金合歡素對酒精性脂肪肝的保護作用

張慧敏，李朝一，劉詩語，趙麗霞，李麗娟

（晉中信息學院，山西 太谷 030800）

0 引言

金合歡素不但具有解郁安神、理氣通絡的作用，還具有抗氧化、消炎、抗菌、抗病毒、抗腫瘤等作用[1]。酒精性脂肪肝是由肝臟負責代謝的，超過90%的酒精會在肝內被分解，使肝細胞膜內的脂質被氧化，從而損害肝細胞的膜，從而影響到脂肪酸的分解和代謝[2]。本次課題研究實驗將小鼠分為3組，分別為對照組、酒精組和金合歡素組。通過構建金合歡素模型，用酒精溶液對小鼠進行干預，在無菌環境下取出小鼠肝臟進行肉眼觀察及顯微鏡鏡下觀察。實驗過程中觀察小鼠的身體狀況的變化。經解剖對小鼠的肝臟進行病理分析，觀察小鼠肝臟是否有病變等特征，分析血清ALT及AST，探討金合歡素對小鼠酒精性脂肪肝的影響。結果表明酒精干預組的小鼠體重明顯下降，肝臟表面出現大小不等的白色空泡，有明顯的出血點，顏色變為暗紅色，且質地變糟粕。鏡下觀察可見酒精干預組小鼠的細胞核分布較分散，且邊緣模糊，無明顯界限。而金合歡素藥治組的小鼠體重無明顯變化，肝臟表面顏色為鮮紅色，并且光澤透亮。鏡下觀察其細胞核分布密集且輪廓清晰，界限明顯。與對照組比較，酒精組和金合歡素組血清AST、ALT的差異性較顯著，與酒精組比較，金合歡素組的指標明顯降低。在對小鼠灌胃金合歡素溶液后，小鼠的酒精性脂肪肝病變癥狀顯著減輕，揭示了金合歡素抗腫瘤的一種機制，在治療酒精性脂肪肝疾病方面有良好的應用價值。

1 材料與方法

1.1 溶液的配置

以PEG∶蒸餾水=0.05 g∶100 mL的比例，用蒸餾水將PEG顆粒溶解；

取金合歡素最大溶解度為60 mg/kg，用被溶解后的PEG溶液將其分化，然后加入蒸餾水稀釋；

將濃度為100%的酒精以酒精∶蒸餾水=60∶40的比例配置成濃度為60%的酒精。

1.2 用藥方式

取ICR級健康雌鼠15只，體重為18～22 g，將其分為3組，1組5只。分組后各組小鼠的體重無明顯差異。第1組小鼠為空白對照組，單獨連續灌胃PEG溶液7 d；第2組小鼠連續灌胃PEG溶液6 d，第7天對其灌胃濃度為60%的酒精溶液；第3組小鼠先灌胃金合歡素溶液及PEG溶液6 d，造模成功后第7天進行酒精溶液灌胃；隨后對所有實驗所用小鼠進行稱重，與第1次所稱體重進行對比并將小鼠脫頸處死，取出小鼠的肝臟，并做出切片，在顯微鏡下觀察其肝細胞結構的變化。

表1 藥物注射情況

1.3 實驗動物處置、標本采集

實驗所用小鼠均采用頸椎脫臼法將其處死，碘伏液消毒腹部切口，打開腹腔，取出肝臟。將肝臟進行脫水，石蠟包埋，切片，HE染色，封片后，在顯微鏡下觀察其病理變化。

2 結果

2.1 一般形態觀察

肉眼可見正常肝臟及建模后的肝臟顏色鮮紅，表面光澤透亮；而病變的肝臟表面有大小不等的白色空泡，質地變糟粕，顏色變為暗紅色，見圖1。

圖1 病理解剖肝臟

2.2 體重

第1組小鼠體重前后無明顯變化；而第2組小鼠體重明顯降低，差異性較大；第3組小鼠體重差異衛浴第1組和第2組之間，差異性較小，見表2、圖2。

表2 小鼠體重 單位：g

圖2

2.3 鏡下觀察

用HE染色方法對切片進行染色，然后在顯微鏡下觀察肝細胞。第一張圖片可觀察到肝小葉橫斷面呈不規則多邊形，其中央有一條縱貫長軸的中央靜脈，其外周是放射狀相間排列的肝板和肝血竇，細胞核分布較密集，界限明顯，輪廓清晰。而第二張病變組圖片中，其細胞核分布較分散，細胞核邊緣模糊，無明顯界限。經治療后可見第三張圖中細胞核界限依舊分布密集且邊緣清晰，可見明顯的界限，見圖3。

3 討論與結論

個別小鼠在灌胃酒精進行干擾之前有食欲不振情況，可被認為是灌胃過程對其食道產生影響。從而影響小鼠正常進食，因此會導致其體重下降。

酒精對肝細胞的毒性主要是通過影響肝臟的代謝，使肝細胞膜表面的脂質成分過度氧化，從而破壞了肝細胞膜[3]。肝細胞腫脹，壞死，對脂肪酸的分解和代謝發生障礙，引起肝內脂肪沉積，形成脂肪肝。90%以上的乙醇都在肝內分解代謝[4]。

本實驗在建立金合歡素的模型后，用酒精對其進行干預，在無菌環境下取出小鼠肝臟進行肉眼觀察以及顯微鏡下觀察，探討金合歡素對小鼠酒精性脂肪肝的影響。