過氧乙酸戊二醛復方消毒劑治療豬急性回腸炎效果研究

張 黎談小龍王 辰 譚 凡 鄭龍龍*

（1山西農業大學動物醫學學院，山西太谷 030801；2安徽省六安市畜牧發展中心，安徽六安 237000）

胞內勞森氏菌(lawsonia intracelularis,Law-bacteria)可引起的豬回腸、盲腸、結腸黏膜等部位呈以腺瘤樣增生為主要特征的腸道傳染病，常造成13～16周齡(3～4月齡)育肥期和成年豬群出現急性猝死和血痢的臨床癥狀[1,2]。我國養豬業在飼料“禁抗”壓力下，豬增生性腸炎(pig proliferative enteritis,PPE)對豬場造成的損失更為顯著，同時與非洲豬瘟的血便有相似之處，為降低該病造成臨床更大的損失，豬場管理者主要通過添加治療性藥物和口服疫苗的方式綜合防控[3,4]。

考慮到要謹慎使用抗生素和逐漸出現耐藥菌株的威脅，藥物防控效果越來越差，同時工作量大，操作復雜，嚴重制約了該病的有效防控。控制和預防豬回腸炎的長期策略應基于豬場特有的免疫接種計劃、生物安全和降低風險因素等綜合措施。過氧乙酸戊二醛復方消毒劑具有高效、穩定、低毒、刺激性小、易操作、水質要求低等優勢[5,6]，通過飲水消毒的方式相比投藥和疫苗免疫防控豬回腸炎是更優的選擇。

本文通過PCR檢測糞便攜帶細菌情況[7]，對比抗生素(泰妙菌素)和飲用水最常用消毒劑(漂白粉)對回腸炎的防控效果，探討過氧乙酸戊二醛復方消毒劑治療豬急性回腸炎的效果，為該病的控制提供新思路。

1 材料與方法

1.1 豬群情況

選取5個相同豬苗提供場(各500頭)的3月齡育肥豬，且有豬乃急性死亡，病豬臨床表現為排煤焦油樣黑色稀薄糞便。試驗前對豬乃糞便進行多重PCR鑒定，未檢測到豬沙門氏菌和螺旋體核酸，而胞內勞森菌核酸檢測為陽性。無菌棉簽每天各取糞便10份，連續采樣7天，總計350份，置于1.5 mL含生理鹽水的EP管中，-20℃備用。

1.2 試驗材料

過氧乙酸戊二醛復方消毒劑由山西農業大學動物醫學學院動物病理學實驗室提供。

1.3 試驗方法

1.3.1 治療方式

歐美國家常以泰妙菌素(100%)60 g/T作為治療豬回腸炎的“金標準”[8]，我國常以80%含量的泰妙菌素110～200 g/T拌料用于治療急性出血性回腸炎[9]，均取得較好的臨床效果。本文以100 g/T 80%含量的泰妙菌素(A組)、10 g/T漂白粉(B組)作為對照組，不同稀釋比例的過氧乙酸戊二醛復方消毒劑治療組(C組、D組、E組)作為試驗組，通過早晚各1次飲水，連續用藥7 d的方式，治療豬急性出血性腸炎，詳見表1。

表1 豬急性出血性回腸炎治療方法

1.3.2 多重PCR鑒定

無菌棉簽蘸取100 mg發病豬糞便加入1 mL無菌生理鹽水混勻，浸泡10 min后以2 000 r/min離心5 min，取上清液提取DNA，進行細胞內勞森菌等多重PCR檢測[10]。引用Elder已建立的特異性檢測方法，對糞便樣本進行胞內勞森菌(Law-bacteria)、豬沙門氏菌(porcine salmonellosis,PS)和豬蛇形螺旋體(serpulina hyodysenteriae,SD)的檢測[11]，其中，設計胞內勞森氏菌的引物為 Law-F：5’CACTCCG-3’，Law-R：5’-TGAAGGTATTGGTATTCTCC-3’，產物長度319 bp[12]；豬沙門氏菌的引物為PS-F：5’-TGC CTACAAGCATGAAATGG-3’，PS-R：5’-AAACTGG ACCACGGTGACAA-3’，產物長度為457 bp[13]；螺旋體引物為SD-F：5’-GGTACAGGCGGAAACACGAC-3’，SD-R：5’-TCCTATTCTCTGACCTACTG-3’，產物長度為1 550 bp[14]。引物由生工生物工程(上海)股份有限公司合成。反應條件為：94℃5 min，94℃30 s，58℃ 30 s，72℃ 30 s，共34個循環，72℃ 5 min，反應結束后的產物12℃保存。

1.3.3 糞便評分

腹瀉指數評分標準參照Kelly等提供的方法[15]，見表2。

表2 糞便評分標準

2 試驗結果

2.1 治療期間各治療組糞便評分

泰妙菌素(A組)和過氧乙酸戊二醛復方消毒劑(C組、D組，1∶1 000×20～1)治療期間均能在第3 d顯著治療豬急性回腸炎，減少臨床死亡；漂白粉(B組)和過氧乙酸戊二醛復方消毒劑(E組，1∶4 000)稀釋時效果相當，第5 d才能對豬急性回腸炎有治療效果。過氧乙酸戊二醛復方消毒劑(C組，1∶1 000)治療第6 d和過氧乙酸戊二醛復方消毒劑(D組，1∶2 000)、泰妙菌素(A組)治療第7 d能完全控住腹瀉。詳見表3。

表3 治療期間各治療組糞便評分結果

2.2 PCR鑒定

泰妙菌素(A組)和過氧乙酸戊二醛復方消毒劑(C組，1∶1 000)治療組第3 d的豬糞便中胞內勞森菌的核酸檢測呈陰性；過氧乙酸戊二醛復方消毒劑(D組，1∶2 000)治療組第5 d的豬糞便中胞內勞森菌的核酸檢測呈陰性；漂白粉(B組)和過氧乙酸戊二醛復方消毒劑(E組，1∶4 000)治療組第6 d的豬糞便中胞內勞森菌的核酸檢測呈陰性。詳見表4。

表4 治療期間糞便中的胞內勞森菌核酸檢測結果

3 討論

胞內勞森菌主要通過糞便排菌，豬發生急性出血性腸炎時糞便中的帶菌量很大，能夠污染圈舍內的用具和環境。胞內勞森菌常見的間接傳播媒介有：膠鞋、鐵鍬、老鼠等。接觸到病豬糞便的工具、人員和其他動物均可使病原菌進行長距離傳播。胞內勞森菌引起的豬急性出血性回腸炎的凈化工作比較困難，疫苗不能清除病原體攜帶者，需要采取綜合措施對其進行防控。病原菌嚴格胞內寄生，環境消毒僅能減少排泄物中的病原載量；藥物防控成本高，乃能暫時控制疾病造成的損傷，無法修復已經破損的腸絨毛，且容易形成耐藥性和造成藥物殘留。

日常飲水消毒具有操作簡便、成本低廉、安全高效，不易產生耐藥性，并可降低排泄物中病原載量。畜禽日常飲用稀釋過的過氧乙酸戊二醛復方消毒劑后，可有效降低畜禽排泄物中的病菌含量，且對豬急性回腸炎具有治療作用。超低劑量稀釋的過氧乙酸戊二醛復方消毒劑治療豬急性回腸炎，在使用后第6 d，豬糞便中胞內勞森菌核酸呈陰性。

4 結論

綜上所述，過氧乙酸戊二醛復方消毒劑對治療豬急性回腸炎效果明顯，在生豬養殖過程中有潛在的飲水消毒應用前景。