綿羊梅迪- 維斯納病毒CA 蛋白可溶性表達(dá)、多克隆抗體制備及鑒定

李慧萍，陳思旭，張 良，史曉娜，劉淑英

（1.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010018；2.農(nóng)業(yè)農(nóng)村部動(dòng)物疾病臨床診療技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，內(nèi)蒙古呼和浩特 010018；3.內(nèi)蒙古自治區(qū)基礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010018）

綿羊梅迪-維斯納病 （maedi-visna disease，MVD） 的病原為梅迪-維斯納病毒 （maedi-visna virus，MVV）［1］。 感染MVV 的病畜以呼吸系統(tǒng)疾病為主要臨床特征，3 歲以上病畜有明顯表現(xiàn)，少數(shù)病畜沒有臨床癥狀但終身攜帶病毒［2］。 MVD 廣泛流行于各養(yǎng)羊大國(guó)，近年來(lái)印度、墨西哥也相繼報(bào)道有MVD 的流行［3-4］。 1966 年我國(guó)新疆維吾爾自治區(qū)和田地區(qū)于田羊場(chǎng)首次發(fā)現(xiàn)MVD［5］，2019 年內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)室研究人員發(fā)現(xiàn)在內(nèi)蒙古地區(qū)存在MVD 的流行［6］。 目前，MVD 尚無(wú)有效的治療方法， 盡管國(guó)內(nèi)外都開展了針對(duì)MVV 疫苗的研發(fā)，然而效果較差［7-8］。

MVV 為有囊膜的單股正鏈RNA 病毒， 含3個(gè)逆轉(zhuǎn)錄病毒共同的主要基因 （gag、pol、env），分別編碼3 個(gè)結(jié)構(gòu)蛋白（Gag、Pol、Env）［9］。 有研究表明［10］，gag 基因編碼保護(hù)DNA 的內(nèi)部結(jié)構(gòu)蛋白，其中， 分子量最大的是衣殼蛋白 （capsid protein，CA），在感染過程中能引起機(jī)體強(qiáng)烈的抗體反應(yīng)。此外，Preziuso 等［11］利用MVV CA 單克隆抗體經(jīng)免疫組化法對(duì)該病毒在綿羊體內(nèi)的分布進(jìn)行鑒定，發(fā)現(xiàn)在感染MVV 綿羊的肺臟、肺門淋巴結(jié)、乳房、脾、骨髓均有陽(yáng)性信號(hào)。 由此可見，MVV CA 蛋白及其抗體對(duì)MVV 的診斷具有重要價(jià)值。 目前，國(guó)內(nèi)鮮有關(guān)于MVV CA 蛋白研究報(bào)道。 該研究通過原核表達(dá)方法獲得重組MVV CA 蛋白并制備兔源多克隆抗體， 旨在為進(jìn)一步研究MVV CA 蛋白的生物學(xué)功能和研發(fā)MVV 血清學(xué)診斷技術(shù)提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 病料來(lái)源