標性別比較 尿NAG、NAG/Crea參考范圍的制定均不需考慮性別因素(Z＜Z*)。見表2。

3 NAG和NAG/Crea參考范圍分析 尿液NAG參考范圍為3.53 ～ 24.48 U/L。尿液NAG/Crea參考范圍：＜60歲為4.24 ～ 21.93 U/g·Cr，≥60老年人群為4.61 ～ 27.83 U/g·Cr。見表3。

表 1 不同年齡分組參考范圍Z檢驗Tab. 1 Reference interval Z-test grouped by age

表 2 不同性別分組參考范圍Z檢驗Tab. 2 Reference interval Z-test grouped by sex

討 論

2019年末，我國60歲及以上人口約有2.54億，占總人口的18.4%[8]。老年人群因身體功能的逐漸下降，激素水平、代謝能力等方面都異于年輕群體，所以在檢驗工作中，制定老年人群檢測項目的參考范圍尤為必要，當前已有不少研究用于制定老年人檢測項目的參考范圍，如紅細胞計數、血漿D二聚體水平等[9-10]。目前還沒有老年群體尿液NAG/Crea的參考范圍。

尿NAG作為腎損傷的一個敏感度較高的指標，其升高要早于尿素氮、內生肌酐清除率、腎小球濾過率等[11-12]。研究發現當基礎疾病并發癥涉及腎時，尿NAG可以作為一種腎標志物用來衡量患者的病情[13-16]。最新證據表明尿NAG不僅可以反映腎小管的受損程度，還與動脈粥樣硬化有較強的相關性。Kim等[17]在實驗中發現，尿NAG與頸動脈內膜中層厚度高度相關，推測可能是腎小管受損后發生氧化應激反應會產生相應的物質，進一步引發斑塊的聚集。

表 3 NAG和NAG/Crea參考范圍Tab. 3 NAG and NAG/Crea reference ranges

本研究結果顯示，隨機尿NAG活性水平沒有表現出年齡、性別上的統計學差異。分析其原因， NAG活性受限于隨機尿液的濃縮情況而產生較大的隨機誤差，而尿肌酐每日排除總量較為穩定，引入尿肌酐作為修正因子，采用NAG/Crea作為評估指標可以減少因隨機尿液濃縮程度不同產生的隨機誤差，提高臨床診斷的準確性。Liu等[18]實驗結果顯示尿NAG活性隨著年齡的增長而升高，且男性的活性要高于女性。我們認為，隨機尿本身NAG活性檢測結果并不穩定，另外單中心數據來源也會造成偏差，且我們的實驗主要針對老年人群，從樣本年齡架構上，兩個實驗存在不同，采用不同的試劑也可能產生偏差。Liu等的實驗并沒有引入尿肌酐這個校正因子做進一步比對。我們通過尿Crea比對后得出結論，尿NAG/Crea值隨著年齡的增長而升高，但不同性別的差異無統計學意義。

本實驗存在的局限：1)受限于單中心樣本來源的局限性，性別比例差異有統計學意義，有待多中心、跨區域、大樣本量數據的支持完善；2)是雖然提出了參考范圍，但缺少對早期腎損傷患者的驗證，下一步將進行臨床驗證。

綜上所述，本實驗初步建立了老年人群尿NAG、NAG/Crea的參考范圍，其中尿NAG參考范圍為3.53 ～ 24.48 U/L；尿NAG/Crea參考范圍為＜60歲人群4.24 ～ 21.93 U/g·Cr，≥60歲老年人群4.61 ～ 27.83 U/g·Cr。